儿童OSAHS患者血清IL—17、IL—23的表达及意义

谢先荣　詹俊杰

【摘要】 目的：探讨IL-17、IL-23在儿童OSAHS患者血清中的表达及意义。方法：选择2017年1-9月期间佳木斯大学附属第一医院耳鼻喉科收治的4～12岁OSAHS患儿27例，健康门诊进行常规体检的正常儿童32例。OSAHS患儿组（试验组）均行PSG检查，健康儿童组（对照组）通过详细的病史询问排除OSAHS。血清学白细胞介素17（简称IL-17）及白细胞介素23（简称IL-23）检测采用ELISA法。结果：试验组血清IL-17、IL-23的含量均高于对照组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：与健康儿童相比，儿童OSAHS患者IL-17及IL-23显著提高，白细胞介素17及白细胞介素23在儿童OSAHS发病机制中可能有重要作用。

【关键词】 睡眠呼吸暂停低通气； 白细胞介素17； 白细胞介素23

Expression and Significance of Serum IL-17 and IL-23 in Children with Obstructive Sleep Apnea Hypopnea Syndrome/XIE Xianrong，ZHAN Junjie.//Medical Innovation of China，2018，15（13）：069-072

【Abstract】 Objective：To investigate the expression and significance of serum IL-17 and IL-23 in children with OSAHS.Method：27 cases of 4-12 years old children with OSAHS in ENT department of the first affiliated hospital of jiamusi university from January to September 2017 were selected.32 cases of normal children in health clinic for routine examination were selected.The children in OSAHS group （experimental group） were treated polysomnographic evaluations.The normal children group（control group） were excluded OSAHS by taking history carefully.Serum interleukin 17（IL-17） and interleukin 23（IL-23） were detected by ELISA method.Result：The levels of serum IL-17 and IL-23in the experimental group were higher than those in the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion：Compared with healthy children，the children with OSAHS have a significantly increasing level of IL-17 and IL-23，and interleukin 17 and interleukin 23 may play an important role in the pathogenesis of OSAHS in children.

【Key words】 Sleep apnea hypopnea； Interleukin 17； Interleukin 23

First-authors address：Jiamusi University，Jiamusi 154007，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.13.018

兒童OSAHS既是一种炎症性疾病，同时，也是一种免疫性疾病。Tauman及其团队的研究表明，呼吸睡眠紊乱的儿童血浆hs-CRP水平增加，并且与睡眠呼吸紊乱指数（AHI）、最低动脉血氧饱和度和觉醒指数的有明显的相关性。睡眠呼吸紊乱的儿童存在间歇性出现的低氧血症以及破碎的睡眠结构，这些是构成全身炎症反应的基础[1]。而近些年发现的促炎性细胞因子白细胞介素17（IL-17）和白细胞介素23（IL-23）则对这一发病机制进行了很好的补充。IL-17是由Th17细胞和各种细胞（包括免疫细胞和非免疫细胞）分泌的促炎性细胞因子。IL-17A和IL-17F由IL-17分泌细胞分泌，这两种细胞因子可形成同源二聚体或异质二聚体，并与巨噬细胞、上皮细胞和内皮细胞形成IL-17受体复合物。导致炎症反应如中性粒细胞浸润、组织破坏和新生血管形成。IL-23可以促进激活的记忆细胞产生IL-17，对Th17细胞的维持和扩增有着重要的作用。目前IL-17及IL-23在儿童OSAHS方面的研究报道较少，本文拟通过对OSAHS患儿及健康儿童血清IL-17及IL-23的表达进行研究，以期探讨两者在儿童OSAHS中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择OSAHS患儿27例为试验组，来自佳木斯大学附一院耳鼻喉科，就诊时间为2017年1-9月；选择同时期在健康门诊进行常规体检的正常儿童32例为对照组，通过详细的病史询问排除睡眠打鼾者。纳入标准：年龄4～12岁；诊断符合《儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊疗指南草案（乌鲁木齐）》[2]。排除标准：患有先天性疾病、哮喘、变应性鼻炎等过敏性疾病，肥胖患儿（参考国际肥胖工作组织推荐的标准）[3]。患儿家长均知情同意，该研究已经伦理学委员会批准。

1.2 试验材料 IL-23和IL-17的ELISA试剂盒，上述试剂盒均购自欣博盛生物科技有限公司，整个实验过程均按试剂使用说明严格操作。

1.3 试验方法 多导睡眠呼吸监测OSAHS患儿在入院第1晚就行多导睡眠监测（多导睡眠监测系统是伟康公司生产的StrardⅡ型）。主要的监测项目有：血氧饱和度，脉搏，口鼻气流。患儿均于入院第2天晨起空腹抽静脉血3 mL进行血清中IL-17、IL-23的水平测定，在常温自然凝固20 min，以

2 500 r/min进行离心，时间为20 min，收集上清液，-80 ℃冷冻保存待用；采用双抗体夹心ABC-Elisa法进行血清IL-17、血清IL-23测定。

1.4 统计学处理 运用SPSS 19.0统计软件，计量资料以M（Q）表示，组间比较采用秩和检验，使用Pearson相关分析分别对试验组和对照组中的IL-23与IL-17的进行相关性检测。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清中IL-17、IL-23的含量水平比较 试验组IL-17、IL-23含量均明显高于对照组，比较差异均有统计学意义（Z=-3.241、-1.971，P<0.05）。见表1。

2.2 两组IL-23与IL-17的相关分析 试验组血清IL-17含量与IL-23含量呈正相关，差异有统计学意义（r=0.564，P<0.05）；对照组血清IL-17含量与IL-23含量呈正相关，差异有统计学意义（r=0.544，P<0.05）。

