罗畅如 陈伟红 李明 杜新
【摘要】 目的:观察国产粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对32名健康供者外周血造血干细胞动员效果及不良反应。方法:选取2017年4-11月期间32名健康供者应用G-CSF 5~10 ?g/(kg·d)连续5 d皮下注射,若第4天白细胞低于30×109/L,第4.5天开始采集前2 h加用G-CSF 5 ?g/kg皮下注射,用COBE Spectra血细胞分离机采集外周血造血干细胞,若采集数量不够,第5.5天再采集1次。观察供者动员前后血常规的变化和采集造血干细胞结果,以及出现的不良反应。结果:动员后第4.5天白细胞明显高于动员前,差异均有统计学意义(P<0.05)。32名供者均成功采集,外周血单个核细胞(PBMNC)8.5(3.17~20.95)×108/kg、CD34+6.43(2.15~17.5)×106/kg,其中4名供者需采集2次,余28名供者均采集1次。10名供者出现腰背部酸痛,3名出现乏力,均能耐受;4名供者采集过程中出现口唇、四肢麻木,予静滴钙剂后均缓解。结论:所有供者经G-CSF动员后均可成功采集,并能耐受其不良反应,可替代进口G-CSF供临床使用。
【关键词】 动员; 粒细胞集落刺激因子; 造血干细胞
【Abstract】 Objective:To observe the mobilization and adverse effects of domestic granulocyte colony stimulating factor (G-CSF)on peripheral blood hematopoietic stem cells in 32 healthy donors.Method:A total of 32 healthy donors from April to November 2017 were selected for 5 consecutive days of subcutaneous injection of G-CSF 5-10 ?g/(kg·d).If white blood cells count were less than 30×109/L on day 4,subcutaneously injected with G-CSF for 5 ?g/kg 2 hours before day 4.5.Peripheral blood hematopoietic stem cells were collected by a COBE Spectra blood cell separator,in the event that the quantity collected was not sufficient,an additional sample would be collected on day 5 and a half.The changes of blood routine before and after mobilization,the results of hematopoietic stem cells and the adverse reactions were observed.Result:White blood cells were significantly higher at 4.5 days after mobilization than those before mobilization, the differences were statistically significant(P<0.05).All 32 donors were successfully collected,PBMNC were 8.5(3.17-20.95)×108/kg,CD34+ were 6.43(2.15-17.5)×106/kg,of which 4 donors required additional collection,with the rest needing only the initial collection.10 donors experienced lumber and back pain and 3 donors reported fatigue,both of which were tolerable.Lip and limb numbness were observed in 4 donors,who were given intravenous calcium.Conclusion:All donors are able to successfully collection after mobilization by G-CSF and can tolerable adverse reactions,which can replace imported G-CSF for clinical use.
【Key words】 Mobilization; Granulocyte Colony Stimulating Factor; Hematopoietic stem cell
First-authors address:Shenzhen Second Peoples Hospital,Shenzhen 518035,China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2018.15.011
