齐国山 郭 冉 张 静 沈庆洲 申 亮
近几十年来,我国已成为全球第一水产养殖大国,然而不合理的集约化养殖方式带来诸多病害。每年因病害造成多达百亿的直接经济损失,因此研发有效预防及治疗药物已刻不容缓。传统药物易富集、有残留、污染水体,抗生素抗药性严重,不宜大量使用。中草药发酵物与其他药物相比,利用率高、预防效果好、彻底、无毒、环境友好、成本低,近年来逐渐得到重视。
南美白对虾(Penaeus vannamei Boone),是我国水产养殖的主要品种之一,随着病害肆虐,近年来有一些研究将中草药添加到白对虾饲料中有一定效果,但适口性差、配伍不合理等问题,始终无法解决。因此,本研究拟将中草药经发酵解决上述问题,通过对白对虾生长效果进行调查,研究本中草药发酵物的添加效果。
表1 饲料配方
1.1.1 试验药材 中草药发酵物的制备:2g枯草芽孢杆菌+1g饲料酵母+2g德氏乳杆菌加入到中草药复合物(大黄24g,黄芪18g,黄芩18g,茵陈30g,大蒜40g)混匀,将混合物加入到300g麦麸(已过50~60目筛)混匀,混合物与300g面粉(已过50~60目筛)混匀,加水使水分达到40%,混匀,加入到发酵罐进行固态密封发酵(T:30~34℃,3h通气一次,每次10min,绝氧30h后,继续发酵60h),低温干燥,粉碎过80目筛,包装备用。
1.1.2 试验鱼苗及分组 选择健康、大小一致的白对虾600尾,暂养,按每桶50尾放虾(虾大小为5±0.2g),随机分配到四个处理组(0%中草药发酵物组为对照组、1.0%中草药发酵物组、4.0%中草药发酵物组、8.0%中草药发酵物组)的12个400L养殖桶中进行45d养殖效果实验。
1.2.1 饲料配制 表1为符合白对虾营养需求的饲料配方。基础饲料配方基础上分别添加0、1.0%、4.0%、8.0%的中草药发酵物,即为对照组(0%CHMFE组)、1.0%CHMFE组、4.0%CHMFE组、8.0%CHMFE组饲料。饲料原料经粉碎过80目筛,经配料、混合,挤压制粒,制成直径1mm颗粒。
表2 饲料中添加中草药发酵物对白对虾生长效果的影响(平均值±标准误,n=3)1,2
表3 肝脏酶的活性测定(平均值±标准误,n=3)1,2
1.2.2 投喂管理 每天8:00、16:00投喂,定期换水,充气。记录饲料投喂量,如有残饵,吸出,烘干并记录。定期检测水质,水质条件如下:pH值7.5、氨氮<0.1mg/L、亚硝酸盐<0.02mg/L、溶氧>5mg/L。每天检查是否有死虾,如有捞出,称重记录。
1.2.3 肝脏酶活性测定
超氧化物岐化酶(SOD)活性测定;过氧化氢酶(CAT)活性测定。
1.2.4 计算
增重率(%)=100×(末重-初重)/初重;
平均增重=末重/末尾数-始重/始尾数;
特定生长率=100×(ln末重-ln始重)/养殖天数;
料比=摄食量/增重量;
成活率=100×末尾数/初尾数;
肝体比=100×肝脏重/鱼体重;
酶活=[(0.07-样液速率)/0.07×100%]/50%×反应液总体积×样液稀释倍数/样液体积
1.2.5 数据处理 用spss13.0对数据进行单因素方差分析。
饲料中添加中草药发酵物(CHMFE)对白对虾生长效果的影响见表2。与对照组相比,添加中草药发酵物对白虾的末重、增重率、特定生长率、成活率均有显著提高(p>0.05)。而添加中草药发酵物对肝体比也有显著升高(p<0.05),对料比有先降后升的影响,1.0%添加组显著低于对照组(p<0.05),8.0%添加组显著高于对照组(p<0.05)。
添加中草药发酵物对白对虾肝脏超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的影响见表3。可见,随着饲料中中草药发酵物的增加,罗非鱼肝脏超氧化物歧化酶和过氧化氢酶均逐渐显著升高(p<0.05) 。
中草药在水产养殖上有广泛应用。如柽柳、金银花、连翘、五倍子、大黄、黄芩、龙胆草、当归、川芎、柴胡、枳壳等中草药在促进草鱼、鲫鱼、鲈鱼、泥鳅、罗非鱼、白对虾等动物的摄食与生长方面有较多的研究报道。大黄、黄芪、茵陈、黄芩及大蒜因成本较低,效果较好,是在水产养殖上常用的中草药。
通过结果分析发现,添加1.0%~4.0%的中草药发酵物显著提高了白对虾的末重、增重率和特定生长率等。可见,添加中草药发酵物对于改善白虾的生长与摄食是有明显效果的,这与姚红梅等、谢丽玲等直接添加中草药复合物的研究结果是一致的。水产品形态参数直接关系到其销售经济价值,本中草药发酵物的添加使肝体比明显提高,可能与中草药在保肝护肝方面的作用有关。肝脏超氧化物歧化酶和过氧化氢酶对于体内自由基清除,预防衰老和DNA分子损伤保护起重要作用。本研究中,罗非鱼肝脏超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性随着饲料中中草药发酵物含量增加均显著升高。据中药文献记载,大黄有泻热毒,破积行瘀,黄芪有行气托毒,消肿生肌,黄芩有清热燥湿,解毒安胎,茵陈有清湿热退黄之效,其中含有的皂苷、生物碱及挥发性有机酸等主要有效物质能够保肝护肝,从而最终间接保护和促进了肝脏的功能和健康。