家兔李斯特菌病的流行特征和防治

吴炎信

（安徽省肥东县动物疫病预防控制中心 231600）

李斯特菌（李氏杆菌）病是畜禽、啮齿动物和人的一种散发性传染病。李斯特菌在自然界中无处不在，适应环境能力强，非常容易造成食品污染，从而引起食物中毒和李氏杆菌病的爆发。家畜和人主要表现为脑膜脑炎、败血症、怀孕母畜流产、单核细胞增多；啮齿动物和家禽表现坏死性肝炎、心肌炎和单核细胞增多症等症状。李斯特菌为侵袭性胞内菌，可穿越宿主的3道屏障，可在巨噬细胞和非巨噬细胞(如上皮细胞等)中存活并增殖[1]。20世纪80年代以来，人类因食用被污染的动物性食品屡现李斯特菌病发生，且感染者死亡率较高，这才被认识到它还是一种食物源性传染病，受到人们广泛关注[2]。

1 病原

单核细胞增多性李斯特菌（Listeriamonocytogenes，简称李斯特菌）为一种细长的小杆菌，短的呈球杆状，一般大小约1.0～3.0μm×0.5μm。无芽胞、在血清葡萄糖蛋白胨中能形成黏多糖荚膜。在20～25℃有运动性，37℃下无运动性[3]。细菌排列多呈单个散在，有时成对排成“V”形。有时呈短链(液体培养物)或丝状(固体培养物)。新鲜培养菌呈革兰氏阳性，陈旧培养物有时变为革兰氏阴性，两端染色较深。需氧或兼性厌氧，在鲜血琼脂上形成狭窄的β溶血环，0.1%亚碲酸钾琼脂37℃培养24h呈圆形、隆起、湿润、直径0.6μm黑色菌落，明胶中的穿刺培养形成像一颗倒栽的杉树生长。胰蛋白胨琼脂是培养和保存该菌的最佳培养基。环境中铁离子水平对李斯特菌和李斯特菌病发展产生重要影响，在试管中铁离子能促进李斯特菌生长并使其毒力增强。用凝集素吸收试验，将本菌抗原划分为15种O抗原和4种H抗原，共有7个血清型、16个血清变种[4]。李斯特菌在自然界分布很广，在青贮饲料、干草、干燥土壤和粪便中能存活2年以上。在饲料中存活6～26周。对温度和一般消毒药抵抗力不强，85℃经40s，55℃经30min可以致死，3%石炭酸溶液、70%酒精溶液、5%～10%漂白粉溶液及其他常用消毒药的一般浓度均能很快杀死。李斯特菌对抗生素敏感。对氨苄青霉素、红霉素、新霉素、竹桃霉素敏感，对金霉素、土霉素、庆大霉素、卡那霉素、青霉素G、链霉素敏感性较差，对粘菌素、多黏菌素B、萘啶酮酸有耐药性。该菌在4℃的环境下仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一[5]。

2 流行病学

至少有42种野生及家畜哺乳动物和17中鸟类包括家禽带菌。本病为散发性，有时呈地方流行性。富于腐殖质的地区，而白垩土或沙土地区甚少。病畜和带菌者是本病的传染源。从患病动物的粪、尿、乳汁、精液及分泌物中都曾分离到本菌。啮齿动物持别是鼠类、野兽、野禽常成为本菌在自然界中的贮存所。本病的传染途径可能是通过消化道、呼吸道、眼结膜、损伤的皮肤及交配传染。饲料和饮水是主要的传播媒介，吸血昆虫的媒介也有可能。应激(如营养不良、怀孕、天气剧变等)在促进发病上具有重要作用。易感动物有绵羊、山羊、牛、猪、马、犬、猫、兔、脉鼠、毛丝鼠、鸡、火鸡、鹅等。

3 临床症状

人工感染潜伏期为1～5d，主要危害幼兔和孕兔。可分成3种类型。

3.1 急性(败血性)型

最常见于幼兔。主要表现为中枢神经症状，突然发病，侧卧，口吐白沫，背颈、四肢抽搐，低声嘶叫。一般是精神沉郁，衰弱，食欲废绝。体温40℃以上。常发现结膜炎和从鼻腔流出浆液性与粘液性分泌物。经过几小时或2～3d后死亡。

3.2 亚急性型

子宫炎：传播迅速。母兔分娩前2～3d或若干天出现精神不振，拒绝采食，很快消瘦，从阴道内流出暗红色或棕褐色液体。分娩前1～2d病兔流产或死亡，也有的在流产时或产后几天死亡，耐过的母兔将不孕。