外周血造血干細胞移植已广泛应用于血液系统良恶性疾病、遗传性等疾病的治疗,其中动员、采集足够数量的外周血造血干细胞是决定其能否成功的关键环节。本文选取2017年4-11月期间32名健康供者应用国产粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员、采集外周血造血干细胞的效果及其对供者产生的不良反应,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本研究经过医院伦理委员会批准,并按照医院伦理委员会要求对所有的参与者提供书面通知。选取2017年4-11月期间32名健康供者,纳入标准:来源于中华造血干细胞资料库深圳分库,经检索10个位点(HLA-A、B、Cw、DRB1、DQB1)相合,以及本科同胞HLA相合或半相合。通过体格检查均排除感染性疾病、慢性系统性疾病(心血管疾病、结缔组织病)及其他不适于捐献情况的人员。其中男19名,女13名;年龄11~58岁,体重38.5~110 kg。
1.2 方法
1.2.1 动员 采用国产G-CSF(生产厂家:上海三维生物技术有限公司,国药准字S19980037)动员,5~10 ?g/(kg·d),第1天8 pm皮下注射,后根据供者体重情况,1次/晚或1次/12 h皮下注射,连续5 d,第2.5~6.5天每天上午查血常规,若采集前1 d外周血白细胞低于30×109/L,于采集前2 h皮下注射赛格力5 ?g/kg,以增加骨髓中的造血干细胞向外周血液的释放。
1.2.2 采集 32名健康供者用药第4.5、5.5天采集造血干细胞,采集次数根据采集物中单个核细胞(MNC)计数及CD34+细胞计数而定,目标采集细胞总数达到CD34+细胞>2×106/kg(受者体重)或MNC>5×108/kg(受者体重)。用COBE Spectra血细胞分离机(美国Terumo BCT公司)采集外周血造血干细胞,选择MNC程序,输入患者性别、身高、体重、外周血血细胞比容等数据,Spectra系统将根据输入资料自动计算出运行结果,可根据具体情况稍做调整。采用肘正中静脉及对侧桡静脉或肱静脉穿刺,血流速度30~75 mL/min,以枸橼酸(ACD)液为抗凝剂,全过程心电监护,外周循环血量第1次12 000 mL,第2次8 000~12 000 mL。每次采集产品110~210 mL。
1.2.3 计数 取混匀后的采集物少量悬液计数单个核细胞数(MNC)、CD34+细胞数,并且计算每次产物MNC和CD34+细胞的采集总量。
1.3 观察指标 观察供者动员前后的血常规、MNC、CD34+的变化,以及供者动员、采集时的不良反应。
1.4 统计学处理 采用SPSS 19.0软件对所得数据进行统计分析,计量资料用(x±s)表示,比较采用t检验;计数资料以率(%)表示,比较采用字2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 供者动员前后血常规的变化情况比较 动员后第4.5天白细胞数为(43.3±9.7)×109/L明显高于动员前的(7.5±1.7)×109/L,差异有统计学意义(P<0.05)。而动员后血红蛋白、血小板与动员前比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。
2.2 供者采集造血干细胞结果 28名供者采集1次(第4.5天)细胞数就达到移植要求,4名供者需采集2次(第5.5天)达到移植要求,无一名供者采集3次及以上,见表2。
2.3 供者动员、采集时出现的不良反应及随访情况 10名(31.3%)供者动员过程中出现腰背部疼痛,3名(9.4%)出现全身乏力,均可耐受,无须药物等特殊处理;无一名供者出现发热、胸闷、恶心、呕吐、腹痛等不适。采集过程中有4名(12.5%)供者出现口唇、四肢麻木,无四肢抽搐、意识障碍等,经静脉补充葡萄糖酸钙后,病情好转,均能顺利完成造血干细胞采集。所有供者出院后1~6个月接受电话随访,均无明显不适。
2.4 移植后造血重建情况 采集造血干细胞送往北京、广州、武汉、天津、深圳等地。32名患者接受外周造血干细胞移植后,均获得造血重建。移植后12~14 d中性粒细胞绝对计数>0.5×109/L,移植后10~21 d,PLT>20×109/L。
3 讨论
获得足够外周血干细胞是保证外周血造血干细胞移植后受者造血及免疫功能重建的关键。在正常生理条件下,骨髓中造血干细胞占有核细胞的0.5%左右,外周血液循环中的造血干细胞含量极少,仅为骨髓1%~10%,不能满足患者移植的需要[1]。研究发现,通过粒细胞集落刺激因子可促使供者骨髓中大量造血干细胞迁移进入到外周血液循环中,使用血细胞分离机分离采集供者造血干细胞,能满足造血干移植的需要[2-4]。
国内大多数单位采用进口G-CSF作为动员剂,效果已得到肯定[5-8]。随着我国经济、科技的发展,制药工艺水平也不断得到提高。许多国产药与进口药相比效,疗效、副作用相当,但价格明显降低,减轻患者的负担。因此笔者应用赛格力作为动员剂进行疗效、不良反应观察,为证实能否替代进口G-CSF提供临床依据。
目前最佳G-CSF动员剂量及采集时间尚无定论。尽管有报道随着G-CSF剂量的升高,造血干细胞的数量也有所升高,但其副作用也随着升高,不利于供者的安全。故筆者采用G-CSF剂量为5~10 ?g/(kg·d),与国内外学者报道基本一致[9-11]。本研究发现所有供者经G-CSF动员后白细胞明显升高,与动员前相比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而血红蛋白、血小板较前有所下降,但差异无统计学(P>0.05)。有报道表明动员后第5、6天连续采集外周血干细胞为最佳时机[9-12],而吕亮亮等[13]认为动员第4、5天采集为最佳时机。李明等[14]于2005年报道,通过调整G-CSF用药时间,第1天于8 pm用药,动员第4.5、5.5天进行采集,所采集造血干细胞数量、质量佳,而且对供者生活影响小,一直沿用至今。笔者所观察的32名供者中有4名采集2次,其余均1次便达到采集要求(87.5%),与H?lig等[15]报道基本一致(78.2%供者1次完成采集),即CD34+细胞>2×106/kg(受者体重)或单个核细胞>5×108/kg(受者体重)。