遂宁市人感染H7N9流感后的动物流行病学追踪调查

陈冬 ，尹念春 ，周明忠 ，陈斌 ，梁璐琪 ，李淳

（1.四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041；2.四川省遂宁市动物疫病预防控制中心，四川 遂宁 629000）

H7N9流感属甲型流感的一种，是近年来新发现的新亚型流感病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒[1]。人感染后，早期出现发热、高烧、呼吸困难等症状，重症患者表现为严重肺炎，目前还没有针对人的疫苗[2]。

1 调查目的

2013年3月底，在上海和安徽两地率先发现发现人感染H7N9流感的病例[3]。2017年1月25日，遂宁市蓬溪县发生四川省首例人感染H7N9流感病例。为摸清H7N9流感在禽群中的流行态势，降低养殖风险，消除舆论对养禽业的负面影响，我们开展了本次流行病学调查。

2 调查方法

2.1 流行病学调查方法 先期采用横断面调查方法，对2017年1月25日至5月1日期间遂宁市发生的8例人感染H7N9流感病例情况进行流行病学分析；后期对2017年全年遂宁市多个禽群的健康状况进行整体监测。

2.2 抽样方法 初期采用简单随机抽样方式，采集8例患者所在社（小区）存栏家禽的咽喉拭子和泄殖腔拭子；中期采用系统分层抽样+集群抽样的方式，采集患者所在社（小区）周边乡镇规模养殖场的家畜（猪）及鸽子、野鸡、野鸟等病原学样品；后期则采用系统分层抽样+集群抽样+多级抽样的方式，将抽样范围扩大至遂宁全市行政区划的活禽交易市场（屠宰场）。

全市共采集3536份样品，其中鸡2066份，鸭342份，鹅207份，鸽子119份，野鸡3份，野鸟21份，猪55份，环境拭子723份。采集场点涉及散户村19个，活禽交易市场16个，规模禽场8个，规模猪场1个，规模化禽类屠宰加工企业1个。

活禽样品采样方法：深入喉头和上颚来回刮3～5次取咽喉拭子，深入泄殖腔转一圈取泄殖腔拭子。同一活禽的双拭子放入含双抗的10%甘油保存液中保存备用。

组织样品采样方法：无菌采集脑、气管、肺脏等组织2.0 g于组织匀浆机中充分研磨，加入PBS混匀，3860r/min离心5min，取上清液备用。

2.3 实验室检测方法 H7亚型流感的荧光RTPCR检测方法：根据《H7亚型禽流感荧光RT-PCR检测方法》标准（GB/T 19438.3-2004），在生物安全柜中用去RNA酶的带滤芯吸头和离心管提取RNA；再按照北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产的禽流感病毒H7亚型实时荧光RT-PCR检测试剂盒（批号：AIVH7 20170118P）的说明书配制扩增反应体系，设置反应程序，判断反应结果。每次实验设阴、阳性对照，阴性对照检测结果无特异性扩增，阳性对照Ct值符合试剂盒说明书要求并出现对数扩增曲线，符合实验质控标准，实验结果成立。检测样品无Ct值并且无扩增曲线，判为阴性。

表1 遂宁市2017年1～5月人感染H7N9流感的流行病学调查情况

3 调查结果

3.1 患者流行病学调查 8例病患的流行病学调查结果详见表1。

3.2 禽类调查情况

3.2.1 家禽养殖情况 第1例患者家养殖禽5只，第2例患者家养殖禽39只，第3例患者家养殖禽18只，其余5例患者家均未养殖家禽。

3.2.2 家禽临床诊断情况 省、市、县（区）动物疫病防控专家先后深入患者家中对存栏家禽进行临床诊断，结果均无异常。

3.3 实验室检测结果 经省、市动物疫病预防控制中心兽医实验室检测，所采3536份样品均显示为H7亚型流感病毒核酸阴性。

4 分析与讨论

4.1 人感染H7N9流感是散发病例 本次调查发现：8例患者分属船山区、蓬溪县、大英县及射洪县4个不同县域的8个乡镇（街道），无彼此接触史，且距离相对较远，是为零星散发病例。

4.2 禽类健康且未检测出H7亚型流感病毒核酸阳性 按照流行病学抽样原理，对8例患者家周边及全遂宁市范围内的禽类进行抽样检测（共检测3536份病原样品），结果显示均为阴性，并未检测出H7亚型流感病毒核酸阳性。

4.3 遂宁市人感染H7N9流感与家禽无直接关系 流行病学调查与检测结果显示：8例患者分属不同乡镇，仅3例为家禽散养户，而该3例家养的禽无任何异常症状且家中其他人员均未感染H7N9流感；其余5例患者均未从事涉禽行业的工作；同时，全遂宁市范围内的抽检家禽无一例呈H7N9流感病毒核酸阳性。综上，我们认为遂宁市2017年1月25日至5月1日发生的8例人感染H7N9流感与家禽无直接关联。

4.4 人感染H7N9流感的可能原因 吴秀娟等[4]对上海某批发市场活鸡感染H7N9风险进行研究，发现携带H7N9流感病毒进入批发市场的不仅是活鸡，还有其他介质因素如人员、车辆、野鸟等。据王琦梅等[5]研究发现，目前有关H7N9流感病毒的传染源仍存在许多未知因素，携带H7N9病毒的雀形目鸟也可能是主要传染源[6]。根据此次遂宁市人感染H7N9流感病例的动物流调分析结果，排除了家禽直接感染人的因素。人感染H7N9流感病毒的原因很可能是野鸟或某种低劣环境如人流密集、卫生管理差、潮湿不通风等因素造成的感染与传播。针对此次遂宁市人感染H7N9流感事件，笔者认为临时关闭市场并非长久之策，更多的应加强野鸟监测，加强批发、交易、屠宰等环节的卫生管理，强化相关人员的疫病防范意识。