不同治疗方案对猪自然感染猪流行性腹泻的疗效观察

王艳丰，张丁华，朱金凤，赵秀敏

（河南农业职业学院牧业工程学院，河南 中牟 451450）

猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起猪的一种急性、高度传染性、高致死性肠道传染病，临床特征为呕吐、腹泻和脱水[1]。不同年龄的猪均易感，但对仔猪危害最大，病死率最高。即使猪耐过存活，但康复后生长缓慢，饲料报酬降低，饲养成本增加，经济效益下降[2]。自2010年10月以来，由于PEDV变异株的出现，PED在我国一直大面积暴发。2013年以后，PED暴发导致美国猪场每年损失9亿至18亿美元，韩国40%的猪场受到影响，给生产者造成巨大经济损失。

目前，对PED尚无有效治疗药物，但采取抗病毒、防止细菌继发感染、补液、止呕及修复肠黏膜等措施，可有效减少该病引起的经济损失。本试验对自然感染PED的患猪采用不同治疗方案进行对比试验，并对治疗效果进行比较分析，以期筛选出有效治疗PED的方案。

1 材料与方法

1.1 试验动物

2017年11 月至2018年3月，安阳市（AY）、开封市(KF)、周口市（ZK）、新乡市（XX）4个猪场的339头2～28日龄患病哺乳仔猪，临床表现为水样腹泻、呕吐和脱水等。

1.2 试验药物

1）猪白细胞干扰素；2）中药复方口服液（由白头翁、黄连、黄柏、秦皮、葛根、黄芩、白术、党参、茯苓等组成，按一定比例混合、煎煮3次，取上清液过滤后，制成生药规格为1.0 g/mL）；3）复方乙酰甲喹（5%乙酰甲喹、庆大霉素、0.5%阿托品）。

1.3 疾病诊断

1.3.1 病理学诊断

尸体消瘦，严重脱水，眼窝凹陷，皮肤干燥，弹性降低。小肠壁菲薄，透明，内有大量黄色液体，肠黏膜脱落，肠系膜淋巴结肿大或出血。胃内含有灰白色凝乳块，胃黏膜充血或出血。有的病例肾脏有少量针尖状出血点，肝脏有灰白色坏死点。不同发病猪场病变存在一定差异。

1.3.2 实验室诊断

1）PEDV抗原检测：采用韩国某公司生产的PEDV抗原检测卡，按使用说明书进行检测，5～10 min内判定结果。结果发现，AY、KF、ZK和XX猪场在对照线区（C）和检测线区（T）各出现1条紫红色线，故判定有PEDV感染。2）核酸检测：经PCR检测除4个猪场均为PEDV阳性外，AY、ZK猪场PCV2阳性，KF猪场PRV为阳性。3）细菌分离鉴定：无菌取病死猪的肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结等组织，划线接种于普通营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板、绵羊血琼脂平板，37 ℃培养24～48 h，观察菌落在各培养基的生长情况，挑取培养物涂片，革兰染色镜检，结果发现，AY、ZK猪场有大肠杆菌混合感染。

经病理学诊断和实验室诊断，AY、ZK猪场为PEDV与PCV2、大肠杆菌混合感染，XX猪场为PEDV感染，KF猪场为PEDV与PRV混合感染。

1.4 试验设计

每个猪场选取典型病例随机分成3组，分别是干扰素组（Ⅰ组）、中药组（Ⅱ组）、抗生素组（Ⅲ组）。同一猪场各组饲养管理条件一致，各试验组隔离饲养，用药及处理情况见表1。

1.5 疗效评价指标

1）治愈：用药物治疗后临床症状完全消失，精神及饮食恢复正常为治愈，统计治愈数计算治愈率。2）显效：用药物治疗后临床症状明显减轻，精神及饮食恢复好转的为治疗显效，统计显效数计算显效率。3)有效：为治愈率与显效率之和。

1.6 统计学分析

应用SPSS 16.0统计软件对试验数据进行显著性检验，用Duncan’s法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 4个地区猪场3种治疗方案对PED疗效对比

停药3 d内观察临床症状，统计死亡数、治愈数、有效数等指标并计算，结果见表2。

从表2可以看出，Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的治愈率分别为50.0%～66.7%、56.0%～ 82.1%、40.0%～ 50.0%，有效率分别为66.7%～80.0%、72.0%～92.9%、52.0%～70.0%，以Ⅱ组治愈率和有效率最高，其次是Ⅰ组，最后是Ⅲ组。不同治疗方案在同一猪场治愈率和有效率不同，如AY猪场3组治愈率分别为66.7%、80.0%和50.0%；同一治疗方案在不同地区的治愈率和有效率也不同，如Ⅱ组在4个地区的治愈率分别为80.0%、56.0%、73.3%和82.1%，说明治疗效果会受诸多因素的影响。

