抗菌肽替代抗生素在断奶仔猪中的应用研究

■宋延飞

（辽东学院农学院，辽宁丹东118003）

现代养猪生产中普遍采用抗生素来防治断奶仔猪由于断奶应激产生的生长抑制和腹泻问题。但长期使用抗生素会产生药残留、耐药性，并且我国农业部已禁止洛美杀星等抗生素使用，删除了硫酸黏杆菌素的促生长用途，起草了《全国遏制动物源细菌耐药行动计划》，这说明在猪饲料中禁用抗生素已是必然趋势，因此寻求新型绿色添加剂替代抗生素已成为研究热点。抗菌肽是一种对外源病菌具有高效杀灭活性的肽类物质[1]，由12～100个氨基酸组成[2]，是由生物体自身产生的一类抵抗外界病原体感染的阳离子多肽，具备抗菌谱广、无污染、无毒副作用，不易产生耐药性，是抗生素的良好替代品[3]，本试验探讨了抗菌肽替代抗生素对断奶仔猪生长性能及血清免疫指标的影响，以期为抗菌肽的进一步使用和推广提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

抗菌肽，由中农颖泰生物技术有限公司提供。

1.2 试验方法

选取28日龄断奶仔猪45头，预饲期5 d，试验期为28 d，其中试验期分为1～14 d、15～28 d两个阶段，采用单因素完全随机化设计，随机分成5组，每组设3个重复，每个重复3头猪，其中Ⅰ组为对照组，全期饲喂基础日粮，Ⅱ组在基础日粮中添加160 mg/kg金霉素，Ⅲ～Ⅴ组分别在基础日粮中添加160、320、480 mg/kg抗菌肽。试验饲粮参照NRC（1998）标准配制，基础日粮组成及营养水平见表1。

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生长性能测定

试验进行过程中每日

观察仔猪精神状况、排粪情况以及持续时间。预饲期的第5 d，试验期的第14 d及第28 d 20∶00点停止喂料，照常供水，于次日早上对猪空腹逐个称重。试验结束后，以重复为单位称剩料量，记录耗料量，计算试验期的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）及腹泻率。

平均日增重(ADG，g)=增重/(试验天数×试验猪头数)

平均日采食量(ADFI，g)=耗料量/(试验天数×试验猪头数)

料重比(F/G)=饲料消耗量/增重

腹泻率（%）=100×试验期腹泻仔猪总头数/（试验仔猪头数×试验期天数）

1.3.2 血清免疫指标测定

试验期的第14 d及第28 d 20∶00点停止喂料，照常供水，于次日早上每个重复随机选取1头空腹仔猪进行前腔静脉采血5 ml，收集于离心管中，不加抗凝剂，室温静置20 min后，3 000 r/min离心20 min，吸出上层血清置于-20℃保存。血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）采用酶联免疫法测定，试剂盒购自南京建成弘大生物科技有限公司。

表1 断奶仔猪基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.4 数据统计分析

试验数据用SPSS 16.0统计软件中的单因素方差分析法进行统计分析，用邓肯法（Duncan's）进行多重比较，结果用“平均数±标准误”表示。

2 结果与分析

2.1 抗菌肽替代抗生素对断奶仔猪生长性能的影响（见表2）

由表2可见，1～14 d，抗菌肽组ADG、ADFI、F/G显著优于对照组（P＜0.05），抗菌肽Ⅴ组比抗生素组ADG提高了 12.24%(P＜0.05)，F/G 降低了 3.25%(P＜0.05)。抗菌肽Ⅳ、Ⅴ组分别比抗生素组ADFI提高了5.88%（P＜0.05）、8.62%（P＜0.05）。腹泻率抗菌肽Ⅳ组和Ⅴ组与抗生素组显著低于对照组（P＜0.05）。

15～28 d，各抗菌肽组ADG、ADFI显著优于对照组和抗生素组(P＜0.05)，抗菌肽Ⅴ组F/G相比对照组降低了 9.71%(P＜0.05)，比抗生素组降低了 8.67%(P＜0.05)。抗菌肽组腹泻率除Ⅲ组外均显著低于对照组和抗生素组(P＜0.05)。抗生素组各项指标均与对照组差异不显著(P＞0.05)。

表2 抗菌肽替代抗生素对断奶仔猪生长性能的影响

1～28 d，各抗菌肽组ADG、ADFI显著优于对照组和抗生素组(P＜0.05)，抗菌肽Ⅳ、Ⅴ组F/G相比对照组分别降低了5.26%、9.36%(P＜0.05)，比抗生素组分别降低了1.82%(P＞0.05)、6.06%(P＜0.05)。抗菌肽Ⅴ组腹泻率显著低于对照组和抗生素组(P＜0.05)。抗生素组ADG显著优于对照组(P＜0.05)，但ADFI、F/G均与对照组差异不显著(P＞0.05)。其中以480 mg/kg抗菌肽组饲喂效果最好，ADG、ADFI、F/G均显著优于其他各组(P＜0.05)。

2.2 抗菌肽替代抗生素对奶仔猪血清免疫指标的影响（见表3）

表3 抗菌肽替代抗生素对断奶仔猪血清免疫指标的影响（mg/ml）

由表3可见，14 d，各抗菌肽组IgA、IgG、IgM均显著优于对照组（P＜0.05），各抗菌肽组IgG显著优于抗生素组（P＜0.05）。抗菌肽Ⅳ、Ⅴ组IgA比抗生素组分别提升了25.74%（P＜0.05）、30.69%（P＜0.05），IgM比抗生素组提升了21.69%（P＜0.05）、29.32%（P＜0.05）。抗生素组IgM显著优于对照组（P＜0.05），但IgA和IgG与对照组差异不显著（P＞0.05）。

