束花山茶组培快繁技术

沈雪锋 王海强 钱 曦 俞财峰 吴晓华 吴家聪 蔡春芳

（1上海青浦现代农业园区，上海市青浦区 201717；2上海蓝海园艺有限责任公司，上海市青浦区 201717）

束花山茶（Camellia japonicaL.）属山茶科山茶属，是重要的观赏类灌木花卉，广泛应用于园林造景、绿化工程中。最新培育的“玫玉”等系列束花山茶品种因具有开花繁密、花期长、春季色叶期长、耐碱性土等优势，成为了山茶科绿化树种的重要补充。但这些品种采用传统繁育方法（主要有扦插及压条等）的繁殖速度较慢，限制了其有效推广[1-2]。利用植物组织培养技术育苗不仅可实现苗木的快速繁育，而且育出的苗木成苗整齐、商品性高，更可连续生产，不受季节限制。但目前组培快繁的研究对象多集中在茶树和油茶[3]，前人虽对不同茶科植物的组培技术开展了研究，但研究结果各有差异，且尚未对“玫玉”等束花山茶新品种的组培成功案例进行报道[4-8]。鉴于此，笔者以“玫玉”等束花山茶新品种为组培研究对象，开展了束花山茶组培快繁技术的研究，最终形成了一套技术体系。现将研究出的“玫玉”等束花山茶新品种组培快繁技术总结介绍如下，以供参考。

1 无菌系的建立

束花山茶品种选用“玫玉”。选择健壮的母株，截取顶端约10 cm长的顶枝，用自来水冲洗0.5 h后，在超净台上进行灭菌处理，用70%酒精表面处理10 s，用无菌水冲洗2次，然后用0.1%升汞处理8～10 min，最后用无菌水冲洗4次，将枝条剪切成至少带1个腋芽的茎段，接种于诱导培养基上。

2 诱导培养

诱导培养基以MS为基础，添加6-BA 3 mg/L、NAA 0.1 mg/L、琼脂6 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.6～5.8，用高压锅在121 ℃下灭菌21 min，冷凝后待用。将带腋芽的茎段接种于诱导培养基后，移至培养室内进行诱导培养，培养条件为光照2 000 Lux、16 h/d，温度25±1 ℃。据培养30 d后统计，外植体芽诱导率可达62%，芽畸变率为0。

3 继代增殖

将诱导分化产生的健壮小苗进行分割，分割开的小苗接种到增殖培养基（增殖培养基以MS为基础，添加6-BA 2.0 mg/L、NAA 0.1 mg/L、琼脂6 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.6～5.8，高压锅121 ℃下灭菌21 min，冷凝后待用）上，培养条件同诱导培养，增殖培养的继代周期为1个月。据培养30 d后统计，增殖系数可达2.5，同时芽生长势强、颜色发红、木质化程度高等，有利于芽的持续增殖。

4 炼苗与生根

待瓶苗增殖到一定数量后，将瓶苗置于温室中进行遮阳处理并炼苗。1 d后，将经炼苗后的丛生芽分割成独立芽苗，蘸生根液后扦插入草炭与珍珠岩的混合基质中，再用小拱棚覆盖，以保障生根过程中有足够的湿度，同时需不定期补水，且每周喷施杀菌剂进行消毒灭菌[9]，最终束花山茶的生根成活率可达73%。