天王补心丸质量标准研究进展

曹亮亮

（南京市中医院，江苏 南京 210022）

天王补心丸由地黄、炒酸枣仁、麦冬、五味子、玄参、丹参、远志等十多味药材组方而成，可滋阴养血、补心安神，主用于心阴不足、心悸健忘、失眠多梦、大便干燥等。该方剂最早可追溯自宋代陈自明《妇人大全良方》卷六，后经明代薛已校注。明代洪九《摄生总要》中亦有记载“治心血不足，神志不宁，津液枯竭，健忘怔忡，大便不利，口舌生疮等证。”现代医学报道表明［1-3］，天王补心丸临床可治疗失眠、焦虑、抑郁、神经衰弱、甲状腺功能亢进引起的眩晕等。2015 年版《中国药典》一部成药制剂中对其进行了收载，近年来亦有文献采用高效液相联合蒸发光散射检测器、原子荧光光谱、电感耦合等离子体质谱、数字化指纹图谱、毛细管电泳指纹图谱等技术，对该方中药味的成分进行了定性、定量检测。本文查阅药典及近年相关文献，对天王补心丸鉴别、检查、含有量测定、指纹图谱方面的研究进展进行整理和综述，以期为提高和完善天王补心丸的质量标准提供一定的参考和依据。

1 鉴别

2015 年版《中国药典》一部［4］中，天王补心丸项下以原儿茶酸、石菖蒲和甘草的对照药材为对照，对处方中的五味子、石菖蒲和甘草3 味药进行薄层鉴别，并收载了方中11 个药味的显微特征；天王补心丸（浓缩丸）项下以当归、桔梗的对照药材为对照，对方中此2 味药进行薄层鉴别，并收载了茯苓、党参、麦冬、朱砂的显微特征。

王慧［5］分别以棘苷、酸枣仁及远志为对照，点样于硅胶GF254薄层板，以乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸（4∶1∶1∶0.5）为展开剂，分别喷以1% 三氧化铝-乙醇溶液、5% 茴香醛-硫酸溶液，105 ℃加热显色，建立了天王补心丸中酸枣仁、远志的定性鉴别方法；以麦冬、地黄、丹参为对照，GF254薄层板，甲苯-乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，可见光检视用以鉴别地黄、丹参，喷以10% 硫酸-乙醇溶液，105 ℃加热显色，以鉴别麦冬［5］；以天冬、党参为对照，GF254薄层板，乙酸乙酯-甲醇-水（4∶1∶1）为展开剂，10%硫酸-乙醇溶液为显色剂，105 ℃加热显色，以鉴别天冬、党参［5］；以茯苓为对照，GF254薄层板，乙酸乙酯-甲醇-水（20∶1∶0.5）为展开剂，喷以10% 硫酸-乙醇溶液，105 ℃加热显色，以鉴别茯苓［5］；以柏子仁为对照，GF254薄层板，正己烷-乙酸乙酯（5∶1）展开，365 nm 紫外下检视，以鉴别柏子仁［5］。李冰等［6］采用硅胶G 板，以麦冬对照药材为对照，三氯甲烷-丙酮（4∶1）为展开剂，10%硫酸-乙醇显色剂105 ℃加热显色，建立了麦冬的定性鉴别方法。

2 检查

2015 年版《中国药典》一部中天王补心丸检查项注明：应符合丸剂项下有关的各项规定（通则0108），均为剂型常规检查，无限量检查项目。郑新元等［7］模拟人体胃肠道环境，用人工胃液提取天王补心丸中可溶性铅、砷、汞，采用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）对其进行测定分析，建立了可溶性铅、砷等有害元素的测定评价方法。

3 含有量测定

2015 年版《中国药典》一部中天王补心丸含有量测定项下规定，本品含五味子以五味子醇甲（C24H32O7）计，水蜜丸每1 g 不得少于0.19 mg，小蜜丸每l g 不得少于0.13 mg，大蜜丸每丸不得少于1.22 mg；天王补心丸（浓缩丸）项下规定，本品每l g 含丹参以丹酚酸B（C36H30O16）计，不得少于1.0 mg。

