中国人群HBV基因型及亚型与肝细胞癌相关性的Meta分析

吴玲红 黄天壬， 邓伟 黄志碧 国娇 黄月莹

肝细胞癌（以下简称“肝癌”）是常见的恶性肿瘤，研究显示HBsAg携带者肝癌发生率较HBsAg阴性者高24.21倍，其中70%～80%的肝癌发生与HBV感染有关［1］。HBV基因型及亚型的差异与HBV感染者的临床症状、预后、抗病毒治疗疗效及肝癌的疾病谱有关。近年关于HBV基因型及其亚型与肝癌关系的研究较多，但由于各研究的人群、年龄、地域、研究设计、样本量等不同，导致研究结果不一致。本研究通过Meta分析方法，系统评价HBV基因型及亚型与肝癌的相关性，以期为肝癌的防治工作提供参考。

1 材料与方法

1.1 资料来源

通过计算机检索（PubMed、Embase、中国知网数据库、中国科技期刊全文数据库（VIP）及万方数据库）和文献追溯法，收集公开发表的关于中国人群HBV基因型、亚型与肝癌相关性的病例对照研究，语种为中文和英文。检索时间为2007年1月至2017年2月。英文检索词包括“HCC/liver cancer/hepatocellular carcinoma/CA liver”“HBV/hepatitis B virus”“genotype”“subgenotype”等，中文检索词包括“原发性肝癌/肝癌/肝细胞癌”“HBV/乙型肝炎”“基因型”“基因亚型”等。

1.2 纳入和排除标准

纳入标准：⑴研究类型为病例对照研究，病例组为确诊的肝癌患者，对照组为确诊的HBV感染非肝癌患者（包括HBV无症状携带者、慢性HBV感染者、肝硬化者等）；⑵研究对象为中国人群；⑶研究内容为中国人群携带HBV基因型及亚型与肝癌的相关性；⑷对样本量有明确规定，病例组及对照组均大于50例；⑸能获取各组HBV基因型与亚型的频数分布，或有足够的信息计算基因型及亚型的频数分布。排除标准：⑴研究内容重复；⑵数据不完整；⑶研究对象重复感染或因其他原因导致肝脏疾病；⑷研究对象涉及动物的研究、综述或摘要；⑸慢性HBV感染相关疾病诊断标准描述不清。

1.3 文献筛选与数据提取

由2名研究员分别独立根据纳入排除标准筛选文献，提取文献的第一作者、发表年份、病例组与对照组例数、病例组与对照组基因型及亚型的频数等信息。

1.4 文献质量评价

2名研究员参考英国牛津循证医学中心文献严格评价项目（CASP）独立评价纳入文献的质量，评价条目有以下方面：⑴病例选择方法是否合适；⑵对照选择方式是否合适；⑶病例与对照诊断方式是否合适；⑷对照与病例是否具有可比性；⑸样本量是否充足；⑹是否准确测量暴露因素以减少偏倚；⑺数据是否充分；⑻研究结果是否适用当地人群；⑼基因型及亚型的结果是否合理。之后核查，如意见不一致，则通过讨论或由第3位研究者决定是否纳入。上述9项，满足1项得1分，若总分≥7分，则判定文献质量较好。

1.5 统计学方法

采用RevMan 5.3软件分析。计算OR合并值及95%可信区间（CI）。异质性检验采用Q检验，异质性程度判定用I2值，若异质性检验结果P＜0.10且I2＞50.00%，表明研究结果间存在异质性，采用随机效应模型进行Meta分析；若异质性检验结果P≥0.10且I2≤50.00%时，则采用固定效应模型进行Meta分析。以双侧P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 纳入研究基本特征及质量评价

最终检索到符合标准的研究共38篇，其中HBV基因型与肝癌相关性研究37篇［2-38］、HBV基因亚型与肝癌相关性研究 8 篇［3，26，34-39］。质量评价结果显示，所有最终纳入的研究评分均≥7分，提示纳入的研究质量较好。纳入研究基本特征见表1、表2。

