基于GC-MS的气血双补酒挥发性化学成分研究*

陈林伟，王 琴，彭德熹，袁成业，蔡宝昌，王 翼，王姝梅

（1．南京中医药大学泰州附属医院，泰州 225300；2．南京中医药大学，南京 210023；3．南京理工大学泰州科技学院，泰州 225300）

气血双补酒是江苏省中医院名老中医孟景春教授的临床经验方，是由人参、黄芪、当归、炒白芍、陈皮、玉竹、酒黄精、制何首乌、枸杞子9味中药组成的复方制剂，具有补益气血、通阳散结、复脉固脱等功效，临床上常用于治疗心力衰竭、心肌缺血、冠心病、心绞痛、免疫力低下以及恶性肿瘤等疾病[1－2]。国内外已有相关文献报道对其提取工艺、化学成分以及微量元素进行了分析研究，该复方制剂含有大量的挥发性成分，对其治疗心血管疾病有着重要的作用，但目前文献中并未见对本方所含挥发性化学成分进行系统报道，因此本研究采用气相色谱－质谱联用仪（GC－MS）分析研究气血双补酒中的挥发性化学成分，为其药效物质基础的研究和质量控制提供一定的参考依据。

1 仪器与试药

仪器型号为Agilent5975CMSDGC－MS，包括7693自动进样器；乙酸乙酯（分析纯，批号：20140201，南京维之诚化学试剂有限公司）；无水硫酸钠（分析纯，批号：20140501，南京化学试剂有限公司）；娃哈哈纯净水；气血双补酒样品来自南京中医药大学泰州附属医院制剂室；复方中各单味药经南京中医药大学蔡宝昌教授鉴定。

2 实验方法

2.1 挥发油的提取 称取气血双补酒1 000 mL，置于2 000 mL圆底烧瓶中，水蒸气蒸馏提取10 h，至挥发油不再增加，经无水硫酸钠脱水后得到挥发油，同法提取人参、黄芪、当归、炒白芍、陈皮、玉竹、酒黄精、制何首乌、枸杞子，得到各药材的挥发油，本实验挥发油提取率为5．1%。以上挥发油溶液经无水硫酸钠脱水，通过0．45μm有机滤膜制备即得。

2.2 色谱条件 BP5－5%苯基二甲基聚硅氧烷柱（30 m×250μm×0．25μm），初始温度为 60℃，进样口的温度设置为270℃；以5℃/min升温速度慢慢升至200℃，保持6 min；然后再以5℃/min升温速度缓慢升至240℃，保持5 min。高纯氦气为载气，分流比例为20∶1，流速设置为30 mL/min，每次进样2 μL，Gassaver：关闭。

2.3 质谱条件 离子源的温度为230℃，设置接口温度为270℃，电子的能量设置为70 eV，四级杆的温度设置为50℃，质量扫描的方式选择为全部扫描范围：50～550 amu，设置电子倍增器的电压值为1 553 V。每次进样为2μL，样品进样2针，使用Nist 11．0标准谱图库进行检索分析。

3 结果与数据分析

实验结果通过质谱软件Chem Station和NIST 11.0标准的质谱检索库进行检索分析，并比对标准质谱谱图进而鉴定化学成分一共得到39种挥发性成分，且各挥发性成分匹配率均在90%以上，成分鉴定的结果详情见表1。通过优化的色谱质谱条件，对气血双补酒中含有的挥发性成分进行全面的GC-MS分析，采用面积归一化法来测定挥发性各成分的含量，并分析得到气血双补酒挥发性成分的总离子流图，见图1。

表1 GC-MS鉴定气血双补酒中的挥发性成分Tab.1 Componentsidentified of QXSBJ by GC-MS

图1 气血双补酒挥发油的总离子流图Fig.1 GC-MSchromatogram of QXSBJ

本实验通过水蒸气蒸馏的方法提取出气血双补酒中的挥发性化学成分，同时采用GC-MS技术对挥发油提取物进行挥发性化学成分分析研究，利用谱库检索结合药材色谱峰归属对气血双补酒挥发油进行定性分析，应用峰面积百分比法计算相对量，另对各色谱峰进行药材归属研究[3-4]。GC-MS分析结果显示，Ethyl acetate为溶剂峰，其含量最高，其次气血双补酒中富含Isocetic acid（10.24%）、Terpineol（10.01%）、Gamma.-Terpinene（9.95%）、（+）-2-carene（9.74%）、D-Limonene（9.67%）等挥发性成分。色谱峰归属研究表明，来源于人参的挥发性成分有9个、来源于黄芪的挥发性成分有11个、来源于当归的挥发性成分有25个、来源于炒白芍的挥发性成分有5个、来源于陈皮的挥发性成分有20个、来源于玉竹的挥发性成分有7个、来源于酒黄精的挥发性成分有6个、来源于制何首乌的挥发性成分有8个、来源于枸杞子的挥发性成分有2个。

本实验通过GC-MS法能够快速有效地分析气血双补酒中的挥发性成分，为气血双补酒药效物质基础的研究和质量控制提供参考。