联合检测标志物在糖尿病肾病早期肾损伤诊断中的临床价值

郝玉婷 林洁 秦杰

(1.首都医科大学附属北京康复医院检验科，北京 100144;2.北京大学医学部医院检验科，北京 100191;3.首都医科大学附属北京中医医院检验科，北京 100010)

糖尿病肾病是糖尿病患者中最为常见的一种微血管并发症，若不能得到及时控制，更容易出现慢性肾功能衰竭，对患者的生活质量产生非常大的影响[1-2]。因为糖尿病患者长时间的肾小球内高滤过、高灌注对肾脏造成较大的损害，糖尿病早期易发生肾小动脉硬化，其典型的表现就是出现大量蛋白尿[3-4]。若在早期得不到较好治疗，临床出现蛋白尿时疾病就会比较严重，因此，对于糖尿病肾病患者应尽早发现尽早治疗。而传统的诊断方法不能准确的显示糖尿病肾病患者的具体情况，造成患者得不到有效治疗，并造成患者病情加重，危害身体健康。相关研究发现，采用mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG联合检测的诊断方法灵敏度极高，极大提高了早期肾损伤诊断的准确性，使得患者能够得到及时有效的治疗[5]。本文探讨mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG联合检测在糖尿病肾病早期肾损伤诊断中的临床价值，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取2016年6月～2018年6月在我院治疗的500例糖尿病肾病患者作为研究组，选取500例健康人作为对照组，研究组500例患者中男253例，女247例，年龄44～78岁，平均(63.29±1.27)岁，病程4～19年，平均病程(8.9±1.7)年；对照组500例被检测者中男242例，258例，年龄47～81岁，平均(64.23±1.31)岁。纳入标准：被确诊为患有糖尿病肾病的患者；自愿参与本研究，并同意对其进行随访。糖尿病诊断符合2017年美国糖尿病协会(ADA)诊断标准。排除标准：有精神病史、风湿、类风湿性关节炎病史；肝脏功能不正常的患者；一个月之内有感染病史；对ARB、ACEI过敏、不能承受使用血管紧张素受体拮抗剂后产生的不良反应(皮疹、咳嗽等)、妊娠、低血压、高钾血症、合并有其他疾病且较为严重；理解能力存在严重障碍或依从性差的患者；患者因其他原因出现中断治疗情况视为无效。患者均知情同意本研究，两组的年龄、性别、病程等一般差异无统计学意义，具有可比性(P>0.05)。本研究通过医院伦理委员会批准。

1.2 方法 首先在收集尿液之前，患者禁食，随机收集住院患者晨尿，收集门诊患者的任意时间的尿液，将尿液用特定仪器收集，对收集的尿液进行离心，3000r/rain，离心时间为10min,取尿液上清液，在4h之内完成对尿液的检测[3]。NAG指标的检验使用终点法，而TF、MALB、β2-MG指标的检验使用胶乳增强免疫比浊方法。测定尿肌酐的测定使用Jaffe’s速率法进行测定。测定结果使用TF/Cr、NALB/Cr、&一MG/Cr、NAG/Cr进行表示。使用雅培C16000生化分析仪(由美国雅培ABBOTT公司制造)a1MG和NAG试剂(由北京利德曼生化股份有限公司制造)；NAG、U肌酐试剂(由美国雅培ABBOTT公司制造)微量白蛋白和B2微球蛋白试剂(由上海盈科医学生物技术有限公司制造)。

1.3 观察指标 对采集尿液的上清液进行检测，观察并记录两组尿液的UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值以及mALB、UCr、β2-MG、NAG单项指标的阳性率，mALB+UCr和β2-MG+NAG两项指标双向检验的阳性率以及采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五项指标联合检验的阳性率。记录血清肌酐该种指标的阳性率，采用尿素氮该种指标的阳性率以及采用内生肌酐该种指标的阳性率。

1.4 统计学分析 数据应用SPSS18.0进行分析，其中计数进行2检验，计量进行t检测，计数资料采用均数±标准差表示， 以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值对比 研究组UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组UCr/Cr、MALB/Cr、β2-MG/Cr、NAG/C比值的对比Table 1 Comparison of UCr/Cr, MALB/Cr, iso2 MG/Cr, NAG/C ratio between the study group and the control group

2.2 各项指标及联合指标的阳性例数及阳性率 使用mALB、UCr、β2-MG、NAG单项指标的阳性率要明显低于采用mALB+UCr和β2-MG+NAG两项指标双向检验的阳性率(P<0.05)；采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五项指标联合检验的阳性率要明显高于使用mALB、UCr、β2-MG、NAG单项指标的阳性率和采用mALB+UCr和β2-MG+NAG两项指标双向检验的阳性率(P<0.05)，见表2。

表2各项指标及联合指标的阳性例数及阳性率

Table2Thenumberofpositivecasesandpositiveratesofallindicatorsandcombinedindicators

项目标本数阳性数阳性率(×10-2)UCr1007070.0MALB1005151.0β2一MG1006969.0NAG1005454.0mALB+UCr1007979.0β2-MG+NAG1008282.0mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG1009393.0t/11.54214.526P/<0.05<0.05

2.3 联合指标和血清肌酐指标的阳性例数及阳性率 采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五项指标联合检验的阳性率要明显高于采用血清肌酐该种指标的阳性率(P<0.05)，见表3。

