铜绿假单胞菌感染的临床分布及耐药性分析

涂建斌，饶丽华

(江西省中西医结合医院检验科，南昌 330003)

铜绿假单胞菌是革兰阴性非发酵杆菌，其对环境的适应能力非常强，在自然界广泛分布，在水、空气、土壤、正常人的皮肤、呼吸道和肠道中都存在此菌，因此铜绿假单胞菌是常见的条件性致病菌，也是导致院内感染的主要病原菌之一[1]。近年来，随着广谱抗生素、各种侵入性操作及免疫抑制剂等在临床中的广泛应用，此菌对常用抗生素的耐药率呈不断上升的趋势，出现了耐亚胺培南的铜绿假单胞菌，甚至出现了泛耐药的菌株[2]。为此，本研究对铜绿假单胞菌的临床分布及耐药情况进行了分析，为临床合理使用抗生素提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 菌株来源

收集2014年9月至2017年8月江西省中西医结合医院住院患者临床标本中分离的铜绿假单胞菌176株，剔除同一患者、同一部位重复分离出的菌株。

1.2 研究方法

菌株培养及鉴定：按照《全国临床检验操作规程》进行常规菌株培养。经培养获得单个菌株后，采用法国生物梅里埃公司生产的VITEK2Compact全自动微生物分析系统进行菌株鉴定。

药敏试验及结果判读：采用K-B纸片扩散法进行药敏试验，药敏试验纸片和M-H培养基均购自英国Oxoid公司，依据文献[3]中的标准对药敏试验结果进行判读。

1.3 质控菌株

药敏试验质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853，均购自卫生部临床检验中心。

1.4 统计学方法

采用SPSS17.0统计软件和世界卫生组织细菌耐药性监测网提供的WHONET5.6软件进行数据处理和分析。

2 结果

2.1 铜绿假单胞菌的标本来源

176株铜绿假单胞菌的标本分布以痰液、分泌物、尿液为主，分别占66.5%、13.1%、8.0%。见表1。

表1 176株铜绿假单胞菌的标本分布

2.2 铜绿假单胞菌的不同科室分布

176株铜绿假单胞菌的科室分布以ICU、呼吸内科、神经外科为主，分别占32.4%、27.9%、13.6%。见表2。

表2 176株铜绿假单胞菌的不同科室分布

2.3 铜绿假单胞菌对16种抗生素的耐药情况

铜绿假单胞菌对多黏菌素B敏感率为100.0%，耐药率为0.0%；对妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素、阿米卡星、亚胺培南耐药率分别为12.5%、16.5%、18.2%、18.8%、22.7%。见表3。

表3 铜绿假单胞菌对16种抗生素的耐药情况

3 讨论

铜绿假单胞菌为重要的条件致病菌[1],常定植于正常人的呼吸道、皮肤黏膜、医疗设备等。当患者免疫力低下和长期使用广谱抗生素、免疫抑制剂、糖皮质激素及接受吸氧、气管插管、留置导尿管等机械性操作时，铜绿假单胞菌就会大量繁殖，导致下呼吸道感染、尿路感染及伤口感染等。

本研究中，铜绿假单胞菌的标本分布以痰液为主，占66.5%，其与文献[4]研究的结果相似，并说明现阶段呼吸道标本仍为医院铜绿假单胞菌分离的主要类型,这也与呼吸道标本送检率较高相关。此外，铜绿假单胞菌的科室分布以ICU为主，占32.4%，其与文献[5]研究的结果相似，其次以呼吸内科、神经外科为主，分别占27.9%、13.6%，这可能与呼吸内科和神经外科的患者多为长期住院、机体免疫力低下、行静脉导管或腹膜透析等有关，并可导致微生态环境紊乱，菌群失调，从而引起感染。

铜绿假单胞菌本身具有天然耐药的特性，由于抗生素的广泛应用，以及机械通气、留置导尿管等机械性操作的使用，导致铜绿假单胞菌出现获得性耐药及适应性耐药、多重耐药，甚至泛耐药[6]。铜绿假单胞菌对不同抗生素有着不同的耐药机制，其耐药机制主要有四个方面[7]：1)产生抗生素灭活酶或修饰酶；2)改变抗生素作用的靶位；3)膜屏障与主动外排作用；4)形成生物膜。本研究中，铜绿假单胞菌对头孢曲松、氨苄西林、派拉西林、头孢呋辛耐药率均>60%，不建议在临床上使用，而铜绿假单胞菌对妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素、阿米卡星、亚胺培南耐药率均<20%，可以选择性的使用，且与胡付品等[8]报道基本一致。然而，亚胺培南上市之初被认为是治疗多重耐药铜绿假单胞菌感染的首选药物[9]，但随着碳青霉烯类抗生素在临床治疗中的广泛应用，其呈逐年上升的趋势。本研究中，亚胺培南已不是治疗铜绿假单胞菌的最敏感的药物，其耐药率已高达22.7%，虽略低于2014年CHINET细菌耐药性检测数据[8]，但因其耐药率在不断上升[10]，临床仍需要引起足够的重视。对于碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌，有研究[11]表明，第3代头孢菌素联合氨基糖甙类药物体外试验表现出较高的协同作用，故建议在临床治疗亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌感染时使用。本研究中，铜绿假单胞菌对多黏菌素B敏感率为100.0%，耐药率为0.0%，其原因是多黏菌素对铜绿假单胞菌具有强大的杀菌作用，但其具有较显著的肾毒性和神经毒性，故临床要慎用。有学者[12]主张采用多黏菌素类药物联合其他药物治疗多重耐药或泛耐药革兰阴性杆菌感染。