中西药结合治疗马腺疫临床案例分析

买占海，卢亚宾，沙娅•奴尔兰，齐文静，王德超，崔耀成，于维浩，况 玲

（1.新疆农业大学，乌鲁木齐830052；2.昭苏县西域马业有限公司伊犁马研究繁育中心，昭苏 835600）

马腺疫是由马链球菌（Equine strangles streptococcus）马亚种引起马属动物的一种急性接触性传染病，属于三类动物疫病，呈现散发性或地方流行性[1-3]。该病呈世界性分布，在新疆几乎每年都要流行一次，其中马驹最为易感，感染马驹发病率达100%，直接影响幼驹生长发育[4]。临床常见有一过型腺疫、典型腺疫和恶性腺疫三种病型。临床典型性症状为鼻黏膜急性卡他、体温突然升高和颌下淋巴结急性炎性肿胀、化脓等。一过型腺疫病程1～3 d可自愈，典型腺疫患病马初期体温上升到39℃～40℃，颌下淋巴结急性炎性肿胀较硬，随病情的发展表现为浆液性、脓性变化，病程为7～14 d[5]。而恶性腺疫患病马病原菌由颌下淋巴结的化脓灶经淋巴管或血液转移到其他淋巴结及内脏器官，造成全身症状恶化，常因极度衰弱或继发脓毒败血症而引起死亡[6]。本研究采用病史调查、临床检查以及实验室诊断相结合的方式对2例患病马匹进行了确诊，并采用中西医结合的治疗方法对其进行治疗。为今后马腺疫临床诊断和防治提供依据。

1 材料与方法

1.1 病例及药品来源 2例患病马匹来自新疆伊犁州昭苏县某牧民马场；马的品种为纯血马与伊犁马的杂交改良母马驹。中草药购自昭苏县安泰平价大药房；兽用常规西药均购自天马兽药店。

1.2 主要试剂与材料 淀粉培养基、THB培养基、3%H2O2试剂购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；快速革兰氏染液、链球菌细菌生化编码鉴定管A203购自杭州天和微生物有限公司；胎牛血清购自Hyclone公司。

1.3 病例诊断

1.3.1 病史调查及临床检查 病案一：2014年4月10日某牧民一匹9月龄杂交改良母马驹，肌肉注射4支160万IU青霉素钠，1次/d，连用3 d，治疗无效。问诊：得知该患病马所居马舍曾有马腺疫疫情，发病率及感染率较高，与其同舍饲喂的8匹马驹也陆续出现流鼻涕，下颌淋巴结肿大等症状。视诊：精神沉郁，食欲不振，流脓性鼻涕（图1a）。触诊：左侧下颌淋巴结肿大，坚硬如鸡蛋大小，右侧肩前淋巴结肿大硬而呈鹅蛋大（图1b），腹股沟淋巴结肿胀（图1c），右后肢大腿外侧肿胀（图1d），如拳头大小，较硬。常规检查：体温升高至39.9℃，呼吸10次/min，脉搏33次/min。

病案二：2014年1月18日某马场一匹7月龄杂交改良公驹患病，160万IU青霉素钠4支，磺胺嘧啶钠注射液10 mL，静脉推注，1次/d，连用2 d，但是治疗效果不佳。问诊：得知病马体质较差，瘦弱，曾反复4次复发马腺疫，每次发病间隔时间约2～3 w左右，最长间隔时间为40 d均用西药抗生素治疗且治愈，但治愈后又复发，与该马同舍饲喂的32匹断奶公马驹中也出现患病症状。视诊：精神沉郁，流黄色脓性鼻涕（图1e），呼吸困难，食欲正常、体型偏瘦。触诊：左侧下颌淋巴结肿大呈拳头大小，咽下淋巴结及颈部肿大呈皮球大小，且坚硬（图1f）。常规检查：体温升高至40.3℃，呼吸11次/min，脉搏32次/min。

图1 患病马匹临床症状Fig.1 Clinical symptoms of diseased horses

1.3.2 实验室诊断

1.3.2.1 细菌的分离鉴定 采集患病马匹的脓汁、马鼻拭子、阴道分泌物、全血样品分别接种于10%犊牛血清 THB 培养基和含5%羊鲜血 THB 固体培养基上，37℃温箱培养 24 h。

1.3.2.2 扫描电镜检测 分离纯化的菌落形态稳定，在电镜下观察菌株的具体形态。

1.3.2.3 PCR 检测 使用细菌通用引物和常规PCR体系对病案1中病马的鼻试子、下颌脓汁及病案2中病马的鼻试子样品菌株进行细菌16S rDNA PCR检测，并对获得的序列进行克隆测序。

1.3.2.4 初步生化鉴定 将PCR鉴定阳性菌株按照链球菌生化编码鉴定手册（GYZ-12ST）操作，对分离菌进行生化试验验证[8,9]，观察鉴定管颜色变化，结合鉴定手册判定结果。