3.1 酸枣仁 天王补心丸方中酸枣仁具养心安神之功效，其中的酸枣仁皂苷A、棘苷成分的镇静、催眠作用已有诸多报道。何新荣等［8］采用高效液相色谱法联合蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）对天王补心丸中酸枣仁皂苷A 含有量进行测定，测得3 批天王补心丸中酸枣仁皂苷A 含有量分别为0.274 2、0.271 8、0.275 0 mg／g，酸枣仁皂苷A 的线性范围为22.5～360 μg／mL（R2=0.999 6），平均回收率99.24%（RSD=1.37%），与此同时还对样品中酸枣仁皂苷B 进行了检测，但可能由于其含有量较低［9-10］且蒸发光散射检测灵敏度限制而未能测出。谢媛媛等［11］建立了高效液相技术测定天王补心丸中棘苷含有量的方法，测得自制模型制剂及4 个批号市售样品中棘苷的含有量分别为0.115、0.052、0.051、0.049、0.038 mg／g，棘 苷 线 性 范 围 为0.002 5～0.075 0 g／L（r=1.000 0），平均回收率100.5%（RSD=1.6%）。

3.2 丹参 杨芳等［12］运用反相高效液相色谱法测定了3个批次样品中丹参素的含有量，分别为0.031 4、0.040 9、0.047 7 mg／g，在0.15～1.5 μg 范围内呈良好的线性关系（r=0.999 6），平均回收率99.1%（RSD=1.8%）。孙雪［13］建立了测定天王补心丸中丹参素钠含有量的高效液相方法，丹参素钠在12.8～128.0 μg／mL 范围内呈良好的线性关系（r=0.999 1），平均回收率94.6%（RSD=1.9%）。张化然［14］测定了7 批样品中丹酚酸B 的含有量，其范围为3.24～3.38 mg／8 丸。孙裕等［15］测定了10 批天王补心丸（浓缩丸）中丹酚酸B 含有量，其范围为0.421 8～2.042 0 mg／g。张玲等［16］运用薄层扫描技术测定了天王补心丸中原儿茶醛的含有量，方法简便快速，灵敏度高，重复性好。

3.3 五味子 秦明秀等［17］测定了3 个批次天王补心丸中五味子甲素的含有量，分别为0.11、0.09、0.08 mg／g，在0.101 3～1.013 0 μg 范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9），平均回收率101.2%（RSD=1.5%）。孙小玲等［18］建立了快速高分辨液相色谱（RRLC）同时测定天王补心丸中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素6 种主要木脂素成分的方法，在测定范围内均呈良好的线性关系（r＞0.999 0），平均回收率分别为 100.1%、99.3%、97.8%、99.1%、98.8%、97.5%，RSD 分别为1.1%、1.8%、2.3%、2.5%、1.6%、2.1%，该方法能获得比普通色谱柱更高的柱效，缩短分析时间，且比超高效液相操作简单、易行。熊建国等［19］测定了4 批天王补心丸中五味子醇甲的含有量，分别为0.377 8、0.380 7、0.380 4、0.377 0 mg／g。

3.4 地黄 杨仕林等［20］采用反相高效液相色谱技术建立了天王补心丸中梓醇含有量的测定方法，在2.004～20.046 μg／mL范围内呈良好的线性关系（r=0.999 3），平均加样回收率99.9%（RSD=2.2%，n=9），3 批样品中每丸平均含有量分别为1.1、0.98、0.98 mg。

3.5 远志 董晓兵等［21］建立了高效液相技术测定天王补心丸中细叶远志皂苷含有量的方法，其线性范围为10～500 μg／mL，平均回收率97.5%（RSD 均小于3.0%），最低检出质量浓度为5.50 μg／mL，灵敏度较高。同时也运用蒸发光散射检测器进行了考察，结果发现该方法灵敏度低，不如紫外检测器。

