金银花和蒲公英抑菌、抗氧化以及抗紫外作用初探

青杰超，林子然，2，莫开林

(1.四川农业大学风景园林学院,四川 成都 611130;2.四川师范大学附属中学,四川 成都 611100；3.四川省林业科学研究院，四川 成都 610081)

金银花又名忍冬，为忍冬科忍冬属植物，是常用的一种中药材。金银花初开时为白色，后转为黄色，因而得名金银花。金银花的主要有效成分包括有机酸类、黄酮类化合物、环烯醚萜苷类、三萜皂苷类、挥发油、棕榈酸乙酯和其他类成分[1-2]。金银花具有抗菌谱广、抗菌作用强的特点[3]，可有效降低绿脓杆菌感染小鼠的死亡率[4]。金银花还具有抗内毒素、抗炎解热、抗病毒、抗氧化、增强免疫、利胆保肝的作用[2，5]。蒲公英为菊科蒲公英属多年生草本植物，富含黄酮类，多糖、多酚、植物甾醇类、色素类、三萜类、挥发油类等活性物质，具有抗氧化、抗菌消炎、抵制肿瘤、提高免疫力、保肝、促进胃肠动力、调节肠道菌群等功能特性[6][7]。金银花和蒲公英都是传统的中药材，也是常用的药食两用植物。两种植物除用于临床治疗之外，还具有明显的提高免疫力、抗氧化、美容养颜等保健作用，可应用于食品、美容、保健等产品。植物抑菌作用在生鲜食品保鲜中有着很好的应用前景[6]。添加蒲公英的饮料可不额外添加防腐剂，用于生产新型保健饮料更加健康营养[8]。

对于中药材抗菌、抗氧化、防晒等保健功能的研究，对于传统中药材的综合开发利用具有重要意义。对药食两用中药材保健功能的验证，可促进药食两用中药材在食品、美容、保健行业中的应用，提高中药材的经济价值，促进中药材的发展。本文对金银花和蒲公英两种中药材的抗菌、抗氧化、抗辐射效果进行了试验分析，以期为促进金银花和蒲公英的开发利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

金银花，蒲公英均购自药店。化学试剂均为分析纯。金银花和蒲公英材料购回后用植物材料粉碎机进行粉碎后用于化学成分的提取试验。供试菌种分别为霉菌类和细菌类两大类，其中霉菌分为黑曲霉、黄曲霉；细菌分为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌。

1.2 试验方法

1.2.1 提取物的制备

称取粉碎后的红苞凤梨叶10 g，按料液比1∶25 加入75%乙醇溶液于具塞三角瓶中，在70 ℃恒温水浴锅中震荡浸提1 h，然后 4 000 r·min-1离心5 min，用8层纱布过滤，取清液用真空旋转蒸发器浓缩至膏状，再用蒸馏水溶解定容至10 mL，其浓度为 1 000 g·L-1(指1 mL 提取液相当于1 g 红苞凤梨叶干样品)，最后置于4 ℃冰箱中保存待用。

1.2.2 抗菌试验

1.2.2.1 菌种活化及菌悬液的制备

将4 种供试菌种接入相应的摇瓶培养基中进行活化，细菌活化18 h，霉菌活化40 h，然后再将活化后的菌种转接到相对应的斜面培养基上进行培养。用接种环分别刮取一定量已活化好的菌种于9 mL无菌生理盐水中，充分摇匀，再用10 倍稀释法将菌悬液稀释至含菌量为107 CFU·mL-1的实验用菌悬液。

1.2.2.2 提取物抑菌活性的测定

将15 mL 经高压灭菌的培养基倒入无菌培养皿中，静置冷却，待凝后加入0.1 mL 菌悬液于平板上，用无菌玻璃涂布棒将菌液涂布均匀，制成带菌平板。然后用无菌打孔器打出直径为6 mm 的孔，在每个孔加入80 μL 红苞凤梨叶乙醇提取液，以无菌蒸馏水做空白对照，每孔平行1 次。细菌于36 ℃恒温培养24 h，霉菌于27 ℃培养48 h。观察菌落生长情况，采用十字交叉法测量抑菌圈直径。

