原发性干燥综合征患者外周血及唇腺组织中Bcl-6、Blimp-1、IL-21表达水平及临床意义

王舒婷

（四川省乐山市人民医院 四川 乐山 614000）

干燥综合征为目前临床上较为常见的一种自身免疫性疾病，具体分为原发性开燥综合征和继发性干燥综合征。原发性干燥综合征的主要临床表现为口、眼干燥，并可累及肾、肺、神经系统、消化系统等多个系统，进而引起患者全身器官受累[1]。据相关资料显示，皮肤表现被认为是原发性干燥综合征最具特征性的腺外表现之一，患者皮肤干燥，严重者常伴瘙痒，并因搔抓导致外伤。由于反复搔抓刺激，局部组织肥厚，色素沉着而出现苔藓化，还可出现高球蛋白血症性紫癜样皮疹，其本质为局部血管炎[2]。肺间质纤维化是原发性干燥综合征合并肺损害最多见的类型，原发性干燥综合征肺动脉髙压的发生常与雷诺现象及肺间质病变存在相关[3]。大量病例资料显示，原发性干燥综合征近年来发病率存在上升趋势，当疾病控制欠佳发展至较为严重时，已成为一个严重影响居民健康和生活质量的公共卫生问题[4]。有学者提出，Bcl-6、Blimp-1、IL-21可能参与了原发性干燥综合征的发病机制。Bcl-6、Blimp-1、IL-21与唇腺组织中淋巴细胞的浸润程度有关[5]。为了探讨原发性干燥综合征患者外周血及唇腺组织中Bcl-6、Blimp-1、IL-21表达水平及临床意义，本文观察了在我院就诊的42例原发性干燥综合征患者的基本资料，现将结果报告如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

随机选取2016年1月至2016年12月在我院就诊的48例原发性干燥综合征患者作为研究对象（观察组），同期选取42例正常唇腺组织患者的正常唇腺组织（颌面部等外科疾病）作为对照组。对照组：男性22例，女性20例；年龄为20～70岁，平均年龄为（54.06±6.75）岁；观察组：男性25例，女性23例；年龄为21～72岁，平均年龄为（55.14±6.63）岁。纳入标准：（1）符合原发性干燥综合征的临床诊断标准[6]；（2）临床资料真实且完整；（3）患者及其家属均知情本研究并签署知情同意书。排除标准：（1）存在精神障碍者；（2）参加其他研究者；（3）患者及其家属自愿退出研究者。

1.2 方法

（1）所有患者均在清晨空腹状态下抽取静脉血2ml，进行离心后将其保存在冰箱中等待备用。采用酶联免疫方法定性的测定受试患者白介素21（IL-21）水平；（2）将石蜡包埋的组织切片后脱蜡，将其避光封闭15min后进行液洗。将切片浸泡在枸橼酸盐修复液微波修复5～10min，温度保持在40～80℃，当切片自然冷却后在此进行液洗，并将其放置冰箱30min后依次添加一抗（抗Bcl-6/Blimp-1）、生物素化第二抗体、辣根酶标记链霉卵白素工作液。使用二氨基联苯胺显色，并在镜下观察。最后使用苏木素复染，进行脱水、清洗、中性树胶封片。

1.3 观察指标

（1）免疫组化结果判定标准：检测Bcl-6时，胞核为淡黄色至棕褐色者为阳性标志，检测Blimp-1时，胞核为淡黄色至棕褐色者为阳性标志。按照阳性细胞数目比例分为5个等级，以0～4分计分，并根据染色强度将其分为淡黄色、棕黄色以及棕褐色，分别代表弱、中、强，以1～3分计分。（2）观察两组患者Bcl-6、Blimp-1水平；（3）观察Bcl-6、Blimp-1在观察组不同病理级别中的表达；（4）观察Bcl-6、Blimp-1在不同脏器损害的观察组唇腺组织中的表达；（5）观察比较两组患者血清IL-21的表达水平；（6）观察比较IL-21在观察组不同病理级别中表达水平。

1.4 统计方法

本研究数据均采用SPSS18.0软件进行统计分析，正态分布的计量资料采用平均数±标准差（±s）描述，采用t进行检验；计数资料通过率或构成比描述，并采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 两组患者Bcl-6、Blimp-1的比较

