不同工艺制得蒿甲醚pH依赖型固体分散体的比较研究

李文婷 张国丽 张锐武 段国蕾 杨兆祥

摘要：目的应用不同工艺制备蒿甲醚/HPMCAS（HF）固体分散体，通过含量、溶出度、收率的测定，阐明蒿甲醚pH依赖型固体分散体的最优制备工艺。方法以醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯HPMCAS（HF）为固体分散体载体，通过3种工艺（共沉淀法、溶剂蒸发法及喷雾干燥法）制备蒿甲醚/HPMCAS（HF）固体分散体。考察其含量、收率以及在PH68和PH76环境下溶出度。结果原型药物及物理混合物溶出度均较低，喷雾干燥法制备的药物含量测定和收率都符合要求，在PH76的环境下能在2 h内完全溶出，明显高于另外两种方法。结论喷雾干燥技术制备的固体分散体显著改善蒿甲醚的溶出，而且有较好的pH依赖性，更适合用以蒿甲醚pH依赖型固体分散体的制备及工业生产。

关键词：蒿甲醚;固体分散体;制备工艺;溶出度

中图分类号：R2842    文献标志码：B    文章编号：1007-2349（2018）06-0065-03

Comparative Study of Artemether pH-dependent Solid Dispersions Prepared by Different Techniques

LI Wen-ting1，2，ZHANG Guo-li2，ZHANG Rui-wu2，DUAN Guo-lei2，YANG Zhao-xiang2

（1. Dali University，Dali 671000，China;

2. Kunming Pharmaceutical Group Co ，Ltd ，Kunming 650106，China）

【Abstract】Objective：To prepare artemether/HPMCAS（HF）solid dispersions by different techniques and to expound optimal preparation process of artemether pH-dependent solid dispersions by the determination of contents，dissolution and yield Methods：Hypromellose acetate HPMCAS（HF）was used as solid dispersion carrier to prepare artemether/HPMCAS（HF）solid dispersion by three types of processes（co-precipitation，solvent evaporation and spray drying） The content，yield，and dissolution under pH 68 and pH 76 were examined Results：The dissolution of the drug prototype and physical mixture was low The drug content and yield by spray drying method were all in line with the requirements The dissolution could be completely finished within 2 hours under pH 7 6，which significantly had higher rate than the other two methods Conclusion：The solid dispersion prepared by spray drying technique can significantly improve the dissolution of artemether，and has better pH dependence It is more suitable for the preparation and industrial production of artemether pH-dependent solid dispersions

【Key words】artemether，solid dispersions，preparation techniques，dissolution rate

蒿甲醚（Artemethere，Art）為来自青蒿素的衍生物，在临床上治疗恶性疟和脑型疟有显著疗效，近年的研究发现，青蒿素及其衍生物有明确的抗肿瘤作用，有研究证实蒿甲醚能使小鼠结直肠癌移植瘤的生长减缓[1]。目前已证实青蒿素类衍生物对结肠癌细胞SW480、SW602有杀灭活性[2]。该药物为基于生物药剂学分类系统（BCS）Ⅱ类药物，水中溶解度极低[3]。故提高该药物的溶解度和溶出速度能改善其在肠道吸收，利用pH依赖型给药系统能实现其口服结直肠定位释放的目的。

本研究设计的蒿甲醚pH依赖型固体分散体是一种pH依赖型给药系统，正常生理条件下，人体小肠pH值大致在68左右，结直肠pH值大致在76左右[4]。本研究运用醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯（hydroxypropyl methylcellulose acetate succinate，HPMCAS）为载体，挑选其中的型号HF，该型号在pH68以上环境才能溶解。运用这种pH 依赖型的纤维素类衍生物作为固体分散体（Solid dispersions，SD）的载体，可以使药物在胃和小肠部位不释放或少量释放，而当到达结肠部位后，由于pH 升高，载体材料溶解而大量释放药物[5]。