1.2.3 抗氧化活性试验

抗氧化活性珠测定采用DPPH法[9]，将蒲公英与金银花提取物配制成1 000 μg·mL-1的乙醇溶液用于测定；配置100 ug·mL-1的Vc溶液作为对照。在25 mg·ml-1DPPH甲醇溶液中加入0.1 ml样品溶液，混匀后置于暗处反应0.5 h后，在515 nm波长处测定其吸光值A。空白用甲醇代替样品测得吸光值A0。重复3次。清除率(%)=[(A0-A)/ A0]×100。

1.2.4 防晒活性试验

分别配制100 μg·mL-1的蒲公英、金银花乙醇提取物和各萃取物、40 μg·mL-1抗坏血栓溶液，利用紫外可见分光光度计测定提取液在200～400 nm范围的紫外吸收值，分别计算各种溶液在UVC(200 nm～280 nm)区的；UVB(280 nm～320 nm)区的；UVA(320 nm～400 nm)区的平均吸光度值。

2 结果与分析

2.1 抑菌活性分析

将金银花和蒲公英提取物添加到培养基中对6种待试菌种进行抑菌活性测试，抑菌效果如表1：金银花及蒲公英对不同菌种的抑菌效果对照表所示。

表1金银花、蒲公英对不同菌种的抑菌效果数据

菌种金银花提取液抑菌圈直径d(mm)蒲公英提取液抑菌圈直径d(mm)黑曲霉11.1019.70黄曲霉7.736.45大肠杆菌8.0811.85金黄色葡萄球菌7.0014.85沙门氏菌13.0019.25铜绿假单胞菌6.406.15无菌蒸馏水6.006.00

由表1可知，金银花提取液对沙门氏菌的抗菌作用最强；对铜绿假单胞菌、黄曲霉和金黄色葡萄球菌的抗菌作用不明显；对大肠杆菌有一定的抗菌能力。蒲公英提取液对黑曲霉的抗菌作用最强；对黄曲霉和铜绿假单胞菌的抗菌作用不明显。总体来说，蒲公英的抗菌能力要强于金银花，尤其是对黑曲霉、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抗菌能力，均高于金银花提取液；对于黄曲霉和铜绿假单胞菌来说，两种提取液的抗菌能力均不理想。

2.2 抗氧化活性分析

DPPH·清除能力是评价生物活性成分清除自由基能力最广泛使用的方法之一 (李倩倩等，2018)。以Vc为对照，测定了金银花和蒲公英的抗氧化活性，结果如图1所示。金银花和蒲公英都对DPPH·自由基具有较强的清除能力， DPPH·自由基清除率分别为84.2%和94.5%。蒲公英的抗氧化活性高于金银花。

图1 蒲公英和金银花的DPPH·自由基清除率

图2 蒲公英和金银花的紫外吸收率

2.3 抗晒活性

金银花和蒲公英提取物的紫外线吸收数据如图2和表2所示。金银花对波段位200 nm～400 nm的紫外线的吸收能力要强于蒲公英。在UVA(320 nm～400 nm)段，金银花的吸光度明显高于蒲公英；在UVB(280～320 nm)和UVC(200 nm～280 nm)段金银花的吸光度略高于蒲公英。

表2金银花、蒲公英提取物紫外线吸收数据

3 结论

本文通过对金银花和蒲公英的75%乙醇提取物从抗菌性、抗紫外线性和抗氧化性三方面进行了对比试验。首先，两者均对黄曲霉和铜绿假单胞菌的抗菌能力不明显，对黑曲霉、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性而言，蒲公英要优于金银花；其次，蒲公英提取液的对自由基的清除率要高于金银花提取液10.3%；最后，金银花提取液线(UVA、UVB、UVC波段)的吸收能力要普遍高于蒲公英提取液。本实验结果可以对以金银花和蒲公英为主要成分的抗菌药物、防腐剂、食品添加剂、抗氧化剂、防晒产品的开发提供一定的参考价值。