两组患者在Bcl-6以及Blimp-1的比较上存在差异具有统计学意义（P＜0.05），详见表1。

表1 两组患者Bcl-6/Blimp-1的比较

2.2 Bcl-6、Blimp-1在观察组不同病理级别中的表达

两组患者将观察组按淋巴细胞浸润清理分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个等级，经统计学分析两组患者4个等级间差异有统计学意义（P＜0.05），详见表2。Blimp-1蛋白的表达与病理分级呈正相关（rs=0.629，P＜0.001）。

表2 Bcl-6、Blimp-1在观察组不同病理级别中的表达

2.3 Bcl-6、Blimp-1在不同脏器损害的观察组唇腺组织中的表达

肾小管酸中毒、血液系统受累、周围神经病变、肺间质纤维化及无系统损害五组间Bcl-6、Blimp-1蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05），详见表3。

表3 Bcl-6、Blimp-1在不同脏器损害的观察组唇腺组织中的表达

2.4 两组患者血清IL-21的表达水平

两组患者血清IL-21表达水平比较差异具有统计学意义（P＜0.05），详见表4。

表4 两组患者血清IL-21的表达水平

2.5 IL-21在观察组不同病理级别中表达水平的比较

唇腺活检HE染色淋巴细胞浸润情况分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个病理等级，4个病理等级中IL-21表达水平具有统计学意义（P＜0.05），详见表5。疾病组IL-21 表达水平与唇腺活检病理等级呈正相关（rs=0.815，P=0.001）。

表5 两组患者血清IL-21的表达水平

3.讨论

淋巴系统病变是原发性干燥综合征的重要表现。除泪腺和唾液腺外，其他组织也可有淋巴细胞浸润。这些浸润的淋巴细胞主要是CD4+T细胞，它可以产生许多细胞因子，如白细胞介素-2以及干扰素7，这些细胞因子刺激B细胞克隆引起淋巴组织增生。

据相关资料报道，原发性干燥综合征的血液系统损害可累及所有血细胞，主要机制是自身抗体与血细胞结合并破坏。临床主要表现为单纯性贫血或白细胞、血小板减少，亦有两系以上细胞同时减少。原发性干燥综合征多有淋巴组织增生，病理一般为良性，但极少数会演变为假性淋巴瘤或恶性淋巴瘤。大量临床资料显示，原发性干燥综合征发病率呈逐年上升趋势，对患者的身体健康以及生命安全均存在一定的消极影响[7]。

早期临床对于原发性干燥综合征的检查以及早期症状未进行重视，患者常在症状较为明显、病情进展严重时就医，但耽误的疾病的最佳治疗时间。随着人们对于改变的重视，疾病的发现率明显提升。既往资料显示，Bcl-6、Blimp-1、IL-21可能参与了原发性干燥综合征的发病机制。Bcl-6、Blimp-1、IL-21与唇腺组织中淋巴细胞的浸润程度有关[8]。本文旨在探讨原发性干燥综合征患者外周血及唇腺组织中Bcl-6、Blimp-1、IL-21表达水平及临床意义。Bcl-6属于抗细胞凋亡家族，主要功能是转录抑制作用，进而抑制细胞凋亡。受Bcl-6调控的靶基因主要与细胞活化、分化和增生相关。Blimp-1为锌指蛋白转录抑制因子，可促进B细胞发育成浆细胞终末分化。IL-21参与调节B细胞增殖，协同IL-15促进骨髓前体细胞增殖和NK细胞增殖、分化和细胞毒活性。本研究结果显示，两组患者在Bcl-6、Blimp-1、淋巴细胞浸润清理4个等级、血清IL-21表达水平、唇腺活检HE染色淋巴细胞浸润情况以及4个病理等级中IL-21的比较上存在差异具有统计学意义。以上结果说明Bcl-6、Blimp-1、IL-21为原发性干燥综合征病情严重程度的危险因素，对于原发性干燥综合征病情变化有一定的预测作用。

综上所述，Bcl-6、Blimp-1、IL-21可能参与了原发性干燥综合征的发病机制。Bcl-6、Blimp-1、IL-21与唇腺组织中淋巴细胞的浸润程度有关。