超声造影参数与甲状腺癌患者肿瘤恶性程度的关系

沈红梅 魏立爽 李璐

(延边大学附属医院超声科，吉林 延吉 133000)

甲状腺结节是甲状腺最常见的疾病之一，随着我国居民生活水平不断升高及饮食结构逐渐改变，甲状腺结节的发病率呈逐年升高趋势，已成为困扰我国居民健康的重要问题之一〔1〕。早期对甲状腺结节的良恶性进行有效鉴别，有利于为临床治疗方案的制定提供指导，对改善患者预后具有极其重要的意义〔2〕。迄今为止，病理组织活检是国内外公认的甲状腺结节诊断“金标准”，但该诊断方式会对患者造成一定程度的创伤，患者依从性较低，存在一定的局限性。二维超声是目前临床上用以筛查甲状腺结节的最常见方式，可较清晰地反映甲状腺结节的数量、部位及其与周边组织的关系等情况，然而在结节良恶性鉴别中敏感性较低，存在较高的漏诊率与误诊率〔3〕。目前，超声造影技术已被广泛应用于腹腔实质性脏器疾病的鉴别及辅助诊断中，且效果显著，可实时评估目标组织器官的血流情况，并以此反映组织器官的功能状态及性质〔4〕。本研究拟分析超声造影参数与甲状腺癌患者恶性程度的关系，旨在为临床甲状腺结节良恶性的鉴别诊断提供一种有效的手段。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年2月至2018年2月辽宁大学附属医院收治的甲状腺癌患者79例作为研究组。另取同期接受治疗的甲状腺腺瘤患者80例作为对照组。研究组男45例，女34例，年龄45～79岁，平均(57.23±5.62)岁。对照组男47例，女33例，年龄42～79岁，平均(57.29±5.64)岁。两组上述各项指标对比差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。纳入标准〔5〕：(1)所有患者经手术病理组织活检确诊；(2)入院前均未接受过相关抗肿瘤治疗及甲状腺超声造影检查；(3)临床病历资料完整。排除标准：(1)既往有甲状腺手术史者；(2)伴有颈部局部或全身感染性疾病者；(3)合并心、肝、肾等脏器功能严重受损者；(4)合并其他恶性肿瘤疾病者；(5)存在交流沟通障碍或精神疾病者；(6)正参与其他研究者；(7)妊娠期或哺乳期女性。所有患者知情同意，且医院伦理委员会予以批准。

1.2研究方法

1.2.1甲状腺结节超声造影检查〔6〕首先采用灰阶超声对病灶进行常规检查，然后切换为CPS噪音模式，聚焦在病灶以下水平。选择肘静脉，以21G套管针穿刺建立静脉通路，注入2.5 ml的造影剂，随后采用5 ml 0.9%的氯化钠溶液冲管。选取病灶内强化最显著的区域为感兴趣区，定量分析并获得相关参数水平，主要包括峰值强度(PI)、达峰时间(TIP)及平均通过时间(MTT)。

1.2.2采用PCR法检测甲状腺组织增殖基因、侵袭基因的表达水平 采集术中肿瘤组织标本，利用Trizol试剂对细胞进行裂解，加入0.2 ml氯仿高速离心，取上层澄清液进行检测。首先加入相同体积的异丙醇沉淀RNA胶装块并予以清洗、干燥处理，明确RNA的纯度与浓度，以反转录试剂盒合成获取cDNA，最后以荧光定量PCR试剂盒对增殖基因、侵袭基因进行扩增。其中增殖基因主要包括程序性细胞死亡因子(PDCD)4，靶向Xklp2靶蛋白(TPX2)、蛋白磷酸酶4调节亚基(PP4R)1；侵袭基因包括解聚素金属蛋白酶(ADAM)9，Bcl-6共抑制因子样蛋白(BCORL)1，肿瘤抑癌基因(ST)7L，趋化因子受体(CXCR)4。获取计算机软件中的PCR扩增曲线，并计算上述目的基因的mRNA表达量。

1.3统计学方法 采用SPSS20.0软件，计数数据行χ2检验。计量数据行t检验。超声造影参数与甲状腺癌患者增殖基因、侵袭基因的关系予以Pearson相关性分析。

