甘辉群,刘明生*,袁 橙,郝福星,康金龙,张 昊,熊小兵
(1.江苏农牧科技职业学院,江苏泰州 225300;2.江苏省泰州市海陵区成香家禽养殖场,江苏泰州 225318)
当前畜禽养殖存在抗生素滥用、疫病频发、环境污染等问题。因此,加强生物安全管理,用中草药添加剂等代替抗生素,实现无抗健康养殖,保障畜禽产品安全,是我国畜牧业实现现代化的必然趋势。
黄芩解毒散是由黄芩、黄连、白头翁、地锦草、马齿苋、铁苋菜、女贞子、金樱子、玄参、地榆、老鹳草11 味中药复方提取而成,含有黄芩苷、黄连素、白头翁素等活性成分,可以抑制菌体蛋白质和核酸的合成,对大肠杆菌和沙门氏菌都有较好的抑制作用,能促进有益菌的生长,从而全面调理肠道,整体提升肠道健康。目前,对黄芩解毒散的研究主要在仔猪的生产性能和腹泻病防治[1-2],而对鸭的生产性能和肠道健康的研究则鲜见报道。笔者在饲粮中添加一定浓度的黄芩解毒散,通过测定番鸭平均体重、平均日增重、料重比、成活率以及番鸭肠道菌群、小肠绒毛高度、隐窝深度、V/C值等,旨在为其在家禽生产中的应用提供试验数据。
1.1主要药物和试剂黄芩解毒散,购自无锡正大畜禽有限公司,主要由黄芩、黄连、白头翁、地锦草、地榆、铁苋菜、老鹳草、玄参、女贞子和金樱子11味中药组成,其中黄芩苷≥3%、槲皮素≥0.01%。20%硫酸新霉素可溶性粉,购自无锡正大畜禽有限公司。
1.2试验动物及饲养管理方法1日龄番鸭1 500只,由江苏省泰州市海陵区成香家禽养殖场提供,随机分成5组,每组设5个重复,每个重复60只,公母各半,各处理组之间体重差异不显著(P>0.05)。Ⅰ组为对照组,仅饲喂基础日粮;Ⅱ组,在基础日粮中添加0.05%硫酸新霉素可溶性粉;Ⅲ组,在基础日粮中添加0.02%黄芩解毒散;Ⅳ组,在基础日粮中添加0.03%黄芩解毒散;Ⅴ组,在基础日粮中添加0.04%黄芩解毒散。试验番鸭网上平养,全程自由采食、充足饮水,按照以下免疫程序进行免疫接种:1日龄,口服鸭病毒性肝炎活疫苗1羽份;7日龄,每只肌肉注射鸭传染性浆膜灭活苗0.5 mL;14日龄,每只皮下或肌肉注射重组禽流感(H5、H7)灭活苗0.3 mL;21日龄,皮下或肌肉注射鸭瘟疫苗1羽份。预饲期7 d,正试期42 d。各阶段番鸭基础日粮组成及营养水平分别见表1~2。
1.3样品采集与指标测定
1.3.1生长性能的测定。试验鸭空腹12 h,以重复为单位分别在试验第14、28和42天,每个重复分别随机选取番鸭10只,称重并记录给料量和剩料量,用于计算平均体重、平均日采食量、平均日增重和料重比;试验结束后记录鸭只死亡数,用于计算成活率。
1.3.2十二指肠、空肠和回肠形态的测定。以重复为单位分别在试验结束时(第42天),番鸭称重后,颈部放血致死,打开腹腔,在相同位置分别取长度约1 cm的十二指肠、空肠和回肠,用生理盐水冲洗肠道中的内容物后,用10%福尔马林固定液固定24 h,固定样本经洗涤、脱水、透明、浸腊、包埋、修块等处理后,切成7 μm 厚的蜡片,再进行H-E染色、中性树胶封片等,在光学显微镜上观察组织形态学变化,测定其十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度(VH)和隐窝深度(CD)值,并计算绒毛高度与隐窝深度的比值(V/C)。绒毛高度为肠腺开口至绒毛顶端的垂直高度;隐窝深度为绒毛根部上皮的凹陷处到固有层的距离。
表1 各阶段番鸭基础日粮的组成
注:预混料可为1 kg全价料提供维生素 A 11 000 IU、维生素 D34 000 IU、维生素 E 45 IU、维生素 K34.0 mg、维生素 B12.0 mg、核黄素 6.0 mg、泛酸 20.0 mg、烟酸50.0 mg、叶酸 1.0 mg、生物素 0.2 mg、维生素 B1220 μg、胆碱500.0 mg、铜 10.0 mg、铁 80.0 mg、锌 80.0 mg、锰 100.0 mg、碘 0.5 mg、硒 0.3 mg、钴 0.4 mg
Note:The premix could provide for complete feed per kilogram: vitamin A 11 000 IU, vitamin D34 000 IU, Vitamin E 45 IU, vitamin K34.0 mg, Vitamin B12.0 mg, riboflavin 6.0 mg, pantothenic acid 20.0 mg, niacin 50.0 mg, folic acid 1.0 mg, biotin 0.2 mg , vitamin B1220 μg, choline 500.0 mg, copper 10.0 mg, iron 80.0 mg, zinc 80.0 mg, manganese 100.0 mg, iodine 0.5 mg, selenium 0.3 mg, cobalt 0.4 mg
表2 各阶段番鸭基础日粮的营养水平
