绵羊不同途径免疫S2株、Rev.1布鲁氏菌病活疫苗后抗体消长规律

张洪军，王会敏，张秀丽，李秀慧，赵晓光，刘国臣，王佩琪，路广计

（1.河北省承德市围场满族蒙古族自治县动物疫病预防控制中心，承德 068450；2.河北省动物疫病预防控制中心，石家庄 068450）

0 引言

布鲁氏菌病是一种世界性的人畜共患病，对经济和公共健康都有重大影响。牛、羊感染流产布鲁氏菌和羊种布鲁氏菌，是人类疾病的共同来源，该病主要危害人畜生殖系统，人与人之间几乎不传播，患病动物是主要的传染源，其中病羊感染人的比例较高。目前疫苗免疫是布鲁氏菌病防控的重要手段之一，尤其布鲁氏菌病高发地区。我国在《国家布鲁氏菌病防治计划 （2016—2020年）》中明确提出一类地区对羊采取全面免疫措施。

我国羊使用的布鲁氏菌病疫苗主要有Rev.1羊种和S2猪种。羊种Rev.1是应用最广泛的羊种布病活疫苗，可对羊实施有效的免疫[1]。猪种的S2株弱毒疫苗具有良好的免疫效果，但目前仍无法判断区分野毒及接种疫苗产生的抗体，主要从抗体在体内存续时间的长短判断，存续时间短的是疫苗免疫，时间长的为野毒感染[2]。M5菌株是一株由我国从羊种布鲁氏菌中分离并自行培育致弱的菌株，对牛、羊均可产生较好的免疫力[3]。由于该菌株毒力较强且存在毒力返强的风险，同时因其对妊娠动物有毒力增强的现象，更不能用于怀孕羊，目前市场已经不进行生产销售[4]。

1 试验材料

1.1 样品

琥红平板凝集试验和试管凝集试验结果均为：阴性的健康羊血清样品212份，采自河北省境内某地区规模化养殖场，均免疫过布病疫苗S2株，但已超过18个月。

1.2 试剂

布病阴性羊40只（20只/组），猪种布鲁氏菌S2弱毒疫苗（中牧）、Rev.1疫苗（国外小量购进）。

2 试验方法

使用布鲁氏菌S2疫苗以口服方式对羊进行免疫，使用Rev.1疫苗以滴眼方式对羊进行免疫，免疫后分别在特定时间点使用虎红平板凝集试验（RBT）和试管凝集试验（SAT）对羊群抗体阳性率进行监测[5]。

3 结果与分析

应用RBT及SAT试验方法检测羊免疫后在第14、21、28、58、90、122天的血清40份，免疫后不同天数布病特异性抗体检出率见图1、图2。

3.1 S2口服免疫羊群后抗体消长规律

S2口服免疫羊群后，抗体阳性率在免疫后21 d内持续升高，随后下降，并在122 d后降到10%以下（图1）。

图1 S2疫苗口服免疫羊群抗体消长规律

3.2 Rev.1滴眼免疫羊群抗体消长规律

Rev.1疫苗滴眼免疫羊群后，抗体阳性率在免疫后14 d内持续升至100%，免疫后28 d开始下降，免疫后122 d抗体阳性率降至10%以下（图2）。

图2 Rev.1疫苗滴眼免疫羊群抗体消长规律

4 讨论

从检测方法上分析，RBT同时期检测S2免疫羊与Rev.1免疫羊，14 d时Rev.1抗体阳性率达到最高（Rev.1为100%，S2为65%）。S2免疫抗体阳性率继续小幅上升，直到21 d时达到最高值70%，此时Rev.1免疫抗体阳性率依然保持100%。随着时间的推移，S2免疫抗体阳性率开始急速下降，约58 d时免疫抗体阳性率减半（35%），而Rev.1免疫抗体阳性率一直到28 d时才出现下降趋势，并在90 d时减半（50%），此时Rev.1免疫抗体阳性率仍然大于S2的免疫抗体阳性率。而两者均在122 d时免疫抗体阳性率达到20%。

SAT同时检测S2免疫羊与Rev.1免疫羊，S2与Rev.1同在14 d检测到最高的抗体阳性率（Rev.1为100%，S2为70%）。S2最高的抗体阳性率一直持续到21 d，而Rev.1最高的抗体阳性率一直持续到28 d。S2仍在58 d免疫抗体阳性率减半（35%），Rev.1在90 d时减半（50%）。122 d时免疫抗体阳性率降至10%以下。

通过对两种检测方法比较发现，SAT检测S2与Rev.1时，14 d均能检测到最高阳性率，之后抗体阳性率均下降，RBT检测和SAT检测比较无太大差别，结合操作方法分析，RBT检测方法更简单、快速。

通过对S2株免疫与Rev.1免疫后的免疫效果比较发现，Rev.1的免疫效果高于S2，14 d时抗体阳性率100%，S2仅为70%。Rev.1抗体阳性率100%持续到28 d，而S2仅持续到21 d。122 d时，两者抗体阳性率均降至10%以下。因此Rev.1可作为绵羊布病免疫的首选疫苗。

5 结论

大规模进行羊布鲁氏菌病的免疫宜采用Rev.1滴眼方式进行，而筛选宜采用RBT检测的方式。