表3联合指标和血清肌酐指标的阳性例数及阳性率

Table3Thenumberofpositivecasesandpositiveratesofcombinedindicatorsandserumcreatinineindexes

项目标本数阳性数阳性率(×10-2)血清肌酐1007070.0mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG1009393.0t/14.54216.525P/<0.05<0.05

2.4 联合指标和尿素氮指标的阳性例数及阳性率 采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五项指标联合检验的阳性率要明显高于尿素氮指标的阳性率(P<0.05)，见表4。

表4联合指标和尿素氮指标的阳性例数及阳性率

Table4Numberofpositivecasesandpositiveratesofcombinedindicatorsandureanitrogenindicators

项目标本数阳性数阳性率(×10-2)尿素氮1005252.0mALB+UCr+β2-MG+NAG1009393.0t/13.54214.547P/<0.05<0.05

2.5 联合指标和内生肌酐指标的阳性例数及阳性率 采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五项指标联合检验的阳性率要明显高于采用内生肌酐该种指标的阳性率(P<0.05)，见表5。

表5联合指标和内生肌酐指标的阳性例数及阳性率

Table5Thenumberofpositivecasesandpositiveratesofcombinedindicatorsandendogenouscreatinineindexes

项目标本数阳性数阳性率(×10-2)内生肌酐1004545.0mALB+UCr+β2-MG+NAG1009393.0t/11.54416.537P/<0.05<0.05

3 讨论

糖尿病肾病是糖尿病的并发症之一。该病是糖尿病较为严重的微血管并发症，治疗比较困难，是糖尿病患者致残致死的重要原因之一[6-8]。肾脏损害的早期表现为微量蛋白尿，可用于指导治疗及判断患者预后情况。半数以上患者的尿蛋白经过早期的干预可以恢复正常[9-11]。故对糖尿病肾病患者早发现、早治疗成为研究的热点。糖尿病肾病患者病情加重时会出现肌酐升高、钾升高、干咳等症状，严重危害患者身体健康，为患者的家庭带来了沉重的经济和精神负担[12-14]。针对该种病症，要尽早发现尽早治疗，防止造成生命危险。

正常肾小球的毛细血管的基底膜具有滤过功能，平均孔径的大小不超过6nm，在它的表面带有负电荷，滤过压、肾小球毛细血管基底膜的电荷状态以及蛋白质分子的大小状态都会影响到血液中微量蛋白的漏出[15-16]。IF分子和微量白蛋白分子两者均带负电荷，在健康人群中，这两种小分子的蛋白几乎不能透过肾小球的基底膜，这两种小分子经过滤过后，会被近曲肾小管重新吸收[17]。但是当糖尿病肾损伤时，肾小球的基底膜的硫酸肝素的合成会相对的减少，肾小球的滤膜上的电荷会丢失，进而破坏孔径大小的选择功能。而且患者血液中的高浓度的葡萄糖会造成非酶糖酰化的速率增加，进而造成基底膜的屏障功能发生改变，阻碍肾小球血管的调节功能，最终导致肾血流动力学发生改变，最终肾小球长期处于高滤过的状态，进而造成患者肾部出现损伤现象。mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG的含量可以准确的反应糖尿病肾病患者的身体指标的变化，适用于糖尿病肾病早期的诊断。使用mALB、UCr、β2-MG、NAG单项指标的阳性率要明显低于采用mALB+UCr和β2-MG+NAG两项指标双向检验的阳性率，采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五项指标联合检验的阳性率要明显高于使用mALB、UCr、β2-MG、NAG单项指标的阳性率和采用mALB+UCr和β2-MG+NAG两项指标双向检验的阳性率。并且TF的敏感性要高于MALBE的敏感性[17]。NAG是一种高分子的糖蛋白，该种分子主要存在于近曲肾小管的上皮细胞中，一旦身体中NAG分子的释放量过高，活性增高，则证明肾小管出现了坏死和变形，可以准确的反应肾小管实质细胞的损伤情况[18]。在血液循环中，β2-MG可以自由通过肾小球的滤膜，该种分子主要通过胞饮的形式进行摄取，当肾小管的上皮细胞出现损伤时，肾小管对该种分子的重吸收的能力就会相对减弱，进而在尿液中的含量就会大大增加[19]。该种分子也可以准确反映患者肾部的损伤情况，作为糖尿病肾病患者早期诊断的重要指标。

NAG和尿微量蛋白的联合检测可以极大的提高检验的阳性率，提高早期诊断的灵敏度。而采用mALB+UCr+β2-MG+NAG+α-MG五项指标联合检验的阳性率时所有指标检验中阳性率最高的，阳性率高达93%。对比fi2+MG+NAG和rIF+MALB两种检验的阳性率，fi2+MG+NAG的阳性率要明显高于rIF+MALB的阳性率，这也就说明了肾小管的损伤出现的时间要比肾小球损伤出现的时间要早[20-21]。并且NAG和尿微量蛋白联合检测方法采样方便，操作简单快捷，并且不会在身体上残留创口。传统的实验室诊断方法不能准确快速的反应糖尿病肾病患者的肾部损伤情况，并且操作复杂。故联合检测方法值得在早期诊断中进一步推广和应用。

4 结论

mALB、UCr、α-MG、β2-MG、NAG联合检测可以灵敏地测得糖尿病肾病患者的身体变化，使患者尽早得到治疗，肾小管比肾小球的损伤出现的时间要早，值得临床医师在早期诊断中借鉴。