脑膜脑炎：精神委顿、不食、全身震颤，作转圈运动，共济失调。头呈弯曲状态，失去采食和行动能力，试图行动时会接连翻滚，逐渐消瘦而死。

3.3 慢性型

幼兔精神沉郁，眼半闭，独居角落。体温升高42.5～43℃，食欲废绝，结膜炎伴有脓性眼屎，口流白沫，鼻孔流黏性分泌物。

子宫炎：通常只有个别兔患子宫炎，母兔分娩前数日食欲减退，精神不振，到预产期仍不分娩，多数病兔经2～8d就死亡，幸存的母兔以后将造成不孕。

脑膜脑炎：经过如同亚急性型一样，但病程能迁延达6～8个月之久，并长期带菌。

4 病理变化

李斯特菌是一种细胞内寄生菌，能在吞噬细胞中生长，对本菌免疫主要通过淋巴因子激活T细胞介导的单核吞噬细胞。由于李斯特菌主要以细胞免疫为主，所以至今尚无有效疫苗用于畜禽生产上的预防。李斯特菌能产生李斯特菌毒素，此毒素可溶解多数哺乳动物的红细胞；该菌进入血液可形成菌血症，一是引起血液中的单核细胞增多，二是可使肝、脾等实质器官发生小坏死灶。该病菌能通过污染饲料经口腔黏膜的损伤侵入机体，进入该部位的感觉神经和运动神经的神经鞘，并在神经鞘内繁殖，随后到达三叉神经进入延脑，并在此大量繁殖，从而引起脑膜脑炎和临床神经症状。在超急性败血症病例，很少发现眼观病变，但可见内脏器官充血和一些分散的出血。急性病例可见颈部和肠系膜淋巴结增大和水肿及胸腔、心包和腹腔积聚清朗的液体，还有皮下与肺水肿。肝脏有散在性或弥漫性、针尖大的淡黄色或灰白色坏死点。心肌、肾、脾也有相似病变。肺梗塞与肾上腺坏死。在怀孕母兔，可见腔内积蓄化脓性渗出物的子宫炎，在子宫腔内也可见未被吸收的变性胎儿。子宫壁上有坏死区域，并往往因炎症过程而变厚。

肝内的灶状坏死为本病最常所见的镜检特征。在脾间或有相同的病变。在子宫壁上可见具有坏死的化脓性炎症。有的具有中枢神经系统体征的病兔虽肉眼看不出病变，但可见脑膜脑炎，由大量粒细胞和单核细胞构成血管套袖，合并灶状坏死。这些变化在脑干、小脑基部和前部颈髓最为突出。

5 诊断

目前，国内对该病的诊断与检测尚处在传统的分离鉴定上，包括样品中病原的分离、生化反应及动物实验，检出率低，耗时长，单纯根据临床症状和病变不易做出诊断[6]。临床上家兔出现特殊神经症状、流产、血液中单核细胞增多时，可作为诊断参考。为了确诊必须进行微生物学检查，死前可从血液、脑脊液和阴道渗出物采样，死后从血液、内脏器官和脑采样。凝集反应、补体结合反应、荧光抗体法等可用于诊断。

最简易的方法是将病理材料的乳剂（1：5）或血清肉汤培养物滴于家兔或豚鼠的结膜囊内，1d后发生化脓性结膜炎，不久因败血症死亡；对妊娠2周的动物滴眼后常引起流产。但采取病料，分离并鉴定李斯特菌才能得出决定性诊断。

6 防治

由于李斯特菌引起的感染病死率高，危害大，并已成为全球性疾病，引起了国际上的高度重视。WHO将其列为20世纪90年代四大食源性致病菌之一，并在2000年建立了全球监测网，在世界范围内开展与食源性致病菌相关疾病的监测[7]。我国也在2000年建立了全国食品污染物监测网和食源性疾病监测网。李斯特菌能导致人和动物严重的致死性疾病，而且难以治愈，因而受到医学微生物学家的高度重视。由于李斯特菌的血清型变种较多，而且属细胞内细菌，主要的免疫应答是细胞免疫，所以至今尚未有效的疫苗应用于临床。鼠类常为李斯特菌在自然界的贮存库，由于老鼠经常出没于兔舍周围，随排泄物、分泌物等排出李斯特菌污染了饲料、用具和饮水等使家兔感染发病。因此，定期进行灭鼠和驱除鼠类及其他啮齿动物显得尤为重要。当发现疾病时，应对全群进行检疫，采取扑杀病兔、隔离(期限为14d)、消毒等措施。病兔的肉尸和皮毛需经无害处理后才能利用。从事与病兔有关工作(如看护病兔、屠宰病兔、加工皮毛等)的人员应加强个人防护。成年兔和幼兔分别按每千克体重0.25g和0.15g剂量的复方磺胺治疗，2次/d，连续5d，治愈率达82%。可选用多西环素或土霉素，按每千克体重30mg，内服，每日2次，连续3～5d。氨苄青霉素每千克体重25mg，皮下注射，每天2次。成年兔按每千克体重10mg，幼兔每千克体重5mg肌肉注射庆大霉素，每日1次。也可以青霉素与链霉素联合给药。恩诺沙星内服，每日1次，连用7d，疗效良好。硫酸新霉素拌料，每只兔2～4万单位，每天3次，连续3～5d[8]。中药用忍冬藤3g、栀子3g、野菊花3g、茵陈3g、钩藤3g、车前草3g，水煎，早晚2次灌服，连续3～5d。