3.6 当归 刘旺培等［22］建立了高效液相法测定天王补心丸中阿魏酸含有量的方法，在0.091 2～2.280 0 μg／mL 范围内呈良好的线性关系（r=0.999 8），精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜3.0%，平均加样回收率98.96%，RSD 0.26%，可作为天王补心丸中阿魏酸的质量控制方法。

3.7 其他 朱砂是天王补心丸重要药味，对心悸易惊、失眠多梦、小儿惊风等证疗效甚好，但其主要成分为硫化汞（HgS），若剂量超标会对神经、肾脏及生殖系统产生不良反应。罗沉等［23］建立氢化发生-原子荧光光谱技术测定天王补心丹中汞含有量，检出限为0.038 7 μg／L（RSD 均小于1.5%），加样回收率106.0%～113.7%，方法简便快捷，重复性好。郑兴［24］利用电感耦合等离子体质谱法测定了3个不同厂家天王补心丸中22 种微量元素的含有量，发现不同厂家样品中元素种类总体相似，可为探讨其与药效的相关性提供依据。

4 指纹图谱

中药数字化指纹图谱是借助合理的数学建模规范处理中药色谱指纹图谱，将中药中许多复杂的化学和生物活性特征的综合信息转变为量化的数字，建立一系列参数和相应的一整套比较规则和计算公式，从而进行中药的质控、质检的一种技术［25-27］。王荧荧等［28］以12 批市售天王补心丸制剂为研究对象，采用高效液相数字化指纹图谱技术对其进行分析，图谱数据导入“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0”软件进行评价，并采用系统指纹定量法鉴定12 批样品的化学成分数量、分布比例和化学成分整体含有量差异，结果发现，用宏定性相似度Sm 和宏定量相似度Pm 评价出12 批市售制剂的药效物质工艺收率总体偏低，可为其处方改进提供参考。

王荧荧等［29-30］率先采用正方形优化法选择背景电解质，利用色谱指纹图谱指数（F）优化试验条件，对12 批天王补心丸进行聚类分析，确定用其中11 批生成对照毛细管电泳指纹图谱，以此图谱为标准，采用系统指纹定量法评价样品质量；以阿魏酸为参照峰，确定了14 个共有峰，建立了天王补心丸毛细管电泳指纹图谱，可为其质量控制提供了新思路。

刘萍等［31］运用二极管阵列检测器（PDA）与蒸发光散射检测器（ELSD）串联-高效液相技术建立天王补心丸的指纹图谱，将全方组与缺桔梗组、桔梗组与单独桔梗组、单独酸枣仁组指纹图谱进行比较，同时比较各组样品提取率，发现全方组提取率明显高于缺桔梗组，桔梗+酸枣仁组提取率明显高于桔梗组、酸枣仁组；HPLC-PDA、HPLCELSD 指纹图谱中各组分分离度较好，具有理想的相关性和互补性。以上从化学成分角度阐述了桔梗在方中的舟揖作用，证实了天王补心丸中配伍桔梗能增加其他药味活性成分的溶出，起到了助溶作用。

5 总结与展望

近年来文献在《中国药典》质量标准的基础上，对天王补心丸从薄层鉴别、检查、含有量测定等角度都有一定程度上更加全面的补充研究与探索。鉴别方面增加了方中其他药味（如酸枣仁、地黄、麦冬等），检查方面关注了重金属、砷盐等，含有量测定方面针对药典之外的功效明确成分（如酸枣仁皂苷A、棘苷、梓醇、6 种木脂素等）建立了简便快捷、重复性好的测定方法。同时，运用数字化指纹图谱、毛细管电泳指纹图谱等技术建立了天王补心丸较为全面的质量控制和评价方法。

然而，目前关于天王补心丸药效物质基础的研究较为缺乏，对其化学成分和药理作用的探索仍处于起步阶段，导致其质量标准的制订缺乏更坚实的理论基础与临床依据。当前随着代谢组学、基因组学、肠道菌群等新技术的发展，可有助于探索天王补心丸药效代谢途径，为深入的功效物质基础研究提供思路，便于更好地完善其质量控制方法，从而为临床安全有效的应用提供科学依据。