赤瓟果实提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠MTL、5-HT 的影响

辛 宇，辛 国

（1.长春中医药大学，长春 130117；2.长春中医药大学附属医院，长春 130021）

赤瓟（Thladiantha dubia Bunge，TDB）为葫芦科多年蔓生草本植物[1]，又名气包、赤包、山屎瓜、赤雹、屎包子、山土豆、赤包子。主要分布于华北、东北、内蒙等地区，以果实及块根入药。果实具有理气、活血、祛痰、利湿的作用，多在跌打损伤、嗳气吐酸、黄疸、肠炎、痢疾、肺结核咯血等疾病中使用。块根多用于治疗乳汁不下，乳房胀痛等临床常见病症。《四部医典》对此药有明确记载。目前，此药仅被蒙医、藏医在临床治疗中应用。蒙医习惯称其果实为赤瓟子。赤瓟虽有明确历史记载和良好的临床疗效，但文献调研中鲜有研究报道，以药物成份研究为多。有报道表明，赤雹根中含有效成份为赤雹苷 A、B、C、D、E、F[2]。其药理作用研究主要集中于总皂苷成分，具有广泛的镇痛作用[3]，未见其他方面药理药效作用的研究，也是赤瓟未能在临床中被广泛使用的一个原因。本研究以多巴胺致胃轻瘫小鼠为研究对象，拟通过观察赤瓟果实提取物对胃动素（MTL）、5-羟色胺（5-HT）表达的影响，进一步探索赤瓟恢复胃动力、理气止呕的作用机制[4]。

1 实验材料

Multiskan FC型酶标仪，厂家：赛默飞世尔仪器有限公司。Mouse 5-HT ELISA Kit (LOT:E20160301A)，MMTL ELSA Kit(批号:E20160301A)，安迪生物(上海)有限公司生产。赤瓟果实提取物(自制)水煎液，每毫升含1 g生药，用时按需要配制不同浓度。吗丁啉(多潘立酮片)，西安扬森制药有限公司，批号：150709325。盐酸多巴胺注射液，上海禾丰制药有限公司，批号：33150404；

2 实验方法

选取体质量范围在20～22 g的ICR小鼠，按照随机数字表法分为6组，每组10只，雌雄各半。分别为空白组、模型组、吗丁啉（吗丁啉6 mg/kg）组、赤瓟提取物大（3 g/kg）、中（1.5 g/kg）、小剂量组（0.75 g/kg）。空白组、模型组给予蒸馏水，吗丁啉组给予0.3%浓度的吗丁啉溶液，赤瓟组根据大、中、小剂量的不同分别给予1.5%、0.75%、0.375%浓度的赤瓟果实提取物溶液，各组按照每10 g体质量0.2 mL的标准，连续灌胃给药1周[5]。末次给药结束后1 h，除空白组外，各组均给予多巴胺，药物剂量为0.5 mg/kg，20 min后每组灌胃阿拉伯胶体活性碳粉混合物0.8 mL/只。20 min后拉椎处死动物。剖开小鼠腹腔，对胃贲门和幽门进行结扎，取出胃体，用滤纸拭干后进行称重；接下来沿胃大弯剪开胃体，将胃内容物洗去，同样用滤纸拭干后再次称重，胃内残留物重即为2次前后称重得差值，胃内残留率即为胃内残留物占所给半固体糊的重量百分比。同时从幽门切迹至回盲部将整个小肠段完全取出，不加牵引铺直于白纸上，为计算小肠推进比，需测量幽门切迹至碳糊最前端的距离以及幽门切迹至回盲部的距离。

按下列公式分别计算胃内容物残留率和小肠推进百分比：胃内容物残留率（%）= [（胃全重-胃净重）/ 碳糊重]×100；小肠推进比（%）=（碳糊移动距离/幽盲全长）×100

取小鼠胃窦及上段空肠，做组织匀浆，取上清，取血液离心后，取上清，按酶联免疫法测定其胃窦、空肠及血液中胃动素（MTL）、5-羟色胺（5-HT）水平的变化[6]。使用Excel统计软件处理实验数据，应用t检验进行组间差异比较。

3 实验结果

通过对实验数据进行统计分析，模型组、对照组比较，差异具有统计学意义（P ＜0.01），说明多巴胺可造成小鼠肠胃蠕动减慢；小鼠MTL、5-HT水平明显降低，说明药物型胃轻瘫模型复制成功。

在影响小鼠小肠推进比方面，吗丁啉和大剂量赤爮果实提取物具有明显的促进作用（P ＜0.05），通过促进肠胃蠕动，提高小肠推进比，进而降低了胃内容物的残留率；中、小剂量组有一定作用趋势，但无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 赤瓟提取物对多巴胺所致胃轻瘫小鼠胃排空的影响（ ，n = 10） %

表1 赤瓟提取物对多巴胺所致胃轻瘫小鼠胃排空的影响（ ，n = 10） %

注：与对照组比较，# P ＜0.01；与模型组比较，△P ＜0.05，△△P ＜0.01

组 别 小肠推进比 胃内容物残留率对照组 91.44±6.29 23.78±8.84模型组 59.35±7.78# 37.25±11.78阳性对照组 84.58±12.42△△ 24.93±10.13△大剂量 71.78±10.14△ 26.09±9.88△中剂量 69.01±9.75 29.08±13.917小剂量 63.97±11.00 31.90±10.159