28 d，抗生素组与对照组差异不显著（P＞0.05），各抗菌肽组IgA、IgG、IgM均显著优于对照组和抗生素组（P＜0.05），其中以480 mg/kg抗菌肽组饲喂效果最好，IgA、IgG、IgM均显著优于其他各组。

3 讨论

试验结果显示，试验各阶段抗菌肽组ADG随添加量的提高呈线性升高趋势，1～28 d全期各抗菌肽组ADG均显著优于对照组及抗生素组（P＜0.05）。抗菌肽之所以能够促进仔猪生长，原因可能在于抗菌肽可从多方面改善了断奶仔猪的吸收消化机能和肠道内环境。陈晓生等[4]研究显示，在饲料中添加2.3 L/t的抗菌肽制剂，血清胰岛素生长因子IGF-1显著高于对照组（P＜0.05），而 IGF-1可以参与生长激素GH的调节，从而促进机体的生长和器官发育。邓柏林等[5]用消化试验估测粪排放量和氮排放量的方法来计算营养物质消化率，研究显示，抗菌肽组粪便氮的排放量显著低于对照组（P＜0.05），因此可提高育肥猪的营养物质消化率。H.Bao等[6]将猪源抗菌肽添加到肉鸡基础饲粮中，发现抗菌肽能显著提高生长性能，增加肠道对营养物质的吸收，提高肠道免疫力。本试验抗菌肽各阶段对断奶仔猪平均日采食量都有促进作用，显著高于对照组及抗生素组（P＜0.05）。这可能是由于抗菌肽对体内激素水平起到了调节作用。都海明等[7]研究结果显示在饲粮中添加抗菌脂肽可以显著提升断奶仔猪的胰岛素水平。而胰岛素能够加强葡萄糖利用和生脂作用，可促进单胃动物采食量增加[8]。断奶应激往往造成肠道菌群紊乱，大肠肝菌数量增多，这是断奶仔猪腹泻的重要原因。陈晓生等[9]研究表明，抗菌肽对大肠杆菌等肠道有害菌的抑杀能力要显著大于金霉素（P＜0.05），有利于调节体内微生态朝有益方发展。张熠等[10]报道在饲粮中添加外源性抗菌肽能抑制病原菌，而对肠道正常菌群和机体细胞则无杀伤作用。王静[11]在肉鸡饲粮中添加不同水平抗菌肽能够降低21、35日龄肉鸡肠道大肠杆菌数量，300 mg/kg添加水平能提高肉鸡35日龄肠道乳酸杆菌群数量，效果优于抗生素组。本试验1～28 d抗菌肽Ⅴ组腹泻率要显著低于对照组和抗生素组，与上述结果一致。

IgA、IgG、IgM是由骨髓来源的B淋巴细胞所产生的免疫球蛋白，可介导机体的体液免疫，其在血清中含量的高低可反映机体体液免疫强弱[12]。IgA除了具有抗菌、抗病毒、抗毒素作用外，对机体呼吸道、消化道等局部黏膜免疫起着相当重要的作用，IgG有抗菌、抗病毒作用，且能中和毒素使其失去毒性，调理、凝聚和沉淀抗原，IgM是机体初次接触抗原物质最早产生的抗体，也有抗菌、抗病毒和中和毒素的功能，在机体受到病原感染后与补体结合，溶解病原体。研究显示，抗菌肽对肠道健康具有明显促进作用，改善肠道结构，促进营养物质吸收；提高肠道屏障功能、改变肠道微生物菌群结构，从而提高机体免疫力[13]。刘莉如等[14]研究显示，饲粮中添加不同水平抗菌肽可提高蛋用仔鸡血液中IgA、IgG、溶菌酶和C3含量，并且随添加量增加。各血液指标表达水平有上升趋势。吕尊周等[15]在日粮中添加枯草芽孢杆菌抗菌肽可提升蛋鸡血清中IgA、IgG、IgM和C3含量，其中添加量为400 mg/kg可显著提高IgA和IgG含量（P＜0.05）。本试验抗菌肽组IgA、IgG、IgM均显著高于对照组（P＜0.05），后期28 d抗菌肽组相比抗生素组体现显著优势（P＜0.05），说明抗菌肽能够提升断奶仔猪免疫性能。这也是本试验抗菌肽能够提升断奶仔猪生长性能降低腹泻率的原因之一。

本试验后期抗生素组猪出现被毛粗糙，精神不振的现像，并且ADG、ADFI、F/G相比对照组差异不显著，腹泻率有所上升，对IgA、IgG、IgM没有显著促进作用，并且在后期28 d，IgA、IgG、IgM反而要低于对照组，这可能是由于长期使用抗生素对断奶仔猪自身脏腑功能造成了影响，导致生长和免疫性能下降。

4 结论

①在饲粮中添加抗菌肽能够提高断奶仔猪生长性能，降低腹泻率，其中添加480 mg/kg抗菌肽显著优于对照组和抗生素组。

②在饲粮中添加抗菌肽能够提升断奶仔猪IgA、IgG、IgM含量从而提高免疫力，其中添加480 mg/kg抗菌肽显著优于对照组和抗生素组。

③综合本试验结果，抗菌肽可替代抗生素应用于断奶仔猪饲粮中，且添加量为480 mg/kg时效果最好。