奶牛乳房炎的检测与诊断

吴文学 ， 王天坤 ， 王朋朋 ， 张海燕 ， 马文阁 ， 高 光

(1.中国农业大学动物医学院 ， 北京 海淀 100193 ； 2.北京市昌平区动物疫病预防控制中心 ，北京 昌平 102200 ； 3. 中国兽医药品监察所 ， 北京 海淀 100081)

奶牛乳房炎是奶牛乳腺的一种炎症，通常因细菌感染而引起[1]。一般根据临床症状等可将乳房炎分为临床乳房炎和隐性乳房炎[2]。临床乳房炎的乳房和乳汁有肉眼可见的临床变化，常表现为乳区肿胀，皮肤发红，触诊乳房发热、有硬块、疼痛敏感，奶产量减少，乳汁变黄白色，呈血清样或水样，内有絮状物或凝块。检查可发现乳汁pH值偏碱性，体细胞计数和氯化物含量均增加。隐性乳房炎的乳房和乳汁通常无肉眼可见的变化，必须采用间接方法对奶样中炎症相关因子进行检查才能确诊，如：体细胞数上升、电导率增加、牛奶中的酶和其他特定蛋白增加，牛奶中脂肪、乳糖和酪蛋白等组份的含量下降等[3]。进行乳房炎检测或诊断时，可以从奶罐中采样进行群体水平的检测，也可以采集每个乳区的奶样或每头牛各乳区的混合奶样，进行个体水平的检测。

1 群体水平的检测

1.1 大罐奶体细胞数的检测 体细胞数与产奶量、牛奶品质密切相关，也是乳房炎诊断的一个重要指标，因而通过检测大罐奶中的体细胞数可以检测牛群患隐性乳房炎的状况[4]。只要乳腺中存在致病微生物，白细胞就会进入腺泡、乳管和乳池中来对抗感染，导致牛奶中的体细胞数增加[5]。如果将感染乳区的牛奶与健康乳区的牛奶混合，这头牛所产的牛奶以及大罐中整群牛的牛奶的体细胞数都会有所增加。对于大多数牛场，大罐奶体细胞数的理想控制标准和实际控制标准是小于20万/mL[5]。在乳房炎控制较好的牛场，大罐奶体细胞数始终会低于10万/mL。但是，在传染性病原得到有效控制的牛场，即使大罐奶体细胞数低于20万/mL，也会有环境性病原菌引起的临床乳房炎发生。因为环境性病原引起的乳房感染通常持续时间都很短，牛群的感染率也很低，而且许多临床型乳房炎患病乳区所产的牛奶也不会加到奶罐里，所以不会对大罐奶的体细胞数产生明显影响[6]。在这种情况下，每月检测的大罐奶体细胞数或牛场体细胞数并不能反映乳区的长期健康状况。如果大罐奶体细胞数超过20万/mL，说明这个牛群的乳房炎发病率升高。对于大罐奶体细胞数很高的牛群，应采取有效的乳房炎控制措施来逐步降低体细胞数，并通过每月和每年的大罐奶体细胞数记录来评估控制效果。

1.2 临床乳房炎的发病率 由于大罐奶体细胞数无法反映牛群整体临床乳房炎的情况，必须通过临床乳房炎的发病率记录来正确评价牛场的乳房炎感染情况。在此基础上，综合考虑临床症状严重程度、泌乳阶段、繁殖情况以及其他影响奶牛生产性能和寿命的各种因素，决定是否采取治疗措施和选择最佳治疗方案。由于仅根据治疗记录往往会低估临床乳房炎的发病率，所以在统计分析发病率时，不能用乳房炎临床治疗记录代替发病记录。一般而言，普通牛场每月每100头牛中新发生临床乳房炎的奶牛可以达到4头或5头，而对于乳房炎控制良好的牛场，每月每100头奶牛中新发生临床乳房炎的病例应不超过2例。

1.3 大罐奶的细菌培养 通过对大罐奶进行细菌培养，可以得到重要的数据信息。例如，根据细菌计数结果可以建立监控标准，根据培养鉴定结果可以分析病原菌的来源。通常情况下，奶样中的无乳链球菌几乎均来源于已被感染的奶牛，而其他细菌则主要来源于畜舍环境，由于挤奶前乳头清洁消毒不充分或者挤奶器清洁卫生不好等原因而污染牛奶[7]。因此，对大罐奶进行细菌培养的主要意义是鉴定污染牛奶的主要细菌，为采取措施清除污染源提供指导。

有些奶站和奶牛场会定期从大罐奶中采样并进行细菌培养和体细胞计数，用于监测牛群乳房炎的状况。在无感染史的牛场，通过这两种方法可以早期检测出新发的无乳链球菌、金黄色葡萄球菌或支原体感染。如果大罐奶中存在这些病原，则可以确定有牛只发生了乳房感染。但由于是混合后的奶样，因此无法确定是哪头牛感染和感染牛的数量。每月进行细菌培养记录，也可以有效监测其他病原感染，或挤奶过程中的问题和饲料卫生问题等。为了确保牛奶的质量，应尽力降低奶中细菌数量，将菌数控制在5 000万/mL以下[8]。