1.3.3盲肠大肠杆菌、沙门氏菌和乳酸菌的培养计数。上述试验解剖的番鸭,每只取新鲜盲肠内容物1 g,用0.85%氯化钠溶液99 mL稀释并混合均匀,然后按照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7等倍数进行梯度稀释。然后吸取10-3、10-4、10-53个浓度各100 μL置于麦康凯琼脂培养基中进行细菌培养,每个稀释度划3个重复板,在37 ℃培养箱内恒温培养18 h,在麦康凯培养基中大肠杆菌菌落呈鲜桃红色,圆形、扁平,边缘整齐,表面光滑、湿润;沙门氏菌的菌落呈无色至浅橙色、透明或半透明;再吸取10-5、10-6、10-7共3个浓度各100 μL,置于MRS培养基中进行细菌培养,在37 ℃培养箱内恒温培养48 h,在MRS培养基中平皿底为黄色,乳酸杆菌为淡蓝色或白色、中等大小、凸起、湿润、边缘整齐,菌落呈圆形,直径为(3.0±1.0) mm。统计平板菌落个数,结果以肠道内容物中细菌数量(CFU/g)的对数值表示。
1.4数据统计与分析试验数据用Excel软件进行初步处理,应用SPSS 16.0统计软件进行数据统计与分析,采用Duncan氏法进行多重比较,结果均以平均值±标准差表示。
2.1黄芩解毒散对番鸭生长性能的影响由表3可知,试验组番鸭预饲7 d后,8日龄平均体重没有显著差异(P>0.05);21日龄,试验组番鸭平均体重均高于对照组,且Ⅳ和Ⅴ组21日龄平均体重与 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组相比差异显著(P<0.05);35日龄,Ⅳ和Ⅴ组番鸭平均体重与 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组一比差异极显著(P<0.01);49日龄,Ⅳ和Ⅴ组番鸭平均体重极显著高于Ⅰ、Ⅱ 和Ⅲ组(P<0.01),Ⅱ和Ⅲ组番鸭平均体重也极显著高于 Ⅰ 组(P<0.01);4个试验组番鸭平均日增重均显著高于对照组(P<0.05),4个试验组之间差异不显著(P>0.05);4个试验组平均日采食量与对照组差异不显著(P>0.05);Ⅳ和Ⅴ组料重比均显著低于 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P<0.05);Ⅳ和Ⅴ组番鸭成活率均显著高于 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P<0.05),Ⅱ和Ⅲ组番鸭成活率也显著高于 Ⅰ 组(P<0.05)。
2.2黄芩解毒散对番鸭十二指肠、空肠和回肠肠道形态的影响由表4可知,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组十二指肠绒毛高度极显著高于Ⅰ和Ⅱ组(P<0.01),而Ⅳ和Ⅴ组绒毛高度也显著高于Ⅲ组(P<0.05);Ⅳ和Ⅴ组十二指肠隐窝深度显著小于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P<0.05);Ⅳ和Ⅴ组V/C值极显著高于Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ组V/C值也极显著高于Ⅰ和Ⅱ 组(P<0.01)。
表3 黄芩解毒散对番鸭生长性能的影响
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05),同列不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)
Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)
表4黄芩解毒散对番鸭十二指肠肠道形态的影响
Table4TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderontheduodenummorphologyofmuscovyducks
组别Group绒毛高度Villus heightμm隐窝深度Crypt depthμmV/C值V/C valueⅠ985.45±19.62 cB121.85±2.15 a8.09±0.22 CⅡ983.11±22.56 cB122.73±3.06 a8.01±0.28 CⅢ1 017.26±25.23 bA116.59±1.88 a8.72±0.36 BⅣ1 029.41±20.78 aA109.45±2.77 b9.40±0.45 AⅤ1 035.01±24.48 aA108.16±3.36 b9.57±0.19 A
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05),同列不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)
Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)
