幽门螺杆菌感染检测方法的研究进展

焦冬菊，孙 轸 综述，谢佳平 审校

(1.泰山医学院，山东泰安 271000；2.山东省聊城市人民医院消化内科 252000)

幽门螺杆菌(HP)感染的发病率在地理上虽有所不同，但约50%的世界人口为HP的感染者[1]。世界卫生组织已把HP列为第一类致癌因子，并明确为胃癌的危险因子。HP感染还被认为是非贲门胃癌发生的最重要危险因素，在全球范围内，约占此类胃癌的90%，占所有癌症的5%[2]。此外，HP感染还与儿童铁缺乏、维生素B12缺乏、特发性血小板减少性紫癜和生长迟缓有关[3]。因此，早期诊断和根除HP是降低胃癌发生风险的关键步骤。而及时、准确的HP检测是治疗的前提和基础。现就HP感染检测方法的研究进展作一综述。

1 非侵袭性检测方法

1.1尿素呼气试验 尿素呼气试验基于HP脲酶(脲酶是一种将尿素转化为氨和二氧化碳的酶，不存在于哺乳动物细胞中)的产生，包括13C尿素呼气试验和14C尿素呼气试验。

13C尿素呼气试验仍是一个高精度的诊断测试，虽不是一个真正的定量试验，但可用于HP负荷的半定量评价。已经有研究证实，高细菌负荷与三联疗法的成功率呈负相关，而对于四联疗法组之间差异无统计学意义(P>0.05)[4]。然而，UBiT试剂盒已被证实具有较高的假阳性结果，可能是由于缺乏柠檬酸和较低的DOB阈值(2.5‰)[5]。西班牙的一项研究，应用UBiT试验检测HP与细菌培养、组织学检测、快速尿激酶试验相比，假阳性结果为44/272例(16.2%)。当再附加进行2项PCR检测(基于尿素和16S rDNA)时，44例中只有12例(27%)假阳性结果确定是真阳性[6]。

有研究显示，14C尿素呼气试验对HP感染的诊断准确性进行了分析，14C尿素呼气试验诊断的敏感性为0.96%，特异性为0.93%，表明14C尿素呼气试验诊断HP感染具有良好的敏感性和特异性[2]。

1.2粪便抗原检测 粪便抗原检测是指检测粪便标本中HP抗原的存在，面临的主要问题是患者的依从性，这危及了测试的成本效益问题。一个全面的建模分析显示，粪便抗原检测的依从性约为48%，相比之下，尿素呼气试验和血清学检测的依从性为86%[7]。

1.3血清学检测 血清学检测的优点即非侵入性，在接受治疗(质子泵抑制剂和抗菌药物)或急性出血患者中不会产生假阴性结果[8]。但其无法区分过去和现在的HP感染,因而不能反映HP的现状感染，也不能用于疗效观察。此外，人类宿主的个体遗传差异对HP抗体水平有很大的影响。

2 侵袭性检测方法

2.1快速尿素酶试验 快速尿素酶试验基于HP的尿素酶活性，能将检测试剂转化为氨，导致pH值升高，从而使pH监测仪的颜色发生变化。一般而言，商业性快速尿素酶试验的特异性约为95%～100%以上，敏感性约为85%～95%以上。然而，不同的商业试剂取得的结果需不同的反应时间。早于推荐时间阅读尿素酶试验可能导致假阴性结果[9]。此外，活检标本存在细菌密度、H2受体拮抗剂、质子泵抑制剂、铋剂、抗菌药物、胃酸缺乏和出血，所有这些都增加了假阴性结果的可能性[10]。而且，对尿素酶试验在儿童HP检测中的应用的敏感性仍存在争论。

2.2细菌学培养 细菌培养在管理HP治疗失败、抗菌药物耐药性及敏感性研究中起着重要作用。此外，细菌培养还可以分离HP，以便进一步分析其表型和基因型特征，从而更好地了解病原体，提供治疗评价。然而，培养HP既费时又费力，且HP是一种非常挑剔的细菌，其培养结果严重依赖于环境。细菌分离的敏感性在实验室之间差别很大。另外，宿主因素如胃炎活性高、细菌负荷低、出血、饮酒、使用H2受体拮抗剂、质子泵抑制剂(PPI)、抗菌药物等对培养阳性率有不良影响。在培养之前，抗菌药物至少停药4周，其他药物至少停药2周[11]。根据活检的数量、培养基、运输方式和方法的不同，培养基检测的敏感性从50%～95%，特异性为95%[12]。

2.3组织学检测 组织学检测有助于深入了解胃黏膜状况。有研究报道，消化性溃疡患者不管是否出血，相比细菌培养、血清学和快速尿激酶试验，组织学检查最准确[13]。但影响组织学诊断准确性的因素也很多，如取组织部位、大小和数目，染色方法，是否应用质子泵抑制剂、抗菌药物，以及病理学检测人员的经验等。

2.4多聚酶链反应(PCR) 诊断测试越来越依赖于分子测试，它可以提供比常规方法更快、更准确和敏感的检测方法，并有扩增的可能，从而用于其他用途，如抗菌药物耐药性和毒力因子的检测及细菌定量。此外，PCR还可用于致病基因的鉴定，以及与抗菌药物耐药性相关的特异性突变检测。不管怎样，PCR扩增核酸技术普遍被应用，包括常规PCR和实时PCR。然而，常规PCR技术只能进行单基因定性检测，不能做定量分析，而且不具备高通量和多重选择性[14]。实时PCR技术的敏感性和重现性则很容易受探针选择的影响[15]。