表1 纳入HBV基因型与肝癌相关研究的基本特征

表2 纳入HBV基因型亚型与肝癌相关性研究的基本特征

2.2 Meta分析结果

2.2.1 HBV基因型与肝癌的相关性 经异质性检验，HBV C基因型和HBV B基因型各纳入文献间存在异质性（P＜0.001，I2=73.00%），故采用随机效应模型分析，结果显示HBV C基因型罹患肝癌风险较HBV B 基因型高（OR=2.35，95%CI：1.93～2.87，P＜0.001），见图1A。经异质性检验，HBV C基因型和HBV A/D基因型各纳入文献间存在异质性（P＜0.001，I2=82.00%），故采用随机效应模型分析，结果显示HBV C基因型罹患肝癌风险与HBV A/D基因型差异无统计学意义（OR=1.25，95%CI：0.20～7.82，P=0.81），见图 1B。

图1 HBV基因型与肝癌相关性的Meta分析

2.2.2 HBV基因亚型与肝癌的相关性 经异质性检验，HBV C1亚型和HBV C2亚型各纳入文献间的异质性可忽略（P=0.69，I2=0%），故用固定效应模型分析，结果显示，HBV C1亚型、HBV C2亚型者罹患肝癌风险差异无统计学意义（OR=1.05，95%CI：0.66～1.68，P=0.82），见图2A。经异质性检验，HBV基因C2亚型和HBV B2亚型各文献间异质性可忽略（P=0.35，I2=10.00%），故用固定效应模型分析，结果显示，HBV C2亚型罹患肝癌风险较 HBV B2亚型高（OR=1.77，95%CI：1.38～2.27，P＜0.001），见图2B。

2.3 敏感性分析

采用固定效应模型及随机效应模型分别合并后，再用比较其结果是否逆转的方法进行敏感性分析，可在一定程度上反映结果的可靠程度。本研究采用两种效应模型分别计算，各合并结果未见逆转，说明结果可靠。

3 讨论

HBV基因型及其亚型与HBV感染者抗病毒治疗效果以及肝癌的发生发展等有关［40］。根据HBV全基因组序列差异程度（以≥8%的序列差异为分型标准），HBV基因型至少被分为10个基因型，其中A、B、C、D为主要基因型。东南亚地区以B和C基因型最常见，北美和欧洲则以A和D基因型常见。携带不同HBV基因型、亚型患者肝癌的发生风险目前存在较大争议。Chan［41］研究显示，携带HBV C基因型者罹患肝癌的风险较B基因型者增加2～3倍。而多项横断面研究［42-43］显示，携带HBV B基因型与HBV C基因型者罹患肝癌的风险差异不大。一项病例对照研究［44］表明，携带HBV A基因型者发生肝癌的风险较HBV D基因型者增加了5倍，但Madan等［45］研究并未观察到同样结论。Meta分析是针对多个同类研究结果进行定量合并分析，以提高统计检验效能，使研究结论更加可信。本研究通过Meta分析结果显示，携带HBV C基因型者罹患肝癌的风险是HBV B基因型的2.35倍，HBV C基因型罹患肝癌的风险是HBV A/D基因型的1.25倍，说明携带HBV C基因型者与HBV A、B、D基因型者相比，罹患肝癌风险更高，HBV C基因型感染的患者较易转化为活跃的肝脏疾病及严重肝硬化，因此应密切监测，预防肝癌发生发展。HBV亚型分析结果显示，携带HBV C1亚型、HBV C2亚型者罹患肝癌风险差异无统计学意义，但携带HBV C2亚型者罹患肝癌风险较携带HBV B2亚型者高，与Wong等［46］研究结果相似，但本次研究OR值可信区间更窄，因此估计结果更可靠。

图2 HBV基因型亚型与肝癌相关性的Meta分析

本次Meta分析发表偏倚可忽略，纳入文献质量较优，但由于纳入的研究均为病例对照研究，属回顾性调查，其结果真实性较前瞻性研究差，可能影响分析结果。目前HBV基因型及其亚型与肝癌的相关性尚缺乏前瞻性研究，在罕见疾病中，病例对照效应值OR值与队列研究效应值RR值近似相等，故认为本次病例对照研究的Meta分析对进一步探讨HBV基因型及亚型与肝癌的相关性仍具有参考价值。

综上所述，携带HBV C基因型较携带HBV A、B、D基因型者罹患肝癌风险更高，携带HBV C2亚型者罹患肝癌风险较HBV B2亚型高，因此应加强监测感染HBV C基因型患者，预防肝癌发生发展，这一结论对筛选肝癌高危人群及肝癌的预防工作具有一定参考价值。