在MTL、5-HT的表达方面，吗丁啉和大、中剂量赤爮果实提取物均具有较为明显的升高作用，无论是胃窦、空肠还是血液中的MTL、5-HT，都显示了明显的升高，差异具有统计学意义（P ＜0.05）；低剂量组有一定改善趋势，但无统计学意义 （P＞0.05）。见表2～4。

4 讨论

胃轻瘫（gastroparesis）是指胃泵功能衰竭，以胃排空明显延缓导致胃潴留而无上消化道器质性损害为特征，从而引起一系列胃肠道病理生理改变。以往将本病称为胃麻痹、胃无力、胃潴留等。症状上可无明显临床表现，也可出现早饱、餐后腹胀、反复呃逆、慢性恶心、发作性呕吐等症状。与胃排空延缓相关的组 别 MTL 5-HT

表2 赤瓟提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠胃窦MTL、5-HT的影响（ ，n = 10）

表2 赤瓟提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠胃窦MTL、5-HT的影响（ ，n = 10）

注：与对照组比较，# P ＜0.01；与模型组比较，△P ＜0.05，△△P ＜0.01，△△△P ＜0.001

组 别 MTL 5-HT对照组 1884.08±39.04 1252.50±108.49模型组 151.46±47.72# 702.08±37.39阳性对照组 265.13±20.96△△ 1015.63±84.39△△△大剂量 198.16±32.97△△ 940.63±205.52△△△中剂量 202.11±17.24△△ 855.63±126.23△△小剂量 193.95±13.39△ 701.86±26.44

表3 赤瓟提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠空肠中MTL、5-HT的影响（ ，n = 10）

表3 赤瓟提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠空肠中MTL、5-HT的影响（ ，n = 10）

注：与对照组比较:# P ＜0.01；与模型组比较，△P ＜0.05，△△P ＜0.01，△△△P ＜0.001

组 别 MTL 5-HT对照组 264.73±18.17 1205.21±23.73模型组 179.34±65.50# 588.96±12.16阳性对照组 1554.47±106.09△△△ 1169.17±18.08△△△大剂量 452.63±53.52△△△ 861.67±166.01△△中剂量 249.21±50.27△△ 813.96±248.25△△△小剂量 202.76±53.92 578.54±24.20

表4 赤瓟提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠血液中MTL、5-HT的影响（ ，n = 10）

表4 赤瓟提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠血液中MTL、5-HT的影响（ ，n = 10）

注：与对照组比较，# P ＜0.01；与模型组比较，△P ＜0.05，△△P ＜0.01，△△△P ＜0.001

对照组 457.76±83.86 627.50±84.84模型组 194.74±67.22# 165.83±17.93阳性对照组 356.18±46.23△△ 578.96±143.39△△△高剂量 273.68±48.30△△ 557.92±154.87△△中剂量 270.39±69.89△ 315.01±210.48△低剂量 206.32±53.53 190.21±88.28

胃动力异常或胃—幽门—十二指肠动力异常将导致胃轻瘫症状的出现，但其发病机制尚不十分清楚。本实验设计中观察的MTL的主要作用是影响胃肠运动。MTL为消化道激素之一，分布全在小肠[7]，是激发消化期间肌电活动的主要激素，可以促进胃强力收缩和小肠分解运动。5-HT，又名血清素，是一种自体活性物质，大多合成和分布于肠嗜铬细胞，可通过其受体引起胃肠道平滑肌收缩，使胃肠道张力增加，肠蠕动加快。本研究表明，赤瓟提取物对多巴胺致胃轻瘫小鼠MTL、5-HT因子有显著的升高作用。通过对多巴胺致胃轻瘫模型小鼠小肠推进比和胃内容物残留率的观察来评价胃排空的效果，对MTL、5-HT的研究，反映赤爮果实提取物不同剂量对肠胃蠕动具有一定的促进作用。

《中国长白山药用植物彩色图志》收录有赤瓟。赤瓟作为藏、蒙民族民间长期沿用的药材，具有深厚的民间用药基础。但在我省未能得到广泛的应用。目前，赤瓟的研究主要以成分分离为主，在抗菌作用方面，有效成分为挥发油及多糖类成分[8-10]。赤雹在临床应用时，不同的药用部位及水提物、醇提物等提纯方法的不同，临床效果也有一定的差异性[11]。赤瓟虽有良好的临床疗效，但文献调研中鲜见其药理研究的报道，至于其更深入的提高胃肠动力的机制有待进一步研究。

5 结论

多巴胺能够使小鼠肠蠕动减慢，降低胃窦、空肠和血液中MTL、5-HT水平，说明药物型胃轻瘫模型复制成功；吗丁啉和大、中剂量赤爮果实提取物均具有较为明显的升高MTL、5-HT作用。赤爮果实提取物通过升高胃窦、空肠和血液中MTL、5-HT表达水平，促进小鼠胃的排空，增加肠胃蠕动，从而达到理气止呕的作用。