牦牛和藏羊免疫特性的研究

吴艳清

（青海省同仁县畜牧兽医工作站，青海 同仁 811399）

1 材料和方法

1.1 材料

牦牛和藏羊研究：所使用的牦牛和藏羊各100头，其中牦牛的年龄在5～10岁之间，藏羊的年龄在3～5年之间。所有牦牛和藏羊均来自青海。实验所选用的牛羊不需要雌雄限制，通过临床观测其身体健康状况，从静脉采集血液、肝素抗凝。

试剂：研究采用补体致敏酵母菌以及酵母菌多糖等试剂。

1.2 研究方法

1.2.1 红细胞C3b受体、红细胞免疫复合物(IC)的测定 本次研究采用的红细胞不需要使用Ficoll分离液进行分离，可以直接使用生理盐水对其进行离心洗涤，丢弃血液中的大部分红细胞。血液剩余的成分按照1.25×107个/毫升进行配置，其中添加酵母菌的量与红细胞的比例为10∶1。

1.2.2 B淋巴细胞C3b受体的测定 将淋巴细胞悬浊液键入到一支小试管中，然后添加补体致敏酵母菌悬液，两者的量均为0.075毫升。将试管置于37℃的恒温水浴中进行孵育，时间为30分钟，然后向其中加入0.25%戊二醛生理盐水2滴，进行涂片，镜检200个淋巴细胞，对其中联结3个以上酵母菌的淋巴细胞数目进行记录，从而计算花环百分率。

1.2.3 T淋巴细胞E—玫瑰花环的测定

2 结果

根据检测结果显示，100头牦牛的红细胞C3b受体花环率平均数为2.65±1.91，变异系数为72；红细胞IC花环率为4.51±2.75，变异系数为61；B细胞C3b受体花环率为23.24±5.81，变异系数为25；T-细胞E-玫瑰花环率平均数为7.15±3.62，变异系数为42。藏羊的指标检测结果为红细胞C3b受体花环率平均数为2.10±1.09，变异系数为52；红细胞IC花环率为4.51±2.75，变异系数为64；B细胞C3b受体花环率为23.24±5.81，变异系数为21；T-细胞E-玫瑰花环率平均数为7.15±3.62，变异系数为31。

3 结果讨论

近年来随着对动物红细胞的研究发现，动物体内存在红细胞免疫系统，血液中的红细胞能够清除循环免疫复合物，起到促进吞噬的作用，红细胞还具有识别和储存抗原、提呈抗原、增强T细胞功能的作用，参与激活动物体内补体系统。C3b受体是血液红细胞免疫功能的前提基础，其位于红细胞膜表面，对于红细胞C3b受体的研究在人类医学领域中较为常见，针对牦牛和藏羊红细胞是否具有C3b受体及免疫黏附功能的研究报告非常少。通过本文对牦牛和藏羊红细胞的研究结果分析，可以开出牦牛和藏羊体内的红细胞与人体红细胞相同，都具有C3b受体，同时也都拥有黏附免疫复合物的能力。因此说明了牦牛和藏羊的红细胞也包含免疫功能。根据国外的研究结果证明，血液的红细胞能够对T淋巴细胞产生γ下干扰素等淋巴因子，对B淋巴细胞产生Smlg，另外红细胞对于NK、LAK的活性以及在T淋巴细胞免疫黏附时，具有调控肿瘤细胞能力作用。对于牦牛和藏羊红细胞是否对机体免疫调节具有重要作用，还需要进一步研究。

通过对牦牛和藏羊血液红细胞进行研究，发现其红细胞具有与C3b受体补体致敏酵母菌相结合的能力，结合后形成花环。牦牛和藏羊红细胞相对于与人类血液红细胞而言，其形成花环的百分率较低。形成这种问题的主要因素可能为牦牛和藏羊血清中存在抑制因子，抑制因子具有阻碍C3b受体活性的作用，而人类的血清中含有这种物质，所以人类血液红细胞C3b受体不会受到抑制。比如在奶牛血清中，含有免疫胶固素，这种物质具有引发红细胞产生凝集的作用，从而影响C3b受体的活性，阻碍了红细胞C3b受体花环的形成。但是影响牦牛和藏羊红细胞C3b受体花环形成的因素目前还不能确定，是否血清中存在抑制因子或者抑制因子是否为免疫胶固素，还需要进一步验证。另外，从牦牛和藏羊的生长环境来考虑，由于牦牛和藏羊长期生长在高原环境中，具有比较特殊的种群属性，所以牦牛和藏羊红细胞C3b受体数量可能会减少，同时其活性也相对降低，因此而导致了牦牛和藏羊红细胞C3b受体花环百分率较低。

4 研究结论

本文研究了牦牛和藏羊免疫特性，对血液T淋巴细胞E一玫瑰花环进行了测定，根据结果显示，牦牛和藏羊的花环百分率均低于其他平原地区的牛羊品种。造成这种问题的主要原因可能是牦牛和藏羊生活在高原地区，由于气候环境的差异，导致红细胞C3b受体花环的形成率低。血液B淋巴细胞的补体受体具有激发B淋巴细胞合成RNA的作用，同时能够加快B淋巴细胞的代谢作用，增强释放接枝，从而参与产生抗体，形成免疫记忆。对于B淋巴细胞补体受体的检测意义非常重要，因为其直接影响了动物的免疫功能。本文的采用了酵母菌进行研究，对传统的研究方法进行了改进，酵母菌相对于特异性抗体致敏的红细胞补体(EAC)而言，不需要制备抗RBC IgM型抗体的过程，缩短了步骤，同时酵母素的使用也取得了较为理想的研究。因此该方法的研究稳定性较好，同时具有简便、经济的特点。