2 结 果

2.1两组超声造影参数水平对比 研究组PI、TTP、MTT水平比对照组显著降低(均P<0.05)，见表1。

表1 两组超声造影参数水平对比

2.2两组增殖基因表达水平对比 研究组PDCD4、PP4R1基因表达水平比对照组显著降低，而TPX2基因表达水平比对照组显著升高(均P<0.001)，见表2。

2.3两组侵袭基因表达水平对比 研究组ADAM9、BCORL1、CXCR4基因表达水平比对照组明显升高，而ST7L基因表达水平比对照组显著降低(均P<0.001)，见表2。

2.4甲状腺癌患者超声造影参数与增殖、侵袭基因的相关性分析 甲状腺癌患者PI、TTP、MTT与PDCD4、PP4R1、ST7L基因表达水平均呈正相关关系，而与TPX2、ADAM9、BCORL1、CXCR4基因表达水平呈负相关关系(均P<0.001)，见表3。

表2 两组增殖基因、侵袭基因表达水平对比

表3 甲状腺癌患者超声造影参数与增殖、侵袭基因的相关性分析

3 讨 论

二维超声是临床上首选的筛查甲状腺结节的影像学手段，但由于部分恶性结节的超声表现较为复杂，往往存在一定的交叉、重叠等，从而导致假阳性或假阴性的发生〔7～9〕。超声造影是继二维超声及彩色多普勒超声后的飞跃，主要是通过观察组织血流灌注情况等辅助评估疾病性质。有报道显示〔10～12〕，恶性肿瘤内部的血供较为丰富，当造影剂流经此类血管后会导致参数水平出现异常，这为超声造影用于甲状腺良恶性结节的鉴别诊断提供了可能。

本研究结果表明，研究组PI、TTP、MTT水平较低，与汪彩英等〔13,14〕的研究结果类似，说明了超声造影参数可有效鉴别诊断甲状腺结节的良恶性。分析原因，笔者认为甲状腺恶性结节具有新生血管较多、功能尚未成熟及呈非均匀性杂乱排列等特点，加之幼稚的新生血管难以满足迅速生长的肿瘤细胞对氧气和养分的需求，从而导致其出现缺氧、缺血状态，进一步促使造影过程中病灶呈低增强或无增强特点，因此PI值降低，TTP与MTT缩短〔15〕。此外，甲状腺癌组织中存在明显的增殖基因表达失衡。究其原因，肿瘤细胞的恶性增殖主要来源于促增殖基因和抗增殖基因表达平衡被打破，而随着肿瘤恶性程度的不断增加，增殖基因失衡情况逐渐加重，最终导致相关基因表达水平明显异常〔16～18〕。PDCD4属于甲状腺癌细胞的抗增殖基因，具有诱导癌细胞凋亡的作用；PP4R1则是抑癌基因之一，在恶性肿瘤组织中的表达水平明显降低；TPX2则参与了纺锤体组装、形成过程，因此随着肿瘤细胞染色体基因的异常扩增，其表达水平显著升高。另外，甲状腺癌组织中也存在显著的侵袭基因表达异常。其中主要原因可能在于侵袭基因异常表达在肿瘤细胞的远处转移过程中发挥着至关重要的作用，是肿瘤恶性进展的最主要原因。其中ADAM9主要通过降解基质、接触细胞发挥促侵袭转移的作用；BCORL1属于转录共抑制因子之一，可通过和E-cadherin启动子区域结合，发挥抑制转录的作用；CXCR4的表达升高可有效促进甲状腺癌细胞的增殖、侵袭；ST7L则是抑癌基因之一，具有抑制肿瘤细胞克隆形成及侵袭转移活性的作用〔19〕。Pearson相关性分析也再次证实了超声造影参数水平可在一定程度上反映增殖基因、侵袭基因表达情况，从而可有效评估甲状腺癌的恶性程度。

综上所述，甲状腺超声造影参数应用于甲状腺良恶性结节的鉴别诊断中具有一定的价值，且甲状腺超声造影参数可从客观角度反映甲状腺癌的增殖、侵袭活性，并有助于评估甲状腺癌的恶性程度。