尿碘检测环节的探讨

耿振 王丹 姜延国

（辽宁省丹东市卫生健康服务中心 辽宁丹东 118000）

1 前言

尿碘水平作为监测及评价人群或个体碘营养状况的重要指标之一[1]，因其实用性强和灵敏性高等特点，受到碘缺乏病防治工作者的广泛认同。 因此，尿碘的准确检测，对及时跟踪了解人群中碘营养状况的动态分布具有极其重要的指导意义。

目前，国家碘缺乏病实验室利用实验室间比对质控考核的方式，控制全国各级碘缺乏病实验室尿碘的检测质量，确保检测数据准确性达到要求。现将近年来检测工作中积累的经验和教训总结如下。

2 尿碘检测技术探讨

2.1 人员操作要求

碘酸钾标准储备液、标准使用系列溶液的配制；准确吸取样品及试剂的手法。其中，标准系列溶液的配制及其稳定性，是影响实验结果准确性的关键。

2.1.1 操作者需要熟练操作十万分之一电子天平

为了更经济，实验室采用自配的碘酸钾标准贮备液，需要使用十万分之一电子天平准确称量0.168 6 g经105～110℃烘干至恒重的碘酸钾。建议操作者除戴手套与口罩外，轻轻拍打手腕，多次反复清洗称量烧杯及玻璃棒，洗液共同移入容量瓶中，用去离子水定容至刻度。

2.1.2 操作者需要快速添加试剂， 并保持手法的一致性

在加入1.00 mL 过硫酸铵、2.50 mL 亚砷酸和0.30 mL硫酸铈铵的过程中，建议操作者使用0.10～1.00 mL 移液器、1.00～5.00 mL 移液器， 且应保持添加试剂手法的一致性。 操作者在每15 s 或者30 s 添加硫酸铈铵的过程中， 要准确快速地吸取足量硫酸铈铵，切莫在枪头尖端留有空气。

2.1.3 尿样或质控样的取样技术探讨

尿样或质控样比较黏稠，利用50～250 μL 移液器吸取250 μL 样品时，总会有残留液挂在枪头内壁。建议操作者：（1）充分混匀质控样或尿样。 盖紧瓶盖或采尿管盖，手持塑料瓶或采尿管，在水平桌面上划圈混匀约15 s，静置片刻取样。（2）移液器的枪头尖端应伸入尿液液面以下，缓慢吸取尿样。（3）快速将移液器压到第一档位，停留10 s 左右，待黏稠的残留尿液流至移液器枪头尖端时，快速压动移液器至第二档位。

2.2 仪器稳定性要求

在整个检测过程中，使用的仪器有电子天平、紫外可见分光光度计、超级恒温水浴锅、消解仪和漩涡振荡器等。其中，控温仪器的稳定性对实验结果的影响位列第二[2]。

2.2.1 电子天平的稳定性影响

在称量0.168 6 g 碘酸钾基准试药时，用到十万分之一电子天平，必须保证电子天平的稳定性和准确性。 因此，电子天平应经检定合格后使用，且每次开机需要预热30 min。

2.2.2 紫外可见分光光度计的稳定性影响

仪器应经420 nm 波长校准后，开启预热1 h 以上使用最好，可以保证读数的稳定性；使用的10 mm石英比色皿，吸光度差值最好在0.001 以内。

2.2.3 超级恒温水浴锅温控稳定性影响

恒温水浴箱水温的波动，会影响最终结果。推荐使用超级恒温水浴箱，温度设定为（30±0.1）℃。

2.2.4 消解仪温控稳定性影响

样品消解是否彻底直接影响测定结果。 普通消解仪采用底部加热，仪器上方温度逸散程度不同，导致不同孔位间存在温度差异。若无更好的消解设备，可预先将室内环境温度调节好，同时用温度计测定好每一个孔位的温度，实验中选取温控稳定的孔位进行消解。

2.3 耗材及试剂要求

2.3.1 实验用消解管的要求

消解管的高度、直径和玻璃厚度都应统一。消解管的最低高度应该高于10 cm，避免在高温消解的情况下，过硫酸铵分解产生气体喷出消解管[3]。

2.3.2 亚砷酸配制过程中值得注意的问题

（1）本实验需要使用剧毒的三氧化二砷配制亚砷酸溶液用于砷铈反应，实验人员在操作过程中必须做好相应的防护工作，健全使用剧毒品的安全意识，戴好防护口罩、手套，有条件的实验室可以选择一次性防护服；

（2）一次性配制相对适量的亚砷酸溶液于棕色试剂瓶，保存于专用的4℃冰箱中，双人双锁锁好备用；

（3）砷是危害较大的环境毒物，检测尿碘后含砷废液的排放存在潜在的环境污染问题，需特别注意。

2.4 检测方法要求

尿碘检测采用WS/T 107.1—2016《尿中碘的测定第1 部分：砷铈催化分光光度法》[4]方法，相比2006 版的方法修改了配制亚砷酸溶液中砷的用量，每1000mL亚砷酸使用三氧化二砷从10.0 g 改为了2.5 g，同时增加了测定尿碘浓度300～1 200 μg/L 的方法步骤。

该方法抗尿组分干扰特异性好、灵敏度高、线形范围和准确度好，是检测尿碘的优良方法。 但是，该方法与仪器分析方法相比，仍有以下不足之处：人员精力消耗较大、检测时间较长、结果稳定性较低、结果重现性较差等。

2.5 环境条件要求

严格控制比色时间、环境或仪器温度和环境干扰物，是本实验的又一关键点。 其中，环境温度和检测环境中干扰物，都是影响实验成败的外在条件。

2.5.1 环境温度对实验的影响

尿碘检测工作量多，持续时间长，环境温度对标准试剂和样品都有影响。建议尿碘实验室配有空调，以保证环境温度的稳定。

2.5.2 环境中干扰物对实验的影响

尿碘实验室应远离盐碘实验室， 一些含碘较高的碘盐、含碘试药试剂等，都不应存放在实验室内；并且，在尿碘实验室初次投入使用前，应使用5%的硫代硫酸钠溶液擦拭实验台、椅子及仪器表面等，消除氧化物质干扰。 当实验结果出现不成线性或者普遍偏高时，也应进行该处理。

2.6 结果的测算

尿碘的检测结果是吸光度的对数与浓度成负相关的关系。 因此，相关系数应为负数，且绝对值应大于0.999。

尿样成份相对复杂，测定结果稳定，重现性较差，检测人员需在接收样品后短时间内完成测定。

3 结语

上述实验介绍分析了尿碘检测环节的一些过程及注意事项，希望能为从事该项工作的检测人员提供参考依据。