陈化玉米对肉鸭生长性能、抗氧化功能及免疫器官指数的影响

朱正鹏，王瑜铭，丁 莹，张遨然，燕 磊，黄李蓉，安 沙，李 巍

（1. 新希望六和股份有限公司，北京 100102；2. 成都枫澜科技有限公司，四川成都 611731）

玉米是畜禽养殖所使用的主要能量原料之一。前些年收储的玉米，随着存贮时间的推移及粮库保存条件的差异，其营养成分会发生变化，脂肪会产生不同程度的氧化[1]。崔小燕等[2]研究发现，使用长期储存的玉米会降低肉鸡的免疫功能，引发机体的氧化损伤，进而可能导致生产性能下降[3]。通常情况下，储存期超过3年的粮食为陈化粮。而在畜禽养殖中，所用玉米的储存期往往可能超过3年，甚至更久。因此，探讨一定储存期的玉米对畜禽生产性能的影响，对饲用玉米的合理储存和使用有重要的指导意义。本试验选取2013年粮库存贮玉米替代部分储存1年的常规玉米，旨在研究陈玉米对肉鸭的生长性能、抗氧化功能和免疫器官发育的影响，为陈玉米的合理、有效使用提供相应参考和科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物及试验设计 选取12日龄樱桃谷肉鸭2 000只，随机分为2组，即对照组、陈玉米组，每组5个重复，每个重复单圈饲养，每圈200只，试验期30 d。

1.2 试验饲粮 试验采用2013年东北区域粮库存贮的玉米，储存期4年；对照组玉米为2016年收获，储存期为1年。2种玉米的营养成分为实验室实测值（表1）。对照组饲喂基础饲粮，陈化玉米组用陈化玉米等量替代对照组中30%的常规玉米，对照组及陈化玉米组的饲粮组成及营养成分见表2。

表1 常规玉米与陈化玉米营养成分

1.3 饲养管理 试验在彭山新希望饲料有限公司肉鸭试验场进行。采用网上平养。采用标准的肉鸭饲养管理办法。饲喂颗粒料，整个试验期间自由采食和饮水。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生长性能 记录每圈采食量；肉鸭试验开始和结束每圈单独称重、称剩料量。计算各组平均日采食量（ADFⅠ）、平均日增重（ADG）和耗料增重比（F/G）。

表2 饲粮组成及营养成分（风干基础）

1.4.2 血清抗氧化指标 分别于肉鸭26日龄和42日龄进行颈部静脉采血，每个重复选取2只鸭，采血10 mL，常温下静置0.5 h、3 500 r/min离心10 min，取上清液装于离心管中，-20 保存，用于测定血清抗氧化指标。

超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）分别采用试剂盒（A001-3、A003-1、A005）进行测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，测定时按试剂盒说明书进行操作。

血清中维生素E和维生素C含量采用高效液相色谱法（HPLC）测定。

维生素E血清样品处理：取400 μL血清，加入400 μL乙醇，旋涡1 min，加入800 μL正己烷，旋涡3 min，10 000 r/min离心10 min，取600 μL上清液，残渣中再加入600 μL正己烷，旋涡3 min，10 000 r/min离心10 min，取上清液。合并2次上清液，氮气吹干，加入400 μL甲醇溶解，旋涡1 min，经0.22 μm的微孔滤膜过滤后，取20 μL进样。

维生素C血清样品处理：取200 μL血清，加入10 μL水，加入维生素C提取溶剂（0.35 mol/L高氯酸+0.27 mmol/L乙二酸四乙酸二钠+ 0.1%二硫苏糖醇）500 μL，旋涡2 min，10 000 r/min离心5 min，取上清液，经0.22 μm的微孔滤膜过滤后，取20 μL。

色谱条件：色谱柱为C18 UG120色谱柱（4.6 m×25 cm，5 μm）。

测定维生素E时，流动相为甲醇-水（v/v=97.5:2.5）；流速为1.0 mL/min；检测波长292 nm；柱温为35 ；进样量为20 μL。

测定维生素C时，流动相为30 mmol/L KH2PO4（pH=3.0）-甲醇（v/v=96:4），检测波长为243 nm；流速为1.0 mL/min；进样量为20 μL，柱温为35 。

1.4.3 免疫器官指数 42 日龄时从每个重复随机选取1只肉鸭，称重，屠宰后立即采集脾脏、法氏囊，并称重，计算免疫器官指数。

免疫器官指数=免疫器官重量（g）/体重（kg）

1.5 统计分析 采用SPSS 13.0统计软件对数据进行t检验分析，试验结果用平均值±标准差表示，以P＜0.05表示差异显著，P＞0.05表示差异不显著。

2 结 果

2.1 陈化玉米替代常规玉米对肉鸭生长性能的影响 由表3可知，与对照组相比，陈化玉米组显著降低了肉鸭的末重和ADG（P＜0.05），但对肉鸭的ADFⅠ、F/G和成活率均无显著的影响（P＞0.05）。

表3 陈化玉米替代常规玉米对肉鸭生长性能的影响

2.2 陈化玉米替代常规玉米对肉鸭免疫器官指数的影响由表4可知，与对照组相比，陈化玉米组对肉鸭脾脏指数和法氏囊指数均无显著影响（P＞0.05）。

表4 陈化玉米替代常规玉米对肉鸭免疫器官指数的影响 g/kg

2.3 陈化玉米替代常规玉米对肉鸭血清抗氧化能力的影响 由表5可知，与对照组相比，陈化玉米组对26日龄和42日龄肉鸭血清中SOD活性和MDA含量均无显著影响（P＞0.05），对26日龄肉鸭血清中GSH-Px含量也无显著影响（P＞0.05），但极显著降低了42日龄肉鸭血清中GSH-Px活性（P＜0.01）。