1.4 治疗 治疗原则：抗菌消炎，清热解毒、散瘀消肿、托里排脓、补虚健脾、利咽喉。 病案一，西药治疗：青霉素80万IU×10支、磺胺嘧啶钠注射液10～20 mL，静脉注射，连续用药3 d；西药停用后，采用中药透脓散加减：黄芪12 g、川芎10 g、当归5 g、皂角刺5 g、金银花10 g、茯苓5 g、陈皮5 g、党参5 g、山甲（炒末）3 g进行治疗，一剂/d内服，外敷用鱼石脂软膏涂抹肿胀处，连用5 d至脓破溃。病案二，西药治疗：一次性静脉注射（0.9%氯化钠注射液500 mL、头孢曲松钠4 g、10%葡萄糖注射液500 mL，磺胺嘧啶钠、维生素B12、复合维生素B各10 mL，10%葡萄糖酸钙注射液500 mL，）并再安乃近10 mL肌肉注射，体温恢复正常38.7℃；停用西药7 d后，中药用透脓散加减：黄芪12 g、川芎10 g、当归5 g、皂角刺2 g、金银花10 g、茯苓10 g、陈皮10 g、党参5 g、山甲（炒末）3 g，连喂7 d，全身脓肿均破溃，此后未见病情复发。

2 结果

2.1 细菌的分离鉴定结果 采集的样品接种在含10%犊牛血清的THB固体培养基中细胞生长缓慢，而在含5%绵羊血的THB固体培养基中分别出现型溶血现象，呈露珠状小菌落，周围形成完全透明的溶血环（图2A，图2B）。挑取单个菌落经革兰氏染色，显微镜下观察到革兰氏阳性链球菌，呈长链状排列（图2C）。

图2 马链球菌的分离培养与鉴定Fig.2 Identification and culture of Equine strangles strepotococcus

2.2 电镜扫描检测 纯化的菌株在电镜下呈现长链状（图3A），长椭圆形，无鞭毛（图3B）。

2.3 PCR 检测结果 使用细菌通用引物和常规PCR体系对病案1中病马的鼻试子、下颌脓汁及病案2中病马的鼻试子样品进行细菌16S rDNA PCR检测。结果显示，在1500 bp左右均出现明显的目的条带，见图4。经测序鉴定感染菌株为马链球菌，并将鉴定阳性的菌株命名为ZS-1、ZS-2、ZS-3。

图3 电镜下菌株形态Fig.3 Electron microscopic observation on the morphology of strain

图4 16S rDNA PCR 鉴定结果Fig.4 PCR results for 16S rDNA

2.4 生化鉴定结果 根据细菌生化GYZ-12st编码鉴定手册鉴定链球菌，认定指数接近100%，证实结果可靠。由此，进一步证实病案1和病案2中的马均患恶性马腺疫。

2.5 治疗效果 病案一：西药停用后，内服中药，用药d3时，下颌淋巴结及肩前淋巴结脓肿破溃，体温40.1℃；用药d4时大腿处脓肿破溃，体温39.5℃；用药d5时，腹股沟淋巴结处脓肿破溃，体温38.9℃，病情基本恢复，食欲增强。病案二：治疗d3时，马驹精神恢复正常，食欲增强；治疗d5，体温恢复正常（38.7℃），左侧下颌淋巴结脓肿破溃，咽部脓肿变软；d7时，后咽下淋巴结破溃；d15时后伤口愈合，此后未见病情复发。

表1 链球菌GYZ-12st编码鉴定结果Table 1 Streptococcus GYZ-12st code identification results

3 讨论

在昭苏县，马腺疫一般发生于秋末及寒冬季节，春夏两季偶尔也会发生，其主要感染当岁马驹，尤其是 6 月龄 ～ 1 岁马驹，断奶后多发，舍饲马发病率高于放牧或散养马匹，主要侵蚀马驹免疫系统，造成全身感染，感染后的马驹产生抗体后一般不会复发，体质较差，未产生抗体的马匹容易反复发作，影响马驹生长发育。

病案一和病案二中马驹均在断奶后发病，临床表现精神沉郁，体温升高，流脓性鼻涕，下颌淋巴结肿大，咽下淋巴结，肩前淋巴结，腹股沟淋巴结呈不同程度的肿大。由于应用抗生素治疗药物剂量不足，导致治疗效果不理想。本病案中，将磺胺嘧啶钠和青霉素钠剂量加大治疗，其效果作为确诊的诊断依据之一。这实际上是治疗性诊断的一种，也是兽医临床实践中常用的方法。磺胺嘧啶钠为磺胺类抗生素药物，马腺疫爆发时短期应用，效果较好。长期应用会出现磺胺药中毒症状，因此只能按推荐浓度连用 3 d，最多不得超过5 d。本研究发现中草药透脓散对于治疗马腺疫具有很好的疗效。《透脓散》是著名的外科托法中的治病剂，出自明代医家陈实功的《外科正宗》[10]。使用复方托里透脓散，具有托毒排脓功效，其复方中草药具有补益气血的作用，主要医治痈疽内脓已经形成了但是其不能迅速破溃的患者，其中方剂中的穿山甲和皂角刺两味药相同功效在于攻坚消肿和透脓外达，归尾与川芍两味药相配伍具有养血活血以及扶助正气的功效[11]。本研究采用托里透脓散进行治疗，脓肿部位迅速成熟破溃，创口迅速愈合达到了患马治疗效果，预后良好，为今后治疗马腺疫提供参考依据。