近年来，已尝试使用共沉淀法、溶剂蒸发法、喷雾干燥等方法制备蒿甲醚固体分散体。但现在关于蒿甲醚固体分散体的研究基本上仍以一种制备方法为主，缺少对不同固体分散技术制备蒿甲醚固体分散体的性质比较。本研究以HPMCAS（HF）为载体，分别采用共沉淀法、溶剂蒸发和喷雾干燥的方法来制备了蒿甲醚结直肠定位固体分散体，并从溶出度、含量、收率几个方面比较不同工艺的适用性和产业化应用。

1 仪器与试药

BUCHI Mini Spray Dryer B-290喷雾干燥器（瑞士BUCHI公司）;R-215BUCHI旋转蒸发仪（瑞士BUCHI公司）;智能溶出仪（德国PHARMATEST公司）;高效液相色谱仪1200（美国Agilent公司）;梅特勒托利多XP205电子天平（梅特勒托利多仪器有限公司）;蒿甲醚（昆药集团股份有限公司）;醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯HPMCAS（HF）（亚什兰）;其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1.蒿甲醚含量测定方法的建立

2.1.1.色谱条件Kromasil C18色谱柱（46 mm×250mm，5μm）;流动相乙腈-水（75∶25），流速1 mL·min-1;检测波长216 nm，柱温25 ℃，进样量20 μL。

2.1.2.对照品溶液的制备精密称取适量蒿甲醚对照品30 mg，用乙腈定容至50 mL，作为对照品溶液。

2.1.3.蒿甲醚标准曲线精密称取适量蒿甲醚对照品，置溶量瓶中，用乙腈溶解后定容至刻度，作为蒿甲醚储备液（浓度：10 μg· mL-1）。分别精密量取一定体积的蒿甲醚对照品储备液稀释，配制成10 μg· mL-1、50 μg· mL-1、100 μg· mL-1、200 μg· mL-1、500 μg· mL-1、800 μg· mL-1的溶液，按211条件进行测定，得到回归方程Y=5888X+07979，R2=1。

2.1.4.专属性取空白溶剂（乙腈）、空白辅料、蒿甲醚固体分散体供试品进行专属性分析，图谱结果显示，分离度良好，说明溶剂及辅料均不干扰主峰测定。结果如图2。

2.1.5.精密度取蒿甲醚对照品溶液连续进样6次，记录峰面积，RSD为0336%，说明含量测定的精密度良好。

2.1.6.重复性精密称量蒿甲醚SD30 mg至25 mL容量瓶，用乙腈溶解定容，同样方法配制6份，分别进样，记录峰面积，RSD为0362%，样品含量测定的重复性良好。

2.1.7.加样回收率精密称定蒿甲醚对照品03 g置于100 mL容量瓶中，加乙腈溶解并定容，作为储备液。

精密称定蒿甲SD 30 mg 9份分别置50 mL量瓶中，取其中3份分别精密加入储备液3 mL，另取3份分别精密加入储备液5 mL，另取3份分别精密加入储备液7 mL，照含量测定方法进行测定，平均回收率为10066%，RSD为0781%，说明该方法可用于蒿甲醚的定量。

2.2.物理混合物的制備称取适量的蒿甲醚和HPMCAS（HF）按比例1：1混合，置于乳钵中研磨均匀，过80目筛，密封备用。

2.3.蒿甲醚固体分散体的制备

2.3.1.共沉淀法处方量的蒿甲醚和HPMCAS（HF）加入适量的乙醇溶液溶解至澄明，缓慢滴入纯水中，使其在纯水中缓慢析出，过滤，将得到的固体放入真空干燥箱40℃减压干燥48 h，研磨粉碎，过80目筛后备用。

2.3.2.溶剂蒸发法处方量的蒿甲醚和HPMCAS（HF）加入适量的乙醇溶液溶解至澄明，将溶液置于圆底烧瓶，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，移入真空干燥箱40℃减压干燥48 h，研磨粉碎，过80目筛后备用。

2.3.3.喷雾干燥法处方量的蒿甲醚和HPMCAS（HF）加入适量的乙醇溶液溶解至澄明，将混合液用喷雾干燥仪进行喷雾干燥。操作参数为：设置进口温度：50 ℃，最大抽气速度百分比：100%，氮气流量：30 mm，进料速度：15%（5 mL/min），B295 冷凝温度：0 ℃。经喷雾干燥直接得到蒿甲醚SD，备用。

