药物水光注射治疗黄褐斑对患者CK10、SOD及MDA表达水平的影响

李卉 胡霜红 王娟

[摘要]目的：探讨药物水光注射治疗黄褐斑的疗效及对患者细胞角蛋白10（Cytokeratin 10，CK10）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）及丙二醛（Malondialdehyde，MDA）表达水平的影响。方法：选取笔者医院2016年5月-2017年5月收治的黄褐斑患者160例，随机分为传统组与药物组，每组80例。传统组采用传统穴位注射法治疗，药物组采用药物水光注射治疗。观察两组患者额部病损皮肤基底上层CK10表达程度、血清SOD、MDA水平并进行比较分析。结果：治疗后，药物组与传统组CK10表达程度明显减弱，药物组明显低于传统组，差异有统计学意义（P<0.05）。药物组与传统组SOD表达水平均显著升高，药物组明显高于传统组，差异有统计学意义（P<0.05）。药物组MDA水平明显低于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）；传统组MDA下降不明显，差异无统计学意义（P>0.05）。药物组总有效率为93.75%显著高于传统组的75.00%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：应用药物水光注射治疗黄褐斑，可降低病损皮肤基底上层CK10表达程度，改善血清SOD和MDA水平，疗效较好。

[关键词]水光注射；黄褐斑；细胞角蛋白10；超氧化物歧化酶；丙二醛

[中图分类号]R758.4+2 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2018）07-0075-03

Abstract： Objective To investigate the effect of drugwater injection in the treatment of chloasma and the effect on the expression level of cytokeratin 10 （Cytokeratin 10， CK10）， superoxide dismutase （Superoxide dismutase， SOD） and malondialdehyde （Malondialdehyde， MDA） in patients. Methods 160 cases of Chloasma in our hospital from May 2016 to May 2017 were randomly divided into the traditional group and the drug group， 80 cases in each group. The traditional group used the traditional acupoint injection，and the drug group with drug water injection. The expression level of CK10，serum SOD and MDA in the upper basal layer of skin onforehead were compared between the drug group and the traditional group. Results After treatment， the expression level of CK10 in the drug group and the traditional group was significantly reduced， and the drug group was significantly lower than that in the traditional group， the differences were statistically significant（P<0.05）. The expression levels of SOD in both the drug group and the traditional group were significantly increased， and the drug group was significantly higher than the traditional group（P<0.05）. The level of MDA in the drug group was significantly lower than that before the treatment（P<0.05）. There was no significant difference in MDA in the traditional group（P>0.05）. The total effective rate in the drug group was 93.75%， which was significantly higher than that in the traditional group（75.00%，P<0.05）. Conclusion The treatment of Chloasma with drug water injection can reduce the expression level of CK10 on the upper basal layer of skin lesions， improve the level of serum SOD and MDA， and improve the curative effect.

Key words： water injection； chloasma； CK10； SOD； MDA

黃褐斑主要表现为黄褐色及淡黄色斑片，主要在两颊和前颊部分，属于获得性色素沉着皮肤病[1]。化妆品使用不当、日晒、精神因素及避孕药等均是黄褐斑的主要诱因，多发于中青年女性。现临床主要通过内服药物、外用脱色剂及光化学手段对黄褐斑进行治疗，尽管治疗效果明显，但由于部分患者存在较强的局部刺激甚至灼伤皮肤，具有较明显的副作用甚至较高的复发率[2-3]。穴位注射以传统经络理论为基础，将已提纯药物注射至经络，对硬皮病、白塞氏综合征等国际疑难病均具有优良效果，与针灸治疗作用机理存在差别[4]。研究[5-6]提示药物水光注射通过特制注射工具吸起皮肤并利用负压将药物注射至靶向部位的疗法，具有并发症少，临床疗效高等特点，但关于黄褐斑的临床研究资料较少。故此，本研究探讨了药物水光注射和穴位注射治疗黄褐斑的疗效及对患者CK10、SOD及MDA表达水平的影响，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料：选取笔者医院2016年5月-2017年5月收治的黄褐斑患者160例，均为女性，随机分为传统组与药物组，每组80例。传统组采用传统穴位注射法治疗，药物组采用药物水光注射治疗。传统组平均年龄（38.73±5.42）岁，平均病程（5.76±1.05）岁；药物组平均年龄（37.25±6.39）岁，平均病程（5.63±0.98）岁。两组患者病程等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 纳入及排除标准[7]

1.2.1 纳入标准：①经皮肤组织病理检测确诊黄褐斑的患者：面部呈淡褐色至深褐色、对称性分布且界限清楚的斑片，无炎症和鳞屑；女性多见，青春期后多发；症状不明显；夏重冬轻有季节性；②近3个月未接受相关治疗者；③患者及家属均知情同意。

1.2.2 排除标准：①血友病患者；②免疫功能低下者；③合并恶性肿瘤、严重脏器功能不全、血液系统疾病者；④妊娠或哺乳期妇女；⑤有认知功能障碍者，如精神病患者。

1.3 治疗方法

1.3.1 穴位注射法：取颧髎、四白为注射点；额部皮损选阳白；太阳穴处皮损则太阳穴为注射点；鼻部皮损选迎香；眉间皮损选印堂；下颏皮损选承浆；可根据皮损可多选或单选。患者平卧碘伏消毒注射穴位3遍后，无菌纱布擦拭，注射器（5ml）抽取复方当归注射液，美容注射用小针头（30G）进行面部穴位注射，每穴0.4ml注射并按压片刻；注射器原配针头注射肝俞、气海、血海、三阴交，每穴0.5ml并按压片刻；1次/周，4个月/疗程，共治疗4个月[8]。