2.5内镜下观察 HP感染的检测，非侵袭性试验(如血清学、尿素呼气试验或粪便试验)非常方便。然而，这些试验不能提供胃黏膜的实时信息。这在临床非常重要，尤其对一些特殊患者，如有消化不良症状、癌症家族史患者等。这些患者的内镜检查非常必要，但通过内镜检测HP感染的侵袭性试验(如组织学、细菌培养或快速尿素酶试验)需取活检标本，导致不必要的损伤和医疗费用。此外，由于淋巴结的局部分布，随机活组织检查并不完全准确。而通过胃镜征象实时识别胃内HP感染区域不仅可减少抽样误差和过多的工作负荷，还可提高实验室早期胃恶性病变(需要全胃更细致检查)的检测功效。

内镜下胃炎的京都分类，提出了19个内镜表现来表征胃黏膜炎性和HP感染的存在[16]。TONGTAWEE等[17]观察14个与HP感染相关的内镜特征，其中6个特征与HP感染密切相关，对HP的诊断有明显的敏感性和特异性。包括胃黏膜黏液、胃黏膜弥漫性发红、胃底黏膜点状发红、皱襞增粗、黏膜水肿和规则排列的集合静脉(D型和I型)。R型与HP诊断无明显的相关性。表明传统的内镜特征可以用于诊断中国患者的HP感染，并有助于确定胃癌的危险因素。见图1。

注：A表示RAC(R型)传统内窥镜观察；B表示RAC(R型)放大内镜观察；C表示RAC(I型)；D表示RAC(D型)

图1 HP感染相关的内镜特征

HAYASHI等[18]的研究显示,HP感染患者正常的规则排列的集合静脉模式与类型A、B、C模式出现的频率分别为9.4%、87.7%、98.1%、90.9%。所有异常模式对HP感染的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为93.3%、89.1%、92.3%、90.6%，总体准确率91.6%。见图2。

注：A表示正常型，集合静脉规则排列模式，可见许多微小的红点；B表示A型，马赛克一样的外观，以深层皱褶或蛇皮样外观为特点；C表示B型，弥漫性均匀发红；D表示C型，非典型模式呈现出不规则的红槽

图2 HP感染患者正常的规则排列的集合静脉模式

有学者通过内镜下窄带成像技术将胃黏膜形态学分为5种，包括1型：集合静脉规则排列；2型：锥形胃小凹；3型：棒状胃小凹；4型：磨玻璃样形态；5型：边界为蓝色的边缘不规则的深褐色斑块。有研究显示，1型和2型胃黏膜形态学模式预测HP阴性状态均比其他胃黏膜形态学模式差异有统计学意义(P<0.01)，而3型、4型或5型胃黏膜形态模式预测HP阳性状态比其他胃黏膜形态学模式差异有统计学意义(P<0.01)。将3型、4型、5型胃黏膜形态学模式结合分析，对诊断HP感染有较好的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值(分别为94.28%、96.66%、98.50%、87.87%)。有研究表明，使用c-nbi胃镜观察HP感染的胃黏膜形态学模式与炎性分级有明显的相关性。

有学者研究表明，内镜下白光成像和窄带成像技术所见黄斑瘤可在HP相关性胃炎胃黏膜的任何部位存在，代表HP相关性慢性胃炎淋巴滤泡的内镜特征。

总之，基于常规胃镜检查观察HP感染后胃黏膜特征使内镜医师及临床医师对HP相关性胃部疾病有了更直观的认识，越来越广泛地应用于有经验的医师对HP感染的检测和治疗。

3 其他检测方法

有学者指出了一种新的HP检测方法：多基因遗传分析系统 (MGAS)，是一种基于16S rRNA作为定性基因(其在HP中高度保守、稳定表达)，ureC作为定量基因(其在HP中为单一拷贝)的定性定量分析方法。通过对胃镜下收集的活检标本进行快速尿素酶试验、组织病理学、常规PCR、MGAS分析，结果显示MGAS的敏感性和特异性分别为92.9和92.4%，阳性预测值和阴性预测值分别为96.0%和87.1%。所有上述参数均高于细菌培养(除特异性)、快速尿激酶试验和组织病理学与常规PCR检测接近。为HP感染的临床检测和治疗效果监测提供新方法。

LI等[19]研究磁性石墨纳米胶囊(MGNs)在原位靶向磁共振成像检测HP中的应用。MGNs的磁性核心是磁共振成像的基础，外壳能耐酸、耐腐蚀以保护内在磁性核心不被腐蚀。MGNs外壳的硼酸聚乙二醇复合物能与HP细胞壁肽聚糖逆性结合，而带有功能性MGNs的HP可通过 T2加权磁共振成像和胃组织的拉曼成像而被检测。结果表明，应用MGNs的增强MRI可能是一个有前途的、在非常苛刻的条件下诊断HP的平台。

4 结 语

目前诊断方法的发展使HP感染的诊断更加准确，从而提高HP相关疾病的治疗。HP感染检测金标准可能不存在，但可根据HP流行地区的患病率、可行性，各种方法的优缺点及每例患者不同的临床情况而选择不同的方法。相信在将来针对不同的临床用途、特定人群、基因型特征，会有更可靠、可准确的HP感染诊断方法以提高HP感染的诊断率。