日粮添加坡缕石对1～21 d肉鸡生长性能、肠道免疫、抗氧化性能和肠道形态的影响

李 伟，王小建，刘耀东

（南阳农业职业学院，河南南阳 473003）

坡缕石是一种天然镁铝硅酸盐黏土矿物质，表面具有活性羟基和纳米级晶体形态（Bergaya和Lagaly，2013）。由于其特殊的棒状晶体堆积结构及纳米级尺寸，具有多气孔、高纵横比、离子交换和吸附能力（Murray，2000），可以作为添加剂用于增加颗粒饲料的黏结性。已有研究表明，坡缕石可以作为脱毒剂缓解黄曲霉污染的饲料对断奶仔猪造成的影响（黄梓平等，2002）。此外，日粮添加坡缕石能改善断奶仔猪肠道的完整性和屏障功能，其降低了血浆内毒素浓度和二胺氧化酶（DAO）的活性，改善肠道形态（Zhang等，2013）。在蛋鸡日粮中添加0.2%的坡缕石可以提高产蛋性能，促进消化酶的分泌（Qiao等，2015）。有研究表明，日粮添加坡缕石可以调控盲肠微生物菌群，同时黏土类矿物，如沸石粉、蒙脱石、高岭土等对动物的免疫性能也有促进作用（Almeida等，2014；Wu等，2013；Song等，2012）。目前关于坡缕石对幼龄家禽的研究报道较少，因此，本试验以1～21 d的AA肉鸡为研究对象，在玉米-豆粕型日粮中添加0.4%或0.8%坡缕石，考察其对肉鸡生长性能、免疫、抗氧化性能和肠道微生物菌群的影响，为其在家禽中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验日粮及分组 试验用坡缕石（主要成分为二氧化硅、三氧化二铝、硫酸亚铁和氧化镁等）购自聊城盛基农业开发有限公司。选取1日龄雌性AA肉仔鸡630只作试验动物，随机分为3组，每组6个重复，每个重复35羽。各组日粮分别在玉米-豆粕型基础日粮中添加0、0.4%和0.8%坡缕石。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.2 饲养管理 肉鸡采用网上平养，鸡舍内用红外线保温灯保温，第一周温度在（32±1）℃，之后每周调节温度直至温度控制在22℃左右，舍内相对湿度控制在65%，光照采用人工光照和自然光照结合，光照强度控制在30 lx。试验鸡只全期自由采食、饮水，按照商品肉鸡免疫程序进行免疫，鸡舍每周进行消毒。试验时间为1日龄到21日龄。

1.3 测定指标

1.3.1 生长性能 试验期间每周按重复记录肉鸡的饲料消耗量，在试验结束当天早上对试验鸡只按重复进行称重，记录期末体重，计算试验期间各组平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.3.2 免疫、抗氧化指标 试验结束当天，每个重复随机选择4只鸡进行屠宰，收集空肠、回肠和盲肠。采用试剂盒法测定空肠和回肠免疫性能指标IgG、IgM、SIgA的含量及抗氧化性能指标超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.3.3 绒毛形态及盲肠微生物含量 试验鸡只屠宰前翅下静脉采血5 mL用于分离血清，血清二胺氧化酶活性采用南京建成生物研究所的试剂盒进行测定。参考Hu等（2013）研究报道测定绒毛形态。参考Huang等（2012）研究方法检测肠道微生物数量。

1.3.4 肠道相关基因表达 参考Cheng等（2016）研究方法设计相关基因的引物，采用荧光定量PCR检测肠道相关基因的mRNA表达水平。

1.4 数据统计与分析 试验数据使用使用Excel处理后，采用SAS单因子方差分析进行分析，各组均值采用Tukey’s多重比较进行差异显著性检验，以P＜0.05作为差异显著的标准。

2 结果与分析

2.1 日粮不同坡缕石水平对肉鸡生长性能的影响 由表2可知，与对照组相比，日粮添加0.4%或0.8%坡缕石对肉鸡平均日增重、平均日采食量及料重比均无显著影响（P＞0.05）。

表2 日粮添加坡缕石对肉鸡生长性能的影响

2.2 日粮不同坡缕石水平对肉鸡肠道免疫性能的影响 由表3可知，对照组与处理1组、处理2组对空肠IgG、IgM和SIgA的含量均无显著影响（P＞0.05）。处理2组较对照组显著提高了肉鸡回肠IgM和SIgA的含量（P＜0.05），而处理1组与处理2组对回肠IgM和SIgA的含量无显著影响（P＞0.05）。日粮坡缕石水平对回肠IgG含量的影响无显著差异（P＞0.05）。

表3 日粮添加坡缕石对肉鸡肠道免疫性能的影响μg/mg

2.3 日粮不同坡缕石水平对肉鸡肠道抗氧化性能的影响 肉鸡抗氧化性能测定结果见表4，处理2组空肠SOD含量显著高于对照组和处理1组（P＜0.05），处理2组较对照组显著提高了回肠SOD含量（P＜0.05）。各组对空肠和回肠MDA含量的影响均无显著差异（P＞0.05）。