表5 陈化玉米替代常规玉米对肉鸭血清抗氧化指标、维生素E和维生素C含量的影响

与对照组相比，陈化玉米组对26日龄肉鸭血清中维生素E、42日龄血清中维生素E和维生素C含量均无显著影响（P＞0.05），但陈化玉米组显著降低了26日龄肉鸭血清中维生素C含量（P＜0.05）。

3 讨 论

3.1 陈化玉米对肉鸭生产性能的影响 玉米在动物饲粮中应用广泛，在配方中较其他原料添加比例更高，其内在营养成分的变化会影响动物的生长效率和生理健康。玉米在储存过程中，随着储存时间的增长，脂类部分会出现水解导致酸败氧化，改变淀粉糊化特性，降低pH，改变酶活性，影响动物的正常生长[4-5]。通过实验室检测分析可知，与对照组玉米相比，陈化玉米水分略低，粗蛋白质略高，粗灰分和粗纤维均较高，但容重比正常玉米低，脂肪酸值高17.8 g/100g。根据实际生产经验，本试验采用30%陈化玉米替代常规玉米，研究该水平下陈化玉米对肉鸭生长的影响。同时本试验配方并非等能等氮设计，而是用30%陈化玉米等量直接替代常规玉米。通过对日粮进行检测分析，二者营养水平差异较小。本试验结果表明，使用30%陈化玉米替代常规玉米后，肉鸭的ADG和出栏体重显著降低，但对肉鸭的ADFⅠ和F/G没有显著影响。而本研究是在肉鸭12日龄时开始饲喂陈化玉米日粮，仅说明了中后期添加30%陈化玉米对肉鸭生长性能的影响。有学者研究发现，储存1年的玉米饲喂肉鸭对ADG、ADFⅠ和F/G均没有显著影响[6]；储存5年的玉米降低了肉鸡0～3周体增重，但对采食量和F/G没有显著影响[7]。因此，玉米存储期不同以及饲喂阶段不同导致陈化玉米对肉鸭生长性能的影响有所差异。

3.2 陈化玉米对肉鸭免疫器官指数的影响 脾脏和法氏囊是禽类重要的免疫器官，是机体免疫细胞产生、分化并发挥效应的场所[8]。免疫器官指数在正常范围内的变化可以理解为其发育的程度。本研究中，添加陈化玉米后对肉鸭脾脏指数和法氏囊指数没有显著影响。陈化玉米与对照组玉米的脂肪酸值在50～70 g/100g，由脂肪酸带来对免疫器官的刺激或抑制作用并没有较大差异。有研究发现，4%氧化鱼油显著降低了21日龄肉鸡的法氏囊指数[9]，而5%高油脂对肉鸡14日龄和21日龄的脾脏指数和法氏囊指数没有显著影响[10]。崔小燕等[2]分别用储存4年、2年和0年玉米（脂肪酸值分别为91.8、56.23、43.04 mg/100g）配制饲粮，各组间42日龄肉鸡法氏囊指数没有显著差异。本试验所用陈化玉米的脂肪酸值为68 mg/100g，也未对免疫器官指数产生显著作用，与以上研究结果一致。

3.3 陈化玉米对肉鸭血清抗氧化、维生素E和维生素C含量的影响 血清中GSH-Px、SOD活性以及MDA水平均是反映机体抗氧化能力的关键指标[11]。GSH-Px能催化谷胱甘肽变为氧化型谷胱甘肽，使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物，从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害[12]。因此，血清中GSHPx活性越高，机体保护细胞膜结构及功能的能力越强；反之，保护能力越弱。MDA是脂质过氧化产物，其含量反映脂质过氧化及细胞损伤的程度。研究表明，陈化玉米饲喂肉鸭后，机体摄入游离脂肪酸增加，导致外源性自由基增多，机体损伤增加，血清抗氧化能力降低[13]；氧化鱼油显著降低了蛋鸡血清中GSH-Px活性，但对SOD活性没有显著影响[14]。本研究结果类似，陈化玉米极显著降低了42日龄肉鸭血清GSH-Px活性。

血清抗氧化剂还包括多种抗氧化剂，如非酶促体系中维生素E和维生素C，可协同阻止脂肪过氧化。研究表明，伴随着维生素E添加量（0～20 ⅠU/kg）增加可提高蛋鸭血液中GSH-Px活性[15]。同样，维生素C具有抗氧化作用和间接的抗应激特性[16]，保护机体免于自由基的威胁。血清中维生素C水平降低，则表明机体清除自由基的能力减弱。刘比一等[13]研究表明，饲喂储存时期分别为2、3、4、5年的陈化玉米对42 d肉鸡血清维生素C和维生素E含量的影响均不显著。与本试验结果一致，可能原因是一定储存期的玉米中脂肪酸影响不足以引起机体的抗氧化失衡。而本试验中，对于26日龄肉鸭，陈化玉米会显著降低血清维生素C水平，说明陈化玉米对生长前期肉鸭血清维生素C的影响较大，而对生长后期肉鸭的影响并不显著。

4 结 论

饲粮中使用30%陈化玉米会降低肉鸭的生长性能，降低血清GSH-Px活性，对机体抗氧化能力有一定影响。