3 讨论

儿童睡眠呼吸疾病中以睡眠呼吸暂停综合征（OSAHS）最为常见，不过其发病率报道不多。根据文献统计，国外儿童打鼾的发病率的报道从4.9%～7.9%不等，伴呼吸暂停的发病率为0.9%～1.8%[4-6]，年龄和性别均没有显著差异；而国内的报道打鼾的发病率为2.2%，合并OSAHS的则为2.2%[7]。OSAHS使儿童夜间睡眠质量下降，睡眠期间微觉醒次数增多，导致神经认知功能的下降，引起包括注意力不集中、多动障碍等一系列症状[8-11]。OSAHS对儿童健康和发育有着长期的慢性影响[12-17]。儿童的腺样体肥大和/或扁桃体肥大是最多见的病因，其他的还包括神经肌肉功能障碍，面颅骨发育畸形等。发生于OSA的全身性慢性炎症提示，呼吸暂停低通气指数与炎性细胞因子水平之间可能存在相关性[18-19]。张丽净等[20]研究也指出：在对血清中的TNF-α和IL-4含量进行检测发现，腺样体肥大的患儿，这两种物质的含量均有不同程度的提高，而且，升高的幅度与腺样体肥大程度（A/N）有正相关性。目前，儿童OSAHS的病因、病理尚没有像成人OSAHS一样研究的那么清楚，但为大家公认的发病因素有：间接性低氧血症、睡眠碎片化、局部或全身的炎症反应，以及遗传、个人体质等其他因素。最近有许多研究表明，全身或局部炎症反应，均不同程度的存在于OSAHS儿童[1，21-22]。其中有兩种重要的细胞因子如IL-17及IL-23与儿童OSAHS存在着密切的相关性。Th1、Th2、Treg以及Th17等T细胞亚群都是由幼稚CD4+ T细胞分化形成。作为来源于T细胞的细胞因子IL-17，它于1995年被发现，因其可以与IL-6共同激活T细胞增殖而命名[23]。

IL-17又被称作IL-17A，其和IL-17F都属于IL-17家族。它们是细胞因子如IL-1、IL-6、IL-23刺激IL-17分泌细胞的产物。IL-17A与IL-17F既可以形成同源二聚体，还可以形成异质二聚体，这些二聚体再与IL-17炎症相关细胞如巨噬细胞、上皮细胞和内皮细胞形成IL-17受体复合物。IL-1、IL-6和TNF-α等细胞因子既是活化的炎症细胞的产物，又可以和炎性细胞共同刺激，导致中性粒细胞浸润，组织破坏和新生血管形成，形成炎症反应。IL-17对多种细胞靶点都有促炎性作用，这些细胞包括上皮细胞和内皮细胞、成骨细胞、单核/巨噬细胞和成纤维细胞。目前已被证明IL-17的主要功能在炎症反应的效应阶段[24]。呼吸系统的炎症反应也有IL-17的参与，以致引起气道的慢性炎症[25-26]；哮喘患者中就可以检测到IL-17F的高水平表达[27]。IL-17也与成人OSA有关联：Th17/Treg（调节性T细胞）比例升高，血浆中细胞因子IL-6和IL-17的过度表达，微环境过度分泌的促炎性因子均可导致OSAHS的发展[28]。对OSAHS儿童来说，从扁桃体组织中可以检测出来高含量细胞因子如IL-1b、IL-10、IL-17A，这表明炎症反应活化了T细胞[29]。在本研究中，OSAHS儿童血清IL-17含量高于正常对照组，比较差异有统计学意义（P<0.05），这提示在儿童OSAHS的发病中，较高浓度的血清IL-17可能有着重要的作用。Oppmann等[30]最早发现了IL-23的存在。作为细胞因子IL-12家族的一员，不论是在小鼠，还是在人，激活的单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和T、B细胞以及内皮细胞均有表达；其是异二聚体分子，单个独特的p19亚基以及p40亚单位组成，而这个亚单位是与IL-12共享的；致病性CD+T细胞群扩增离不开IL-23。Aggarwal等[31]发现在IL-23存在的情况下活化的T细胞导致Th17细胞增殖，从而导致IL-17水平的增加。Th17反应的特征是生产的IL-17（以及其他炎性细胞因子）并且很大程度上靠IL-23来扩增和维持它们的表型，因此，出现了IL-23/IL-17轴的概念。关于IL-23/IL-17轴的研究陆续出现在银屑病关节炎、过敏性紫癜以及过敏性鼻炎等炎症性疾病中，这些研究结果显示，IL-23/IL-17轴与炎症性疾病有着密切的联系[32-34]。本研究结果显示OSAHS患儿血清IL-23的含量水平高于正常对照组，而且两组血清中IL-23和IL-17浓度具有明显相关性（试验组相关系数r=0.564，P<0.05；对照组相关系数r=0.544，P<0.05；均属正相关），这个结果也提示了存在IL-23/IL-17轴。综上所述，青春前期的儿童中，OSAHS组患者有着较高的促炎性介质IL-17和IL-23的表达，两者存在着相关性，这为帮助诊断小儿阻塞性睡眠呼吸暂停综合征以及提供治疗后随访的潜在标记打开了新的思路。

筆者研究上也存在着一些不足：首先，笔者研究的对象是仅限于黑龙江东部地区，病源来源有限，若能将样本来源扩大将能取得更好的效果；其次，样本量偏少，以至于数据分布稍显零散，是一个整体较低的数量，笔者会在今后的临床工作累计更多样本，以便于进行更深一层的研究与探讨。

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（收稿日期：2017-01-23） （本文编辑：周亚杰）