表4 日粮添加坡缕石对肉鸡肠道抗氧化性能的影响

2.4 日粮不同坡缕石水平对肉鸡肠道形态的影响 由表5可知，对照组和处理1组血清二胺氧化酶的浓度显著高于处理2组（P＜0.05）。与对照组和处理1组相比，处理2组显著提高了空肠绒毛高度和杯状细胞数量（P＜0.05）。处理1组和处理2组较对照组提高了回肠绒毛高度/隐窝深度（P＜0.05）。处理2组较处理1组和对照组显著提高了回肠绒毛高度（P＜0.05），处理1组和处理2组回肠绒毛高度/隐窝深度、杯状细胞数量均显著高于对照组（P＜0.05）。

表5 日粮添加坡缕石对肉鸡肠道形态的影响

2.5 日粮不同坡缕石水平对肉鸡盲肠细菌含量和相关基因表达的影响 由表6可知，对照组较各处理组显著提高了盲肠沙门氏菌含量（P＜0.05），而对照组和试验组对盲肠乳酸杆菌和大肠杆菌含量均无显著影响（P＞0.05）。处理1组较对照组和处理2组显著提高了空肠TF2基因相对表达水平（P＜0.05），各组对空肠其他基因的相对表达水平无显著影响（P＞0.05）。处理2组较对照组和处理1组显著提高了回肠MUC2和ZO-1基因的相对表达水平（P＜0.05），处理1组和处理2组较对照组显著降低了回肠TNF基因的相对表达水平（P＜0.05）。

表6 日粮添加坡缕石对盲肠细菌含量及肠道相关基因表达的影响

3 讨论

3.1 日粮添加坡缕石对肉鸡生长性能的影响本研究结果发现，日粮添加0.4%或0.8%坡缕石对肉鸡生长性能无显著影响。Cheng等（2016）研究结果同样发现，玉米豆粕型日粮添加0.1%坡缕石对42 d肉鸡期末体重和料重比无显著影响，这与本试验研究结果一致。Qiao等（2015）发现，日粮0.2% g/kg坡缕石可以提高蛋鸡产蛋率，各研究结果的差异可能与试验动物、试验持续时间、添加剂量及坡缕石的形态有关。

3.2 日粮添加坡缕石对肉鸡肠道免疫和抗氧化性能的影响 免疫应答反应初期，大多数免疫球蛋白属于IgM，其具有引起免疫反应的能量，可以溶解抗原，通过吞噬作用清除抗原进而提高免疫性能（Dibner等，1998）。本研究结果发现，日粮添加坡缕石可以提高肠道IgM和SIgA的含量。SIgA的主要功能是限制病原微生物和抗原进入黏膜屏障，坡缕石可以提高免疫球蛋白的分泌，其粘土成分可以调节免疫系统，增加多核白细胞、血清抗体的产生及脾脏的吞噬功能（Islam等，2014）。SOD是机体总清除氧自由基的抗氧化酶之一，本研究结果同样发现，日粮添加坡缕石可以提高肠道SOD的活性，降低肉鸡肝脏脂质过氧化，从而降低MDA含量（Wu等，2013）。

3.3 日粮添加坡缕石对肉鸡肠道形态和细菌含量的影响 血清二胺氧化酶的活性可以代表肠道损伤程度及黏膜的发育情况（Li等，2002）。本研究结果发现，日粮添加坡缕石可以降低血清二胺氧化酶的活性，这与试验结果发现坡缕石提高了绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度。Qiao等（2015）研究指出，0.2%坡缕石可以提高蛋鸡绒毛的完整性，这与本试验结果一致。已有研究表明，几种黏土在体外表现出抗菌活性，在体内也发现粘土对动物肠道菌群组成具有调节作用（Haydel等，2008 ；Otto，2014），如降低盲肠大肠杆菌数量，提高嗜酸乳杆菌数量（Wu等，2013）。

3.4 日粮添加坡缕石对肉鸡肠道相关基因mRNA表达水平的影响 肠道中主要的粘膜蛋白MUC2可以在肠道与上皮之间形成一层物理屏障（Linden等，2008）。本研究结果发现，日粮添加坡缕石提高了杯状细胞的数量，而杯状细胞的形成与MUC2和TF2的基因表达密切相关，这与坡缕石的粒径和肠道黏膜分泌蛋白有关（Reichardt等，2009）。此外，本研究结果发现，坡缕石可以降低IFN基因mRNA相对表达水。González等（2014）研究报道，沸石粉可以通过降低IL的产生，具有抗炎作用。Wu等（2013）研究发现，坡缕石可以作为抗炎剂降低脂多糖诱导应激的肉鸡肠道滋养层的活化，抑制血浆和肠道炎症介质的分泌；肠道功能的完整性和通透性可能受到多种细胞共同调节，如肿瘤坏死因子TNF、干扰素IFN及各种白细胞介素等，这些炎症介质可以释放到细胞内，具有紧密连接蛋白和调控肠道紧密连接的功能，通过血液循环作用到肠上皮细胞，进而维持肠屏障功能的完整性，这也与IFN mRNA表达水平下调有关。

4 结论

玉米-豆粕型日粮中添加0.4%或0.8%坡缕石可以提高1～21 d肉鸡肠道免疫和抗氧化性能，改善肠道屏障功能，对肉鸡的生长性能无负面影响。