刘利莎 (河北省望都县动物疫病预防控制中心 072450)
仔猪水肿病病原菌的分离鉴定及药敏试验
刘利莎 (河北省望都县动物疫病预防控制中心 072450)
2017年3月,望都县谦鹏猪场106头断乳3~10d、体况健壮的仔猪陆续发病,主要表现为发病急、死亡快,有的晚上还见吃料,第2天清晨就死在栏里。病程稍长者呈现眼睑、结膜、耳部、颈部水肿。蓄主用青霉素、庆大霉素、地塞米松等治疗,收效甚微,到化验室就诊时(以断奶15d)已累计发病25头,死亡17头。经剖检胃大弯和喷门部位胃壁水肿,结肠肠系膜及淋巴结水肿;水肿部位切开,可见黏膜层和肌层之间有胶冻样物,表面有液体流出,呈无色或茶色;胃底弥漫性出血,肠黏膜红肿;心包、胸腔、腹腔有积液,暴露空气后成胶冻状。有的病例无水肿变化,但内脏、肠道出血。为确定病原,对病死仔猪做病原的分离鉴定和药敏试验。
1.1 细菌的分离培养、纯培养及鉴定 (1)无菌取病死的脑、肝脏、脾等组织分别接种于普通琼脂培养基、麦康凯培养基,将接种物分别在有氧和无氧条件下培养,经37℃、培养、24h后取出可发现,分离菌无论在有氧和无氧条件下均可以生长,说明此菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长出隆起、圆形、、湿润、边缘整齐的灰色、半透明的菌落,而在麦康凯培养基上,均长出单一的红色菌落。(2)将纯培养物涂片镜检,可见革兰氏阴性、两端钝圆的小杆菌,单个或成双存在,运动力检查阳性。(3)三糖铁试验,三糖铁试验结果:斜面培养基变黄,底层变黄,产酸产气。初步鉴定为大肠杆菌。(4)取纯培养物涂片镜检做生化试验,结果能发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖、阿拉伯糖;不发酵蔗糖、肌醇;不产生硫化氢,不分解尿素。
1.2 细菌的敏感药物试验 (1)以消毒后的直径3mm的金属打孔器在接种好的琼脂平板上打孔,加药于孔内(粉剂需加满孔)并在琼脂培养皿背面标记出青霉素、链霉素、新霉素、庆大霉素、氧氟沙星、氟苯尼考、头孢氨苄、利福平、呋喃妥因、磺胺嘧啶等各种试验药物名称。(2)置37℃生化培养箱中培养24h后取出,观察记录并分析结果,根据各孔周围有无抑菌环及其抑菌环直径大小,判定病原菌对各种试验药物的敏感度。抑菌环直径大于15mm为高度敏感,10-15mm中度敏感,小于10mm为低度敏感。(3)根据以上标准筛选出分离菌对新霉素、氧氟沙星、氟苯尼考、头孢氨苄几种药物为高度敏感。
(1)根据发病情况、临床症状、剖检变化,结合细菌的分离鉴定,确诊本病为由大肠杆菌引起的仔猪水肿病。(2)仔猪水肿病主要发生于断奶1~2周的仔猪,并且病猪绝大多数是生长快且肥壮的仔猪,其发病率虽低,病死率可达90%以上。其发病机理较为复杂,目前公认的是:病原性大肠杆菌进入肠道,耐过宿主抗菌作用,附着于肠粘膜上定殖,利用肠道内的适宜条件大量繁殖,产生水肿病毒素,当猪体经肠道吸收毒素进入血液,即引起肠毒血症,导致水肿病发生。猪水肿病的发生往往与某些应激因素有关。缺乏运动、受寒、断乳前后饲料变更突然、饲料单纯或吃了过量高蛋白饲料导致消化不良和胃肠机能紊乱等,都是诱发仔猪水肿病的重要因素。本病例的发病诱因有三方面:一是仔猪断乳分栏,突然改变生活环境;二是断乳期间突然变更饲料;三是自配饲料中蛋白质含量过高。(3)中草药具有抗病保健、中和毒素、提高机体免疫力、调整胃肠机能、无毒无残留等特点用。中草药治疗水肿病有很好疗效。微生态制剂就是很好的例证。微生态制剂具有维持微生态平衡、生物夺氧、生物拮抗、增强机体免疫力、合成各种酶和营养物质的独特作用,因而在水肿病的治疗中被广泛应用。作者正是采用中西结合的综合防治方法,以抗菌消炎、保肝解毒、利尿消肿为治疗原则,对发病猪群首先进行敏感药物注射治疗同时,使用氯化钙、葡萄糖、甘露醇、维生素等保肝解毒、利尿消肿进行辅助治疗,并在饲料中添加中药和微生态制剂,增强治疗效果,对未发病猪群在使用敏感药物进行预防治疗的同时,也在饲料中添加中药和微生态制剂。采取上述措施后,预防性治疗的70头仔猪,无一发病,治疗病猪18头,除1头重症病猪死亡外,其余病猪一周后精神、食欲逐步恢复正常。半月后回访,仔猪群再未发病,生长发育良好。(4)药敏试验可以看出,该菌对许多药物有耐药性,这是畜主用药效果不明显的主要原因。因此,在治疗细菌病时,用药前最好先做药敏试验来指导用药。只有使用有效药物进行治疗,结合对症治疗和严格的综合卫生防疫措施,才能迅速控制疫情,减少经济损失。
(1)该猪场引起仔猪水肿病的病原是大肠杆菌。(2)引起仔猪水肿病的诱因有三方面:一是仔猪断乳分栏,突然改变生活环境;二是断乳期间突然变更饲料;三是自配饲料中蛋白质含量过高。(3)该猪场的大肠杆菌对许多药物有耐药性,但对头孢氨苄、氟苯尼考、新霉素和氧氟沙星敏感。(4)用中草药治疗仔猪水肿病有很好的疗效。
(2018–07–18)
S858.28
B
1007-1733(2019)01-0039-01