二极管激光治疗对牙周炎骨膜蛋白含量的影响

张燕升，刘英，喻洁，王伟峰，吴艳

(1．北京崇文区口腔医院，北京 100050；2．川北医学院附属医院口腔科，四川 南充 637000)

牙周炎是细菌多因素导致的牙周组织慢性进行性破坏性疾病，治疗方法包括基础治疗和手术治疗。牙周引导再生术是在传统的牙周翻瓣术基础上，将引导再生膜和骨粉植入手术区域，使牙周组织再生的常用手术方法[1]。在手术过程中，由于后牙根分叉较小，根面凹陷等解剖因素，很难彻底清除菌斑牙石；且术后常出现引导膜暴露于口腔有菌微环境导致感染，很难使已被破坏的牙周组织完全再生。骨膜蛋白(Periostin，PN)是新发现的胞外基质蛋白，在人体多种正常组织中表达，如皮肤、肝脏、淋巴结等，表达量可能与结缔组织中成纤维细胞数量呈正相关[2]。Ruangsawasdi等[3-5]发现PN作为一种重要的炎性因子，参与牙周病的发生发展和牙周组织的改建，在牙齿发育、应激导致的牙周组织修复和再生发挥着重要的作用。目前国内外对PN与牙周组织相关研究主要涉及牙周膜，而对PN与牙龈、龈沟液相关性研究较少。二极管激光作为一种低能量激光已广泛应用于口腔疾病的治疗，李宪国等[6-7]采用波长为 810～1 064 nm的二极管激光行牙周袋消毒，术后牙龈出血显著减少，牙周袋变浅，说明二极管激光作为辅助治疗对慢性牙周炎有较好的治疗效果。本实验将对部分中重度慢性牙周炎行引导再生术，并即刻采用二极管激光牙周袋杀菌治疗，观察术后牙周临床指标的变化和龈沟液PN浓度的变化，以期为临床提供更好的慢性牙周炎治疗方法。

1 临床资料

1.1 一般资料

选择2013年1月至2015年6月在川北医学院附属医院就诊的磨牙或前磨牙慢性牙周炎患者40例，其中男性22例，女性18例，30～50岁，平均年龄40岁(失访6例未纳入)。所有入选患者均签署知情同意书，实验得到本院口腔医学伦理委员会批准。纳入标准：近1年未接受任何牙体牙髓和牙周治疗；牙周袋4～8 mm,磨牙根分叉病变<3度，牙齿松动<3度，口内余留牙不少于28颗，纳入患牙100颗。排除标准：有全身系统病史；怀孕；近半年服用抗生素、激素、免疫抑制剂；吸烟者；磨牙牙周袋深度不超过8 mm，但牙龈重度萎缩至根尖者。

1.2 器械与材料

激光参数设置：仪器设备：D5二极管激光(LA5D0 001.1 意大利)，工作波长810 nm ,激光输出功率5 W，光纤直径：0.2 mm。牙周袋杀菌：功率2 500 mW,模式SP。Grace手用刮治器(Hu-Friedy，USA)；洁牙机(MSZ,USA)；引导膜(海奥，烟台)；Bio-Oss 骨粉(Geistlich，Switzerland)；ELISA kit 试剂盒(California，USA)；Whatman 3 MM试剂盒(Whatman 公司，英国)；AE 240 1/10 万电子天平( Mettler 公司，瑞士)；酶标仪(TECAN 公司，澳大利亚)。

1.3 方法和疗效评估

通过投硬币法随机将40例慢性牙周炎患者分为激光+手术组、手术组，每组各20例，健康者20人纳入对照组。实验前由同1名牙周医生全口牙龈上洁治术，口腔卫生宣教。3个月后，激光+手术组行牙周引导再生术，术中采用二极管激光牙周袋杀菌，每牙30 s，并植入Bio-Oss骨粉覆盖胶原膜缝合，术后激光治疗连续7 d。手术组行牙周引导再生术，术中植入Bio-Oss骨粉和胶原膜后缝合。术后两组患者均服用抗菌素3 d，并使用复方氯已定漱口水1周，10 d后拆除缝线。术后每个月复查口腔卫生，并口腔卫生宣教。

1.3.1 龈沟液PN浓度的测定 3组在洁治前，手术后6个月、12个月分别提取龈沟液。用无菌纱条隔湿，1 min 后将消毒称重 2 mm×8 mm 的 Whatman 3MM 滤纸条分别插入取样手术牙的近中、 远中、 颊侧、 舌(腭)侧牙周袋内，共 4 条，30 s 后取出分别放入含 0.1 % PBS的 EP 管内，再次称重，两次称重差值即为龈沟液量，取均值。12 h 内将 EP 管置-80 ℃冰箱备用。用PN ELISA kit 试剂盒分别测定龈沟液 PN水平，记录吸光度值，根据 PN浓度与吸光度成正比换算成 PN浓度。

