林问荆和蔓乌头提取液对菜粉蝶幼虫杀虫效果比较

王一桐，李虹，王建楠，解琦,2，贾冬雪，王鹤璇，罗志文,2*

(1.佳木斯大学生命科学学院，黑龙江 佳木斯 154007;2.佳木斯大学应用昆虫研究所，黑龙江 佳木斯 154007)

林问荆(Eguisetumsylvalicum)为木贼科(Equisetaceae)问荆属植物，是我国小兴安岭田间最常见的药用植物[1]。问荆的茎叶提取物有清热利尿，止血，平肝明目，止咳平喘的作用，在农业上还有杀虫和抑菌的功效，利用林问荆的毒性可提取配制植物源杀虫剂，推广进行农业蔬菜害虫的生物防治，还可对部分病害等有较强的抑菌作用。蔓乌头(Aconitumvolubile)为毛茛科(Ranunculaceae)乌头属植物[2]，也是我国小兴安岭林区常见的野生有毒药用植物。蔓乌头的根提取物具祛风、散寒、止痛、止痉，主治风寒湿痹，关节疼痛和神经痛等功效，在农业上也有杀虫作用，将林问荆的根提取制成植物源杀虫剂，进行农业蔬菜害虫的生物防治试验，为北方蔬菜的无公害生产提供技术支持。

菜粉蝶(Pierisrapae)，幼虫被称为菜青虫，属鳞翅目(Lepidoptera)粉蝶科(Pieridae)菜粉蝶属昆虫[3]，广泛分布于我国全省各地。菜粉蝶主要以十字花科植物为食，寄主还包括菊科、旋花科等植物上。十字花科的蔬菜以甘蓝、芥蓝、花椰菜等受害严重。菜粉蝶的成虫为虹吸式器，不危害蔬菜，而其幼虫主要危害蔬菜的叶片，危害时会使蔬菜的叶片破损，用农药对菜粉蝶进行化学防治，会对人类的健康不利，还会产生严重的空气污染[4-6]，而研发并推广植物源杀虫剂，可以无公害防治菜青虫[7-10]，从而培养绿色有机蔬菜。

作者利用植物野外实习和当地植物调查的机会，选择分布在小兴安岭的野生药用植物林问荆、蔓乌头作为供试材料，采用不同溶剂进行提取物筛选试验，并运用提取物进行菜粉蝶的三龄幼虫的杀虫效果对比试验，以期为当地的蔬菜无公害生产提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试材料林问荆采自佳木斯市双拥公园，蔓乌头采自鹤岗市鹤北林业局曙光林场，经植物教研室程海涛副教授鉴定为林问荆(Eguisetumsylvalicum)和蔓乌头(Aconitumvolubile)。菜粉蝶三龄幼虫由佳木斯大学应用昆虫研究所罗志文副教授鉴定为菜粉蝶(Pierisrapae)，供试菜粉蝶幼虫采自佳木斯市向阳区和平大队农田中。

1.2 方法

1.2.1 两种植物提取液的制备。将采集到的林问荆、蔓乌头分别经50℃鼓风干燥箱烘干，采用超细中药粉碎机粉碎成粉末，过60目筛备用。分别称取样品50g，采用70%乙醇、50%丙酮和蒸馏水进行提取，提取温度为室温25℃，旋转蒸发2次，每次4h，将滤液合并备用，用旋转蒸发仪浓缩至50mL，得到植物提取液的母液，经孔径为0.22μm的无菌滤器过滤除菌，置于4℃冰箱内冷藏备用。

1.2.2 两种植物提取液的药效试验。将无菌培养皿在超净工作台内平均分为3组，每组18个，无菌试管分为9组，每组6支，并分别加入对应提取液。每组试管提取液的浓度分别为无菌水，10%，20%，30%，50%，100%不同方法提取的林问荆、蔓乌头提取液。浸白菜叶片各50g，分别移入菜粉蝶三龄幼虫各10头，每个样品处理重复2次，水为对照组，分别放入无菌培养皿中进行饲养试验。经12h、24h、36h后观察试验结果，观察幼虫的生长情况，每日要观察3～4次。

菜粉蝶对植物提取液的药性测定。将材料培养12h、24h、36h后，以菜粉蝶不同时期幼虫生长状态，来测定提取液对菜粉蝶幼虫杀虫效果。对照组是以白菜地的菜粉蝶幼虫作为对照组，观察自然状态下的菜粉蝶的发育形态和生活史情况，并与室内饲养进行对比。

2 结果与分析

2.1 不同溶剂提取物的杀虫效果

由表1可以看，采用3种不同提取方法得到的林问荆提取液，对菜粉蝶三龄幼虫有一定的杀虫作用，由数据可以看出，提取液的杀虫作用与提取液的浓度直接相关。由表2可以看，采用3种不同提取方法得到的蔓乌头提取液，对菜粉蝶三龄幼虫有较强的杀虫作用，由数据可以看出，提取液的杀虫作用与提取液的浓度也直接相关。采用不同提取方法获得的提取物以70%乙醇提取物的抑菌作用最好，50%丙酮提取物效果次之，而沸水提取物抑菌效果最差。

2.2 同一提取方法的杀虫效果对比

为了对比林问荆、蔓乌头两种植物的杀虫效果，作者以70%的乙醇对林问荆茎叶、蔓乌头荆根分别进行提取，并进行3次杀虫试验，取其平均值。结果说明，蔓乌头根提取液的杀虫作用最强，70%乙醇的蔓乌头提取液的杀虫效果最好，通过计算得出最低杀虫浓度(MIC)为0.46g/mL。

2.3 菜粉蝶幼虫不同龄期的杀虫效果

表1 林问荆茎叶提取液的杀虫效果对比

表2 蔓乌头根提取液的杀虫效果对比

表3 70%乙醇的林问荆、蔓乌头提取液的杀虫效果比较

通过试验来对比70%乙醇的林问荆、蔓乌头提取液30%浓度对菜粉蝶一龄、二龄、三龄幼虫的杀虫效果，结果如图1所示。试验结果得出，三龄以前的菜粉蝶幼虫杀虫效果明显，我们建议在菜粉蝶幼虫防治时，一定要在三龄幼虫以前进行。

3 讨论与结论

试验结果可以看出，林问荆茎叶、蔓乌头根的沸水提取液、乙醇提取液、丙酮提取液均对菜粉蝶幼虫有不同程度的杀虫效果，说明林问荆、蔓乌头均是一种作用良好的杀虫植物，可用于研制开发植物杀虫剂。不同提取溶剂的杀虫效果对比结果显示，采用70%乙醇提取液提取效果最佳，对比林问荆、蔓乌头对不同龄期菜粉蝶幼虫的杀虫效果，可以发现蔓乌头提取物对上述菜粉蝶幼虫的防治明显效果好于林问荆提取物。

图1 林问荆和蔓乌头对不同龄期菜粉蝶的杀虫效果对比

本试验方法是将药液浸到白菜叶片上，并将接虫后的叶片置于培养皿中央培养，通过观察菜粉蝶幼虫的生长来研究林问荆、蔓乌头对菜粉蝶的杀虫效果，具有稳定性可靠和定量性好等优点。本试验采用此法判断防治菜粉蝶效果为最适杀虫浓度，其结果可推广用于蔬菜上的菜粉蝶幼虫的生物防治中。