1.3.2 药物水光注射：全脸外敷厚度约3mm的复方利多卡因，保鲜膜包被1h后碘伏消毒3遍，生理盐水溶液冲洗后，水光注射仪套上水光枪头，20%负压，模式为Dose very fast；针长0.6～1.2mm定点给药复方当归注射液2ml；患者仰卧位，负压吸起皮肤，在黄褐斑皮损区域注射，直至皮损区被肿起的小皮丘全覆盖，剩下的药液不重叠从面上部、面中部、面下部依次注射，直至注射完；1次/月，共治疗4个月[9]。

1.4 观察指标及检查方法：SP法检测并比较药物组与传统组患者额部病损皮肤基底上层CK10表达程度：石蜡切片脱蜡水化后室温10min静置；抗原修复；室温10min羊血清封闭，滴加CK10抗体于湿盒中，室温下1h，PBS洗片；滴加二抗，10min室温放置，PBS洗片；滴加链霉菌抗生物素-过氧化物酶，10min室温放置，PBS洗片；DAB显色、苏木素复染及梯度乙醇脱水，封片后显微镜观察[10]。

取患者治疗前后空腹静脉血，离心后分离血清，酶联免疫法检测血清SOD、MDA水平，试剂盒均购于南京建成生物研究所，试验操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.5 评价标准：治愈：色斑消失，面积消退≥90%；显效：色斑消失或变淡，面积消退介于60%～89%；有效：色斑变淡，面积消退介于30%～59%；无效：色斑无明显变化，面积消退≤30%。总有效率=（治愈+显效+有效）例数/总例数×100%。

1.6 统计学分析：应用SPSS 20.0分析处理数据资料，计量资料采用均数±标准差进行统计描述，组间比较采用t检验；等级资料用非参数检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后CK10表达比较：治疗前药物组与传统组CK10比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后药物组与传统组CK10表达程度明显减弱，药物组明显低于传统组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 两组患者治疗前后SOD表达水平比较：治疗前药物组与传统组SOD比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后药物组与传统组SOD表达水平均显著升高，药物组明显高于传统组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3 两组患者治疗前后MDA水平比较：治疗前药物组与传统组MDA水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后药物组MDA水平明显低于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后传统组MDA下降不明显，差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。

2.4 两组患者临床疗效比较：药物组总有效率为93.75%显著高于传统组的75.00%，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。典型病例见图1～4。

3 讨论

黄褐斑属于慢性疾病多为面失所养而成，具体发病机制尚存在分歧，发病机制主要可分为以下两点：①黄褐斑多位于表皮层，主要为表皮黑色素增多[11]；②黄褐斑表皮黑色素存在明显增多[12]。肝脾肾三脏器功能失调致使气血无法尚荣于面是黄褐斑的主要病机，患者多存在肝肾不足、肾水不充及肾阴亏虚进而导致虚火上炎及水火不济等病机，穴位注射技术对多种慢性病均具有满意疗效，但部分患者因治疗次数频繁对正常的工作和生活均造成了一定影响[13]。

研究[14]提示药物水光注射可以对皮肤有效补水，使皮肤更有光泽，有提升紧致、改善细纹的效果；与药物联合作用，可有效改善色斑、痘印、敏感、抗衰等。本次注射过程中使用复方当归注射液（由当归、川芎、红花组成），可有效调畅气机；当归种的壬二酸、阿魏酸可保护膜脂质不受氧化，具有抗脂质过氧化作用并拮抗自由基对组织的损伤，改善血液循环，促进色素吸收[15]。

角蛋白可在细胞内形成网状结构，属于上皮细胞的主要蛋白和结构蛋白，可随细胞分化程度的升高逐渐增加分子量，与多种皮肤病关系密切[16]。本研究结果显示，治疗后药物组与传统组患者CK10水平明显减弱，药物组减弱更明显。上述结果说明药物水光注射治疗黄褐斑，可更有效地降低病损皮肤基底上层CK10表达程度。研究发现黑色素颗粒的转运和合成可受到多种蛋白的调节影響，其由角质细胞分化后逐渐排出体外，药物水光注射复方当归注射液中的当归、川芎、红花合用具有活血通经、祛瘀止痛、调理生机的作用；能够降低CK10表达，降低皮肤的分化程度和细胞代谢速率，进而延缓皮肤老化。

相关研究[17]提示黄褐斑患者MDA水平较高，SOD水平降低，这提示黄褐斑患者存在强烈的过氧化反应，这可能是加重黄褐斑病情的重要因素。MDA具有显著细胞毒性，属于脂质过氧化终产物，可准确反映机体的自由基损伤程度；SOD能显著抑制机体氧自由基活性、减轻氧化应激损伤进而消除新陈代谢的有害物质。本研究结果显示治疗后两组患者的SOD水平显著升高，药物组明显高于传统组；药物组MDA水平明显降低，传统组MDA水平下降不明显。复方当归注射液中的川芎嗪能明显升高SOD活性，降低黄褐斑患者过氧化脂质（LPO）含量，对治疗黄褐斑临床实用价值较高，川芎嗪在50～400ng/ml较低的相对安全浓度可有效降低酪氨酸酶活性，抑制黑素细胞增殖，进而减少黑素合成。水光注射将药物注射于中胚层，可以帮助滋养肌表腠理，改善局部皮肤的血供营养情况，淡化色斑，故而对黄褐斑的治疗效果更好。

综上所述，药物水光注射治疗黄褐斑，可降低病损皮肤基底上层CK10表达程度，改善血清SOD和MDA水平，提高治疗效果。

[参考文献]

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[收稿日期]2018-04-25 [修回日期]2018-06-07

编辑/朱婉蓉