1.3.2 牙周临床指标检测 3组均在洁治前、手术后6个月、12个月检查龈沟出血指数(BI)、探诊深度(PD)，探诊深度检查牙的颊舌侧近中、中央、远中共计6个点，测得6个值。

1.4 统计学分析

数据处理应用 SPSS 17.0 统计软件，牙周临床指标和PN浓度变化3组两两比较，采用t检验进行统计分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床效果

牙周手术治疗后，两组均控制了感染，但激光+手术组治疗后牙周袋更浅，牙龈红肿、增生症状得到显著改善，口腔卫生也得到较大的改善；与激光组相比，手术组术前牙龈炎症较轻，手术1年后牙龈红肿出血得到改善，但和激光组相比部分牙龈有少许红肿(图1)。

2.2 龈沟液PN的浓度

术前3组龈沟液PN的浓度对照组最高，手术组和激光+手术组较低，手术后6个月和12个月，两组PN浓度均上升，激光+手术组更高，与对照组相比，差异具有统计学意义(P<0.05)(表1)。

表1 治疗前后各组龈沟液PN浓度变化±s，μg/L)

2.3 牙周临床指标变化

手术后两组牙周袋深度显著降低，术后6个月和对照组相比牙周袋更浅，差异有统计学意义(P<0.05)。术后6个月、12个月激光+手术组与手术组相比无统计学意义(P>0.05)。激光+手术组和手术组BI术后也得到显著改善，6个月时激光+手术组和对照组相比，差异具有统计学意义(P<0.05)，术后12个月两手术组和对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05)(表2)。

表2 3组治疗前后PD、BI的变化±s)

3 讨论

二极管激光是一种穿透力较强的激光，切割组织时炎症反应轻，操作方便，手术时间短，广泛的应用于口腔疾病治疗，尤其对软组织疾病具有较好的治疗作用[8-9]；Gómez等[10]指出龈下刮治辅以二极管激光治疗牙周炎，术后牙龈出血和疼痛得到显著改善，认为二极管激光是一种很好的辅助牙周治疗方法。骨膜蛋白是runt结构域家族成员之一，参与骨、牙齿、心脏等组织的形成与结构的维持。当组织机械应力增加时，富含胶原纤维的结缔组织增多，且参与牙周病形成及牙周组织损伤修复与重塑[11-12]。Kumaresan等[13]将60例牙周炎患者分组，一组非手术治疗后低能量激光照射，一组非手术治疗，术后发现激光组骨膜蛋白含量较低，非手术治疗组骨膜含量较高，说明低能量激光对牙周炎具有较好的治疗作用。

本研究通过对40例患者100颗患牙行牙周引导再生治疗，手术后6个月两组牙周袋变浅，且12个月激光+手术组牙周袋深度比手术组更浅，说明牙周引导再生治疗辅助二极管激光治疗具有较好的治疗效果。激光+手术组在12个月和对照组相比，差异具有统计学意义，且效果优于手术组，说明二极管激光对牙周炎的控制和维护具有更好的有效性。激光+手术组和手术组术后探诊出血也得到显著改善，术后6个月时激光+手术组边缘龈稍红于手术组，但术后12个月时激光+手术组的效果更好，说明二极管激光能有效控制牙龈炎症，缓解牙龈出血红肿。从图1也可看出二极管激光能显著改善慢性牙周炎的牙龈红肿的临床症状。12个月组激光+手术组和手术组牙周袋深度和牙龈探针出血检测指标无统计学意义，这可能与两组患者口腔卫生维护不一致，个体差异大等有关。龈沟液PN浓度检测可以看出激光+手术组在6个月和12个月显著高于手术组，说明激光组能更好的控制牙周炎症；当有炎症时PN含量减少，说明PN参与了牙周组织的修复过程，二极管激光是辅助治疗慢性牙周炎的有效治疗方法[14-15]。

二极管激光对慢性牙周炎具有良好的临床效果，有很好的应用前景[16-18]，但本研究观察时间较短，样本量小，且由于手术治疗后3个月患者刷牙和吸吮出血症状消失，6例患者不愿提取龈沟液进一步检查造成失访，可能会对结果有影响，还需要课题组后续研究。