头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）对奶牛的安全性研究

冯言言　孟芳　郑莉　林红　李龙飞　田振平　刘义明　孔梅　吴连勇

摘要：新城疫是养禽生产中的常见病、多发病，对鸡群的影响比较大，传统上我们一般通过临床表现和剖检变化对其做出诊断，近年来随着科技的不断发展，实时荧光定量PCR技术也为大家所熟知和掌握，本文就一例采用實时荧光定量PCR技术诊断新城疫的过程进行介绍。

关键词：新城疫；PCR；诊断

头孢洛宁，为半合成的第一代头孢菌素类抗生素，由默沙东公司开发成头孢洛宁乳房注入剂（干乳期），商品名为Cepravin，目前在欧盟及英联邦国家范围内广泛使用，可用于治疗奶牛干乳期乳房炎以及预防乳房内新增感染。头孢洛宁抗菌谱广，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有较强的抗菌活性，并且对产β-内酰胺酶菌有很好的作用，头孢洛宁敏感菌包括金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌、大肠杆菌、化脓隐秘杆菌、枸橼酸杆菌、溃疡棒状杆菌、克雷伯菌、变形杆菌等。目前，国内无头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）对奶牛的靶动物安全性报道，为更好地将头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）推广应用到干乳期乳房炎以及预防乳房内新增感染的临床病症中，特进行了头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）对靶动物奶牛的安全性研究，为临床上合理使用该药物提供依据。

1材料与方法

1.1受试药物

头孢洛宁乳房注入剂（干乳期），规格为3g：250mg，批号为1511001，齐鲁动物保健品有限公司提供，推荐用药方法为干乳期奶牛每头牛每个乳区给药1支。

1.2试验动物

试验选择健康泌乳期奶牛，奶牛在试验前30日内未全身性或乳房内给予抗生素，产奶量在15～35kg/d之间，实验动物为经产和初产健康泌乳期奶牛各6头（1～6号牛为初产，7～12号牛为经产）。

1.3试验方法

12头健康泌乳期奶牛（初产经产各半），四个乳区分别注入头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）一支（250mg），给药1次。

奶牛挤奶后，先用消毒毛巾清洁各乳区，再用消毒药液浸泡乳头约30s，然后进行乳头内灌注给药。灌注时将含药推注管头插入乳头，轻轻推压活塞，将药物缓缓注入乳池内，随后轻轻按摩相应乳区，使药物均匀分布。

1.4试验过程

在给药前1日和0日（给药前）采集奶样各1次；给药后12小时、3日、5日、7日和10日各采奶样1次，采样时四个乳区均需要采样，并弃去前三把奶。

数据收集：记录奶牛标识、观察时间、试验日期和时间、每头奶牛日产奶量及体温等参数。各时间点所采集奶样检测乳中体细胞数（SCC），通过触诊观察奶牛红肿热痛等临床症状。

细菌分离：分别在给药前0日和给药后第10日各采集奶样1次（20mL）进行细菌学检查。采样时先用清水冲洗乳房，用0.1%新洁尔灭或者75%乙醇对乳头及周围进行消毒，待酒精挥发后手工挤奶，弃去前三把奶后，采集奶样于灭菌试管中，贴好标签，低温（4℃）保存并于6h内送实验室分离检测。

用多种选择性培养基培养分离病原菌。将各奶样接种至选择性培养基分离各种病原菌。分离菌株经纯化培养后，依据菌落形态、染色特征、生化特点鉴定其种类。主要分离金黄色葡萄球菌、链球菌（无乳链球菌、乳房链球菌）和大肠杆菌。

2结果

2.1体细胞计数

体细胞计数结果见表1。

由表1数据可知，12头奶牛给药后各时间点奶样与给药前体细胞检测结果相比体细胞数有所降低。

2.2奶牛的产奶量

12头奶牛各时间点的产奶量见表2。

通过表2数据可知，12头奶牛在给予头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）后，与给药前相比各时间点产奶量无明显变化。

2.3细菌分离鉴定

试验奶牛给药后乳中细菌数比给药前减少，在给药前0日采集的奶样中，分离的链球菌、葡萄球菌和大肠杆菌分别为2株、3株和4株，给药后第10日，仅检测到葡萄球菌和链球菌各1株（见表3）。

2.4奶牛的直肠温度

奶牛的直肠温度统计见表4。所有试验奶牛在给药前和给药后不同时间点的直肠温度均在奶牛的正常温度范围内，说明按推荐剂量单次给药对奶牛的体温无显著影响。

2.5临床症状观察

12头奶牛四个乳区分别单剂量给药头孢洛宁乳房注入剂（干乳期），在整个试验期间，给药乳区未出现乳房红、肿、热、痛等临床症状。

3结论

12头奶牛四个乳区分别单次给与头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）（3g：250mg），在给药前1日和0日采集奶样各1次；给药后12小时、3日、5日、7日和10日各采奶样1次，在各时间点给药后奶样中体细胞数与给药前未见明显变化，奶牛的产奶量未见显著变化，奶牛乳区未出现红、肿、热、痛等临床乳房炎症状。在给药前0日和给药后第10日分别采集奶样并分离细菌，结果显示给药后细菌检出数与给药前相比降低。上述结果表明奶牛按推荐剂量单次给予头孢洛宁乳房注入剂（干乳期）对奶牛无任何不良反应，安全性较高。