2.2 3种治疗方案对PED总体疗效对比结果见表3

从表3可以看出，3种治疗方案对PED有着不同的治疗效果，其中以Ⅱ组治愈率和有效率最高，分别为72.9%和85.4%，死亡率最低，说明中药复方口服液对PED具有良好的治疗效果。从治愈率来看，Ⅰ组与Ⅲ组相比差异显著（P＜0.05），Ⅱ组与Ⅲ组相比差异极显著（P＜0.01），Ⅰ组、Ⅱ组之间差异不显著（P＞0.05）；从有效率来看，Ⅰ组、Ⅱ组与Ⅲ组相比差异显著（P＜0.05），Ⅰ组、Ⅱ组之间差异不显著（P＞0.05），说明中药复方治疗PED效果最好，显著优于抗生素组，同时表明干扰素也可用于PED的治疗。

表1 试验动物分组与处理

表2 4个地区猪场3种治疗方案对PED疗效对比

表3 3种治疗方案对PED总体疗效对比（）

表3 3种治疗方案对PED总体疗效对比（）

注：同列数据肩标字母相同或无字母表示差异不显著（P＞0.05），不同小写字母表示差异显著（P＜0.05），不同大写字母表示差异极显著（P＜0.01)。

Ⅰ组 60.3a 14.4 74.6a 25.4Ⅲ组 44.9Bb 17.5 62.4b 37.6

3 小结与讨论

自2010年10月以来，我国10多个省市暴发PED，对养猪业造成了严重的经济损失。特别是PEDV变异株的出现，与传统毒株(2012年前)的基因相比存在较大变异，使得现有的疫苗毒株CV777保护力不佳。目前用于治疗PED的主要有生物制剂、药物、植物提取物、小分子制剂和抑制剂等[3]，其中以中药、干扰素临床试验应用报道较多。

干扰素（IFN）是受体细胞分泌的一种广谱抗病毒糖蛋白，通过激活细胞中多种功能基因的转录，调节各信号传导通路的协同作用，从而发挥抗病毒、抗细菌、抗寄生虫、免疫调节等生物学功能，具有明显的种属特异性[4]。本次试验显示IFN对PED的治愈率为50.0%～66.7%（平均为60.3%），与赵永旭等[5]报道的治愈率50%～70%接近，且在不同猪场使用效果差异较大，治愈率为37.5%～70.0%，但低于韩国英等[6]报道的治愈率92%，分析原因可能是与其人工感染后用药较早，而自然病例存在感染程度、混合感染、感染日龄及继发感染等影响因素有关。IFN对严重病例治疗效果不佳，原因可能是仔猪PED感染严重时，肠道损伤较为严重，大量腹泻导致机体脱水和酸中毒，仅用IFN不能缓解脱水和酸中毒症状。同时，IFN必须在病毒感染早期(此时体内病毒尚未广泛散布和引起严重病变)使用才能奏效，且需要反复多次使用。

中兽医辨证认为PED属于湿热毒邪内蕴所致。湿热上蒸，故精神沉郁；胃失和降，故呕吐；湿热犯脾，故食欲减退；湿热下迫，水湿不能分利，肠道传导失职，故泻如注，粪便腥臭，尿短少。治宜芳香化浊、健胃醒脾、除湿止泻、补中益气和清热解毒[7]。中药复方口服液由白头翁散加味（葛根、黄芩、白术、党参、茯苓等）而成。朱买勋等[8]研究发现由白术、茯苓、黄芪、黄芩等组成的复方，能明显抑制PEDV的致病变作用，直接灭活作用和复制抑制试验效果比较明显，细胞保护率均超50%。本次试验中药口服液对PED治愈率为56.0%～82.1%（平均为72.9%），高于刘衍芬等[9]、尹宝英[10]报道的治愈率为50%和52%～54%，分析原因可能是与其未采取止呕、补液等对症治疗措施有关，但低于杨云乔等[11]报道的治愈率86.7%。作用机制可能与中药可以加速组织修复、减轻炎症反应和调节免疫，以及保护线粒体、稳定细胞结构、稳定膜结构、调整酶活性和抗继发感染有关[12]。

试验结果表明，IFN和中药复方口服液均可作为治疗PED的方法，其中以中药复方效果较好。但两者在治疗时都必须配合止呕、补液、减缓肠蠕动及修复肠黏膜等治疗措施，且治疗时间越早，疗效越好。但同一种治疗方案在不同地区的不同猪场治疗效果存在差异，主要与发病日龄、感染程度、治疗时间、混合感染、疗程，以及是否采取对症治疗措施等因素有关。

4 结论

中药复方口服液由白头翁、黄连、黄柏、秦皮、葛根、黄芩、白术、党参、茯苓、石榴皮等组成，具有清热解毒、凉血止痢、除湿止泻等功效，对PED具有一定的治疗效果。根据试验结果，推荐中药复方口服液按3～5 mL/头或0.75 mL/kg体重，灌服，2次/d，连用5 d，对PED有良好的治疗效果。同时，IFN作为具有广谱抗病毒和免疫调节作用的细胞因子，在感染早期治疗亦有一定的效果。