北京市顺义区370份腹泻病例中弯曲菌监测结果

王彦波 李颖 李湛

弯曲菌病是全球范围内胃肠炎的主要病因, 能引起散发性和地方流行性胃肠炎暴发, 也是全球广泛流行的人兽共患病原菌。在一些发达国家监测中，弯曲菌在腹泻病原谱中的构成甚至超过沙门菌、志贺菌等传统病原排在首位[1]。随着我国经济的发展和国民生活模式的改变,弯曲菌感染监测工作逐步受到重视[2]，尤其在中国疾病预防控制中心(CDC)推广加强过滤法分离弯曲菌法后，弯曲菌检测难点得到突破。北京市顺义区CDC从2016年5月开始使用加强过滤法在腹泻病例中进行弯曲菌病原学监测，弯曲菌检测工作对掌握顺义区弯曲菌感染状况及流行变化趋势，完善疾病监测网络具有重要意义，现将2016年5月-2017年4月间检测结果报道如下。

1 材料与方法

1.1标本采集 标本采集自顺义区2家哨点医院肠道门诊腹泻病例粪便标本，病例定义为以腹泻为主要症状的病例，每日排便3次及以上，且粪便性状异常(稀便、水样便、粘液便或脓血便)等。样本采集24 h内送至区CDC进行病原学检测。2016年5月-2017年4月共采集腹泻病例粪便标本370份。

1.2细菌分离与鉴定 弯曲菌培养使用加强过滤法进行分离培养[3]，检测试剂耗材采购自青岛中创生物制品公司。少许腹泻病例粪便加入促生长因子增菌液微需氧培养18 h；然后将增菌液滴加在铺有0.45 μm直径滤膜的karmali平板和哥伦比亚血平板上，风干40 min，使菌液自然滤过，微需氧培养48 h；挑取平板上可疑菌落转种karmali平板培养48 h后进行生化鉴定。

1.3仪器与试剂 VITEK 2 COMPACT 微生物鉴定系统、NH(弯曲菌鉴定卡)鉴定卡购自法国梅里埃公司；空肠弯曲菌培养检测试剂盒购自青岛中创生物科技有限公司；弯曲菌生化检测试剂盒购自青岛中创生物科技有限公司；哥伦比亚血琼脂平板和karmali培养基购自OXOID公司。

1.4统计学方法 使用Excel 2010对数据进行处理。

2 结果

2.1弯曲菌检出季节分布 腹泻粪便标本中弯曲菌阳性检出率7.03%(26/370)，26株弯曲菌中空肠弯曲菌构成比为92.31%(24/26),结肠弯曲菌2株(2/26，表1和图1)。

表1 各月份弯曲菌检出情况

注：春季(2016年5月、2017年3-4月)，夏季(2016年6-8月)，秋季(2016年9-11月)，冬季(2016年12月-2017年2月)。图1 4 个季节弯曲菌检出率分布

2.2患者年龄与性别分布 26例弯曲菌检测阳性的病例中，男性19例，女性7例； 15～40岁患者16例，41～60岁患者4例，61～87岁患者6例。

2.3患者职业分布 弯曲菌检出阳性病例中，职业分布占据前三位的分别是家务及待业人员5名，构成比为19.23%，农民和工人3名，构成比为11.54%，离退人员、干部职员及餐饮服务人员各2名，构成比均为7.69%。

2.4临床症状分布 26例弯曲菌感染病例中，17例被诊断为急性胃肠炎，5例诊断为感染性腹泻，4例诊断为细菌性痢疾；其中3例病例有基础病，2例为糖尿病，1例为冠心病；26例病例各临床症状出现的频数为，腹泻26例，腹痛17例，脱水12例，发热8例，呕吐2例。

2.5可疑食品分布及暴露史情况 弯曲菌检测阳性病例主诉可疑食品包括蔬菜及水果、肉与肉制品、饮料、粮食及其制品等；可疑就餐地点包括家庭自制和在外就餐；可疑食品加工及包装方式包括家庭自制、定型包装、散装、餐饮服务业现场加工等(表2)。

表2 弯曲菌感染病例暴露史情况

3 讨论

3.1弯曲菌培养条件苛刻，菌落小，无特异识别特征，分离培养中极易被杂菌遮蔽，并且随着变形杆菌等肠杆菌科细菌耐药性的加剧，传统基于抗生素抑制遮蔽菌的分离方法逐渐失去了分离弯曲菌的作用，因此自2000年后中国腹泻病例中有关弯曲菌的研究几乎处于停滞状态，弯曲菌在全国病原谱中的构成比极低[4-6]。2016年顺义区CDC在日常监测中运用加强过滤法分离弯曲菌获得了较高弯曲菌阳性检出率，证明加强过滤法在腹泻病例中分离弯曲菌具有较高的可行性。此次监测结果显示，弯曲菌也是构成顺义区腹泻病例病原谱的重要病原菌。

3.2监测结果显示，弯曲菌一年四季中流行强度无明显变化，与沙门菌、副溶血弧菌、致泻大肠埃希菌流行强度随季节变化显著有一定区别[7-10]。特别是在冬季，弯曲菌检出率达到8.00%，说明在冬季腹泻病例监测中除关注病毒性腹泻外还要高度关注弯曲菌造成的腹泻。监测结果还显示，夏季弯曲菌反而呈现相对较低的流行强度，这可能与这一时段沙门菌、副溶血弧菌等病原高强度流行影响监测敏感性有一定关联。其次，15～40岁青壮年是感染弯曲菌的重要群体，应该与这一年龄组社会活动频繁有一定关联。而患者的职业分布较为分散，说明弯曲菌对所有人群均具有较高的感染机率，所有职业人群都应关注这一病原的感染，特别是26个病例中有2例餐饮服务人员，这一人群对食源性感染传播可造成巨大风险，值得关注。最后，从临床症状分析看出，弯曲菌与沙门菌、志贺菌等侵袭性致病菌产生的临床症状较为类似，所以病例大多诊断为急性胃肠炎，其中26个病例中有4例被诊断为细菌性痢疾，提示细菌性痢疾在临床诊断上的误区，除了志贺菌感染，弯曲菌也是造成痢疾样症状感染的重要病原；26个病例中有8例出现了发热，而呕吐仅出现2例，说明弯曲菌与蜡样芽胞杆菌、副溶血弧菌、产气荚膜梭菌等引起中毒型症状的病原有区别。

3.3从可疑食品和暴露史看出，蔬菜水果在可疑食品中占有一定比重。虽然弯曲菌是重要的人畜共患病原[11-14]，禽类和牲畜类动物中普遍存在，但因为中国人没有生食肉的习惯，所以肉及其制品在病例主诉的可疑食品中构成比不高。蔬菜水果在可疑食品构成比占到第一位，说明蔬菜水果与弯曲菌污染的生肉制品存在交叉污染，而生食水果蔬菜间接导致人感染弯曲菌。26例弯曲菌感染患者中24例都主诉由家庭感染为主，说明家庭在日常加工、储存食品的不科学方式是导致弯曲菌感染的重要原因，集中餐饮场所反而不是弯曲菌感染的重要场所。

此次选取哨点医院为两家成人医院，因此未覆盖儿童病例，为更加全面了解弯曲菌感染状况，建立和完善弯曲菌监测体系应成为将来腹泻监测的重要内容。