2.4.不同工艺制得SD含量测定用不同工艺制得的3批SD进行含量测定，结果如表1。

结果表明，共沉淀法制得SD蒿甲醚含量异常。喷雾干燥法和溶剂蒸发法制得的SD含量符合标准。使用共沉淀法制备SD时，观察到在过滤环节，经过多次过滤还是有较多的白色物体存在于滤液中，将溶液放置冷藏环境下24 h再过滤任未得到改善，推断有大量HPMCAS-HF没有被滤纸截留，是造成SD含量测定值不合理的原因，说明共沉淀法不适宜制备蒿甲醚：HPMCAS-HF固体分散体。

2.5.不同工艺制得SD收率将不同工艺制备的3批SD，计算收率，结果如表2。

结果表明，共沉淀法收率最低，说明在制备过程中原辅料损失较大，喷雾干燥法的收率略低于溶剂蒸发法。

2.6.不同工艺制得SD溶出度比较将蒿甲醚原料、物理混合物以及不同工艺制得SD，按《中国药典》2015版第四部0931溶出度与释放度测定法中溶出度的测定第二法测定溶出度。分别配制pH68及PH76的磷酸盐缓冲液900 mL为溶出介质，转速100r/min，温度（37±05）℃，在规定取样时间点，吸取溶液10 mL（及时补充10 mL相同温度的溶出介质），经045 ìm 微孔滤膜过滤，取续滤液，按211条件进行测定，用计算蒿甲醚溶出量。

从图中结果看出，原型药物和物理混合物在pH68和pH76环境下溶出度较低，三种方法制备的SD都使蒿甲醚的溶出度提高，溶剂蒸发法和共沉淀法制备的SD在pH76环境下均未达到完全溶出。只有喷雾干燥法制备的SD在pH68环境下溶出83%，而pH76环境下溶出100%，结果表明载体材料HPMCAS（HF）在pH接近的情况下，对药物的释放还有区分性，最适合用来制备蒿甲醚pH依赖型SD。

3 结论

本研究主要运用不同方法制备蒿甲醚pH依赖型SD，从含量、收率和溶出度来筛选出最佳制备方法。

从实验结果可以看出，溶剂蒸发法虽然含量符合要求，收率较高，但是在pH76环境中溶解不完全，也没有pH选择性，不是最佳制备方法。共沉淀法制备的SD收率偏低，含量超出范围，累积溶出量又相对较低，不适宜用于制备蒿甲醚pH依赖型SD。喷雾干燥法含量符合要求，在不同pH环境下溶出情况符合本实验制剂筛选要求，只是收率比起溶剂蒸发法稍低，是制备pH依赖型SD最佳制备方法。

喷雾干燥法作为pH依赖型固体分散体最佳制备方法，是将药物与载体材料溶解在同一有机溶剂中，通过喷枪雾化，再进行干燥[6]，整个过程步骤少，在密封环境下一步完成，操作简单，便于投入大量生产。

参考文献：

[1]伍治平，高诚伟，王熙才，等蒿甲醚抗BALB/c小鼠结直肠癌血管生成的实验研究[J].中国肿瘤，2007（12）：1012-1014

[2]李琛琛，尹昆，闫歌抗疟药青蒿素及其衍生物相关药理作用研究进展[J].中国病原生物学杂志2016，11（2）：185-188

[3]Vogt M，Kunath K，Dressman JBDissolution improvement of four poorly water soluble drugs by cogrinding with commonly used excipients[J].Eur J Pharm Biopharm，2008，68（2）：330-337

[4]Rajguru V V，Gaikwad P D，Bankar V H，Pawar S PAn overview on colonic drug delivery system[J].International Journal of Pharmaceutical Science Review and Research，2011，2（6）：197-204

[5]朱小芳，管咏梅，田力，等中药结肠靶向制剂制备技术的研究进展[J].中成药，2016，38（8）：1810-1813

[6]崔福德药剂学[M].7版北京：人民卫生出版社，2011