从表5可以看出,Ⅳ和Ⅴ组空肠绒毛高度极显著高于 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组 (P<0.01),而Ⅲ组空肠绒毛高度也显著高于 Ⅰ和Ⅱ 组 (P<0.01),Ⅰ和Ⅱ 组间差异不显著(P>0.05);Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组空肠隐窝深度小于Ⅰ和Ⅱ 组,但差异不显著(P>0.05);Ⅳ和Ⅴ组V/C值极显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组 (P<0.01),Ⅲ组V/C值也极显著高于Ⅰ和Ⅱ 组 (P<0.01)。
表5黄芩解毒散对番鸭空肠肠道形态的影响
Table5TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderonthejejunummorphologyofmuscovyducks
组别Group绒毛高度Villus heightμm隐窝深度Crypt depthμmV/C值V/C valueⅠ753.46±17.43 C103.45±2.637.28±0.38 CⅡ742.76±19.85 C103.68±3.127.16±0.57 CⅢ862.08±20.26 B101.67±1.358.48±0.23 BⅣ897.68±26.12 A98.28±2.559.13±0.32 AⅤ905.10±23.25 A97.89±3.239.25±0.26 A
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05),同列不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)
Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)
由表6可知,Ⅳ和Ⅴ组回肠绒毛高度极显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P<0.01),而Ⅲ组回肠绒毛高度也显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组回肠隐窝深度小于Ⅰ组和Ⅱ组,但差异不显著(P>0.05);Ⅳ和Ⅴ组V/C值显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P<0.05),而Ⅲ组V/C值也显著高于Ⅰ和Ⅱ 组 (P<0.05)。
表6黄芩解毒散对番鸭回肠肠道形态的影响
Table6TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderontheileummorphologyofmuscovyducks
组别Group绒毛高度Villus heightμm隐窝深度Crypt depthμmV/C值V/C valueⅠ504.30±15.62 cB94.24±2.155.35±0.21 bⅡ508.23±20.72 cB94.73±4.235.37±0.34 bⅢ525.24±16.54 bB92.56±3.655.67±0.56 bⅣ543.99±17.58 aA91.31±4.125.96±0.75 aⅤ548.82±26.67 aA89.75±3.286.11±0.62 a
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05),同列不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)
Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)
2.3黄芩解毒散对番鸭盲肠有害菌数量的影响由表7可知,49日龄, 4个试验组大肠杆菌数量均极显著低于对照组(P<0.01),且Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ组大肠杆菌数量均显著低于Ⅲ组(P<0.05);Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ组沙门氏菌数量均极显著低于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ组沙门氏菌数量显著低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅳ和Ⅴ组乳酸菌数量极显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组 (P<0.01),且Ⅲ组乳酸菌数量也显著高于Ⅰ和 Ⅱ 组 (P<0.05),而 Ⅰ 和 Ⅱ 组差异不显著(P>0.05)。
表7黄芩解毒散对番鸭盲肠微生物菌群的影响
Table7TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderonthececumfloraofmuscovyducks
组别Group大肠杆菌E. coli 沙门氏菌Salmonella sp.乳酸菌Lactobacilli sp.Ⅰ7.32±0.27 aA7.65±0.48 aA7.65±0.19 cBⅡ6.15±0.26 cB6.26±0.34 bB7.89±0.32 cBⅢ6.65±0.18 bB7.13±0.25 bA8.37±0.41 bBⅣ6.28±0.19 cB6.44±0.29 bB9.15±0.37 aAⅤ6.17±0.32 cB6.32±0.16 bB9.36±0.45 aA
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05),同列不同大写字母表示差异显著(P<0.01)
Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)
3.1中草药制剂对家禽生产性能的影响中草药含有的生理活性物质能够有效抑菌,有的甚至能促进营养物质在动物体内的消化与吸收,提高饲料的利用率,加速畜禽的生长发育,提高生产性能等。张桥等[3]将黄芪、肉桂、山楂等中草药添加到基础日粮中,试验组艾维茵肉仔鸡的日增重和育成率较对照组分别提高 15.75%和12.04%(P<0.05),料重比下降 9.57%(P<0.05);于辉等[4]在 0~49 日龄仙湖肉鸭的基础日粮中添加白术、当归等组成的中草药添加剂,研究发现仙湖肉鸭的饲料转化率提高了3.8%;贺永康[5]在肉鸡基础日粮中添加一定比例的中草药添加剂,结果发现1.0%和 1.5%的添加组在 22~42 d取得了较好的 ADG 和 F/G,与对照组相比 ADG分别提高了7.67%(P<0.05)和 13.55%(P<0.05),F/G 降低了 8.48%(P<0.05)和15.25%(P<0.05)。姜贺等[6]将一定比例的黄芪粉、刺五加粉、松针粉添加到基础日粮中,结果发现各试验组平均日增重均高于对照组,其中试验Ⅱ组比对照组提高了16.03%,差异显著(P<0.05);试验Ⅳ组平均采食量比对照组提高了10.44%,各试验组料重比均低于对照组,且随着中草药添加量的增多呈下降趋势。高艳敏等[7]在桂香鸡的基础日粮中添加黄芪、神曲、山楂等中草药制剂,结果发现1.0%中草药组对桂香鸡的增重和饲料增重比的作用比较明显,与空白组相比差异极显著(P<0.01),1.5%中草药组与空白组的料重比差异显著(P<0.05),各组间平均日采食量差异不显著(P>0.05)。该研究在雏番鸭基础日粮中添加一定比例的黄芩解毒散,结果发现0.3%中药添加组(Ⅳ组)和0.4%中药添加组(Ⅴ组)番鸭平均体重、平均日增重和成活率均显著或极显著高于对照组(Ⅰ 组),料重比显著低于对照组(P<0.05),成活率均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P<0.05)。
3.2中草药制剂对家禽肠道健康的影响小肠的正常结构尤其是绒毛高度、隐窝深度以及V/C值等是评价小肠消化吸收功能的重要指标。肠绒毛高度越大,小肠吸收面积就越大;隐窝越浅,消化吸收能力就越强;肠绒毛高度/隐窝越深比值越大,消化吸收功能就越高。王强等[8]在高邮鸭的基础日粮中添加丹参、玄参、杜仲、石斛等中草药饲料添加剂,结果表明0.12%添加组对绒毛高度的影响比对照组高,0.12%和0.14%添加组V/C值高于对照组。贺永康[5]在肉鸡基础日粮中添加一定比例的中草药添加剂,结果发现1.0%和 1.5%的添加组21和 42 d 十二指肠和空肠的绒毛高度以及 V/C值显著提高;1.5%添加组 42 d 十二指肠和空肠的隐窝深度显著降低;42 d 1.5%添加组十二指肠肠绒毛上皮结构完整,层次清晰,肠黏膜上皮的微绒毛纹状缘排列紧密,大小均匀、结构清晰。该试验在雏番鸭的基础日粮中添加一定比例的黄芩解毒散,结果发现其能很好地增长十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度,缩短隐窝深度,提高V/C值,增强了番鸭的消化和吸收能力。
家禽肠道内有多种菌群,主要有大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸杆菌和双歧杆菌等,菌群平衡与家禽腹泻有着密切的关系。于辉等[9]在仙湖肉鸭日粮中添加一定比例的中草药饲料添加剂,结果发现中草药添加组均能显著降低肠道内大肠杆菌菌群的数量,提高乳酸菌菌群的数量, 尤其是以白术、柴胡、当归、大蒜、红辣椒、丹参、生姜等组成的中草药饲料添加剂Ⅰ效果最为明显。张利娟等[10]在蛋鸡日粮中添加黄芪多糖和小檗碱复合制剂,结果发现各处理组盲肠大肠杆菌数量显著或极显著低于对照组,而乳酸杆菌和双歧杆菌的数量显著高于对照组,表明中草药能有效改善肠道微生态区系的平衡提高机体的消化力。该研究结果表明,黄芩解毒散0.03%和0.04%添加组能显著降低盲肠中大肠杆菌和沙门氏菌的数量,极显著增加乳酸菌数量,有利于调节肠道菌群健康。
综上所述,建议在基础日粮中添加0.03%或0.04%的黄芩解毒散,能很好地促进家禽的生长和生产性能,维护肠道健康。