2型糖尿病气阴两虚型患者血清中氨基酸与相关指标的分析

鲁 娜， 马小芬， 马晓丽， 李琳琳， 王 烨， 王丽凤， 骆 新， 毛新民，兰 怡

(新疆医科大学1省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室， 2药学院， 3基础医学院， 4中医学院， 乌鲁木齐 830011；5附属中医医院， 乌鲁木齐 830000)

2017年全球有4.51亿糖尿病(DM)病人,其中约有500万人死于糖尿病[1]。2型糖尿病(T2DM)是一种慢性进行性疾病, 发病率高,死亡率高[2]。T2DM患者中城镇居民患病率高于农村人口[3]，可能与生活方式和饮食习惯有关。人体体液中多种代谢产物及内源性物质的变化均与T2DM密切相关[4]。T2DM属中医“消渴”范畴，虽然各医家对其诊治的方法各有千秋，但公认的基本病机还是本虚标实，本虚为气阴两虚，标实为痰浊、水湿、淤血等[5]。检测血清中空腹血糖和葡萄糖水平能够预测T2DM的发病风险[6]，酪氨酸、异亮氨酸、亮氨酸是2型糖尿病气阴两虚型的代谢性标志物[7]。王家乐等[8]利用现代医学研究成果及技术进行2型糖尿病气阴两虚型的氨基酸与相关指标关系的研究，发现氨基酸与体质指数、总胆固醇、甘油三酯具有显著的相关性。本研究旨在探讨2型糖尿病气阴两虚型患者血清中亮氨酸、酪氨酸、胱氨酸与生理和生化指标的相互联系，为T2DM中医辨证分型客观量化提供依据，并探讨它们对T2DM预测的可行性和价值。

1 资料与方法

1.1研究对象对新疆医科大学附属中医医院177例2型糖尿病(T2DM)志愿者进行资料采集，其中气阴两虚型89例，男性43例，女性46例。由专业医护人员测量志愿者的身高、体质量、腰围(WC)、臀围(HC)、腰臀比(WHtR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)等指标。

1.1.1 诊断标准 体质指数(BMI)<18.5 kg/m2为体重过低，24 kg/m2≤BMI <28 kg/m2为超重、BMI≥ 28 kg/m2为肥胖(标准参照《成人体重判断》)；收缩压(SBP)≥ 140 mmHg和舒张压(DBP)≥ 90 mmHg为高血压(标准参照《中国高血压防治指南》)；总胆固醇(TC)≥ 6.2 mmol /L、甘油三酯(TG)≥ 2.3 mmol/L，满足以上1种即判为血脂异常(标准参照《中国成人血脂异常防治指南》)；空腹血糖(FBG)≥7.0 mmol/L或餐后2 h血糖>11.0 mmol/L为糖尿病(参照《中国糖尿病诊疗标准》)。

1.1.2 中医辨证分型标准 参照周仲英主编普通高等教育"十五"国家级规划教材《中医内科学》,进行中医辨证分型，气阴两虚型：倦怠乏力，自汗盗汗，气短懒言，口渴喜饮，五心烦热，心悸失眠，渡赤便秘，舌红少津，舌体胖大，苔薄或花剥，脉弦细或细数。

1.2方法

1.2.1 实验试剂及仪器 AQC衍生试剂包(美国Waters公司),乙腈(色谱纯，Sigma-Aldricl试剂公司),甲醇(色谱纯，Sigma-Aldricl试剂公司),高效液相色谱仪(Waters e2695),荧光检测器(Waters 2475),全自动生化分析仪(BS-120),离心机(Thermo，LEGEND MICRO21)。

1.2.2 氨基酸代谢性标志物 采用HPLC法检测尿液中17种氨基酸含量，找到氨基酸代谢性标志物，2型糖尿病气阴两虚型患者血清中氨基酸的特征性代谢物是胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)和亮氨酸(Leu)。

1.2.3 血样处理 采用静脉穿刺抽取志愿者的空腹血液，用于测定血清中的客观指标。

1.2.4 生化指标的检测 运用全自动生化分析仪检测血清中空腹血糖(FBG)、葡萄糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平。

1.3统计学处理采用SPSS17.0统计学软件，运用Pearson相关分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

Pearson相关性分析显示，2型糖尿病气阴两虚型患者中，Cys与BMI呈显著性正相关，与WC呈显著性负相关(P<0.05)，Tyr与TG呈显著性正相关，与BMI、TC呈显著性负相关(P<0.05)，Leu与BMI呈显著性正相关，与HDL、HC呈显著性负相关(P<0.05)(表1)。

表1 2型糖尿病气阴两虚型Cys、Tyr、Leu与客观指标的相关性

注:*P<0.05,**P<0.01。

3 讨论

DM是由于细胞代谢作用缺陷引起的葡萄糖、氨基酸及脂质代谢紊乱的一种综合征[9]。Wang等[10]研究表明，芳香族氨基酸参与体内儿茶酚胺类激素的合成，支链氨基酸主要在肌肉分解供能，精氨酸与尿素循环、免疫功能有密切关系，因此，血清中这些氨基酸水平的改变必然会改变相应的生化代谢和生理功能。传统医学认为，T2DM属于“消渴”范畴，主要病变部位在肾、胃、肺等部位，病机关键为亏耗阴津，燥热偏盛[11]。中医辨证分型是辨证施治的具体表现，由于辨证分型主观性差异较大，缺乏客观指标(BMI、TG、TC、FBG等)，严重影响了中医医治T2DM的治疗水平和可信度[12]。本课题组前期工作研究[13]发现2型糖尿病气阴两虚型患者血清中氨基酸的特征性代谢物是胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)和亮氨酸(Leu)。

本研究结果显示，2型糖尿病气阴两虚型患者血清中的Cys与BMI呈正相关，与WC呈负相关，Tyr与TG呈正相关，与BMI、TC呈负相关，Leu与BMI呈正相关，与HDL、HC呈负相关。高贝贝[4]研究发现，T2DM组血清中的Tyr与TG具有显著正相关，Leu、Val与FBG、DBP、BMI具有显著正相关，本研究结果与之类似。造成这些差异的原因可能是Cys是一种含硫氨基酸，是人体非必需氨基酸的一种，也属于脂肪族氨基酸，同时又是生酮氨基酸，Cys既有促进机体细胞氧化和还原机能，参与蛋白质的合成，也有参与糖异生，促进内源性糖原的生成的作用，对BMI有很大影响[14]，Cys水平越高，气阴两虚T2DM的BMI水平也增高，Tyr属于芳香族氨基酸代谢途径中的全局性调控蛋白性调控功能的DNA结合蛋白，在转录水平上控制与Phe合成及运输相关的多种关键酶和运输蛋白的表达，且高浓度的Tyr抑制生理状态，故Tyr水平越高，其BMI、TC水平被抑制，而TG水平被促进。

综上所述，2型糖尿病气阴两虚型患者血清中的Cys、Tyr、Leu与BMI具有显著的相关性，且Cys、Leu和Tyr与BMI的相关性在2型糖尿病气阴两虚型患者血清中的表达水平具有差异性，究其原因可能与饮食和蛋白质代谢途径不同有关，这将为T2DM中医证候本质研究作出有益的探索。