2 个体水平的检测

2.1 检查乳区外观 最好是在挤奶后立即对乳区进行外观健康状况检查，对于出现肿胀和发热等急性乳房炎症状的乳区、有瘢痕组织(永久性损伤)的畸形乳区、或者萎缩的乳区，要进行乳腺检查[9]。

2.2 检查奶样外观 在挤奶前准备阶段对前3把奶进行检查，可以早期检测出异常奶和发病牛只[10]。对于固定在牛颈枷或栓系式牛栏内的奶牛，可以将挤出的奶滴到黑色背景板上，如出现变色、絮片、凝乳块或水样乳，则判定为异常奶[11]。对于在挤奶台上的奶牛，可以直接观察流出的或落在地面上的前3把奶，以避免将感染的牛奶溅到乳头和乳区上。

2.3 CMT检测 通过加利福尼亚乳房炎检测法(California Mastitis Test，CMT)和威斯康星乳房炎检测法，可以估算出单头奶牛的体细胞数[12]。CMT检测反应结果阳性，表示有乳房炎发生。由于正常乳区在挤奶过程中也会出现持续数小时的体细胞数升高，所以在挤奶后采样进行CMT，通常会出现假阳性反应。为了确保结果的一致性和可靠性，应在挤奶前完成乳头清洁和弃去前3把奶后，采集奶样进行检测。

2.4 体细胞计数 自动化电子细胞计数仪和计算机记录系统可以定期报告每头泌乳牛的体细胞数(每头牛各乳区所产牛奶混合后的结果)，从而对乳房炎的控制过程进行监测，及时发现控制措施的不足。通过数据处理中心，可以查看体细胞数升高的奶牛的全部信息，经前后对比分析可以估计新发的亚临床感染或慢性感染的奶牛数，也可以根据每头奶牛的体细胞数估算出大罐奶体细胞数和泌乳期平均体细胞数。单头奶牛对大罐奶体细胞数的影响取决于泌乳牛群的规模，在小规模牛群的大罐奶中，单头奶牛可能会提供10%以上的体细胞，淘汰几头体细胞数高的奶牛有时可以将大罐奶体细胞数降低30%～40%。虽然采用这种办法可以在短期内改善牛奶质量，但却不能代替系统的乳房炎控制计划。在有些情况下，例如在感染已经治愈但尚未痊愈时，体细胞数仍然会很高。此时，应仔细鉴别，才能做出准确诊断。

2.5 细菌培养 鉴定牛群存在的乳房炎致病微生物，有助于找到传染源和制订相应的解决方案，这对于充分了解牛群存在的问题、制订用药方案以及对个别奶牛的治疗都至关重要。虽然与检测每个乳区相比，检测每头牛各乳区的混合奶样的成本较低，但后者无法确定是哪个乳区发生感染，而且在感染细菌数量很少时或确定奶样污染率时会出现较大误差。因此，检测每个乳区的奶样应是首选。在大罐奶体细胞数较高的牛群，亚临床乳房炎感染率通常也很高，此时选择CMT计分或体细胞数高的奶牛进行微生物培养，是最可靠的诊断方法[13]。对于大罐奶体细胞数低但临床乳房炎发病率高的牛群，在治疗前采集所有临床乳房炎患病牛的奶样进行微生物培养，比选择体细胞数高的奶牛进行微生物培养更有实际意义。

临床病例的微生物培养结果为兽医和乳品生产者提供了所有临床病例及其病因的数据记录，有助于了解牛群的临床乳房炎问题，有助于早期诊断出牛群中的新感染或严重感染的病例，以便迅速启动控制方案。从临床病例或体细胞数偏高的乳区中采集的奶样中，大约30%会检测不到微生物。在慢性大肠杆菌等细菌感染的奶样中，由于细菌数很少，使用常规的培养方法通常无法检测出来，必须采用特殊的培养方法和/或重复培养。如果常规培养结果始终是阴性，则很有可能是在普通培养基上不能生长的特殊微生物(如支原体等)。一般来说，冷藏24小时或冷冻保存1个月内的奶样，均可用于细菌培养。为了准确鉴别出需要治疗的奶牛(例如无乳链球菌感染牛)、需要隔离的奶牛(金黄色葡萄球菌、诺卡氏菌或支原体感染牛)或需要淘汰的奶牛，有时需要对每头奶牛都采集奶样进行微生物培养。

在干乳前和产犊后，选择有代表性的奶牛进行奶样的微生物培养，可用于监测干乳期治疗方案的效果。从培养物中分离出来的细菌也可以用于药敏试验，以指导用药。

2.6 其他检测方法 近年来，还出现了一些其他的乳房炎筛查方法和仪器。例如：测量牛奶电导率的自动化挤奶设备或手持仪器、监测牛奶中离子浓度(例如钠、氯和钾)的仪器、测量N-乙酰-β-D-氨基葡糖苷酶或氯离子浓度的一些化学检测方法等。但是，这些方法目前主要用于科研，在奶牛场尚没有推广应用[14-15]。