蓝孔雀群发支原体病的诊断与治疗

吕 冉 程家球 李俊娴 余树培

(南京市红山森林动物园，南京，210028)

支原体(Mycoplasmaspp.)也称霉形体，是分类上介于细菌和病毒之间的没有细胞壁的原核生物，属于柔膜菌纲(Mollicutes)，支原体目(Mycoplasmatales)支原体科(Mycoplasmata ceae)。鸡毒支原体(MG)和滑液囊支原体(MS)是两种重要的家禽病原[1]。国内有关禽类支原体病的文章较多，但对蓝孔雀感染支原体的病例报道较少。

1 发病情况

2015年11月27日，该基地3只蓝孔雀出现张口呼吸，咳嗽，流浆液性鼻液等症状并发出“干啰音”，粪便较稀呈黄绿色；11月30日发现2只蓝孔雀死亡；12月7日发病数量孔雀增至十几只，呼吸音明显，偶尔发出啰音，甩头，单独呆立较多，吃食较少，精神状态逐渐变差，最终死亡。2015年12月至2016年3月初群养蓝孔雀张口呼吸症状较多，隔离蓝孔雀个体食欲情况稍有好转。3月之后，群养蓝孔雀张口呼吸症状较少，死亡数量下降，趋于平稳。蓝孔雀发病过程中的总数量及死亡率变化如图1所示。

图1 蓝孔雀发病过程中总数量及死亡率变化Fig.1 The total number of changes and the variationof mortality in blue peacocks

2 病理解剖

对病死蓝孔雀进行剖检(图2)，见其龙骨突出，气管环严重出血；心脏表面有点状出血点，肝脏质脆，两侧肺脏大面积化脓、坏死；气囊壁增厚、发黄，有干酪样渗出物；小肠黏膜脱落、糜烂出血。

(A)为2015年11月30日死亡蓝孔雀解剖气管外观(A)Shows the trachea of dead blue peacock on November 30,2015

(B)为2015年11月30日死亡蓝孔雀解剖肺脏外观(B) Dissected lung appearance of blue peacock on November 30,2015

3 实验室诊断

3.1 病原体分离鉴定

用无菌棉签采取病死蓝孔雀的气管或气囊渗出物、鼻甲骨、鼻窦的渗出物或肺组织等作为病料，置支原体液体培养基(由美国BD公司提供)过滤器除菌之后，37℃培养5～7 d待培养基颜色变黄，立即接种至固体培养基(由美国BD公司提供)上培养3～4 d，如果颜色没变化，每隔3 d传1次，及吸取培养液到支原体液体培养基上，共传3代，培养10 d后接种至固体培养基上培养。可在固体培养基上观察到中央凸起呈荷包蛋样的菌落[2]。将初步分离得到的病原菌送至南京天邦生物科技有限公司进行进一步做血清鉴定。

经鉴定确诊蓝孔雀为支原体感染。

3.2 药敏试验

采用MIC发进行药敏试验，在96空板的每孔加50 μL Frey’s肉汤；在第1孔加50 μL药，混匀后，吸取50 μL到第2孔，依次稀释到第11孔，吸去50 μL；每孔加浓度为103～14CFU/mL的细菌，振荡混匀，37 ℃培养1周；观察颜色变化情况，颜色变黄，说明药没有作用，不变色则药有效果，记录颜色开始变黄的稀释度，报告结果[3]。

药敏试验结果显示支原体对泰乐菌素、替米考星、诺氟沙星均敏感，对头孢菌素、阿莫西林、青霉素类均不敏感。

4 治疗

发病初期，将有明显临床症状的蓝孔雀及时隔离到新笼舍，口服复方新诺明，0.5片/只，连用3日。此后按群养蓝孔雀用药方式治疗。

使用16.0%～23.0%过氧乙酸溶液对蓝孔雀内笼舍消毒，3～4次/周。将蓝孔雀的外笼舍用竹网进行围挡，控制其活动范围；夜晚将内笼舍灯光打开，吸引蓝孔雀回内笼舍，减少冬季低温寒冷应激。

对群养蓝孔雀使用复合维生素预混剂，按0.1 g/kg水补充维生素，增强抵抗力。混饲的药物：双黄连连喂5 d，停药3 d；泰乐菌素饲喂2个5 d疗程中间停药3 d；恩诺沙星用药5 d，停药3 d；10%多西环素+20%替米考星和诺氟沙星联合用药5 d为1疗程。之后按泰乐菌素、恩诺沙星、10%多西环素+20%替米考星和诺氟沙星顺序轮换交替使用，5 d为1疗程，中间停药3 d。

经药物有效治疗，药物疗程持续近4个月后，蓝孔雀的死亡率从9.3%下降到2.1%，张口呼吸症状的蓝孔雀减少，病情得到控制。

5 讨论与小结

支原体感染多能引起呼吸道临床症状，主要表现为呼吸困难，咳嗽，逐渐消瘦，在长期感染情况下，机体抵抗力较弱的，最终导致死亡。该病容易与禽类传染性支气管炎、传染性喉气管炎、新城疫、大肠杆菌病混合感染，并能引起免疫缺陷。

支原体感染发病季节常在寒冷的冬季和初春，发病时间长，具有传染性。南京地区属于亚热带季风气候，四季分明，冬季湿冷天气较多，容易引起支原体病的感染。另外群养蓝孔雀内笼舍面积狭小、通风不畅导致氨气较重，加之天气寒冷抵抗力变差使动物机体易感染此病。对此，我们对饲养结构进行调整，及时将带病蓝孔雀隔离治疗，缩小外笼舍饲养面积。

支原体病在诊断上有一定难度，国内有很多有关支原体病的报道，目前该病原的试验诊断方法主要有血清学(平板凝集、HI和ELISA)、病原分离和PCR法[3]。

该病主要采用长期抗生素治疗，补充维生素等营养增强抵抗力，有一定的疗效。药敏试验结果显示支原体对供试6种抗菌药物表现了不同的敏感度，其中对泰乐菌素、替米考星、诺氟沙星均敏感，对头孢菌素、阿莫西林、青霉素类等药物耐药。有文章表明60～80 mg / L 剂量组 10% 磷酸替米考星可溶性粉可作为治疗鸡支原体病的最佳使用剂量，且能够产生最佳的治疗效果[4]。笔者在用药过程中发现10%多西环素+20%替米考星和诺氟沙星联合用药在临床上起到良好的效果。在药物联合用药过程中，为避免病原体产生耐药性和动物机体中毒，采用长期用药和轮换用药的原则。

支原体自身的变异特性、免疫逃逸功能决定了禽支原体病难于控制，通过疫苗免疫和药物治疗很难消灭支原体，防控禽支原体病会是一项长期动态、细致复杂的工作，各种措施中，免疫尤其是采用活疫苗免疫依然是综合控制的核心和重点[5]。

“防重于治”是动物疾病的主要防治原则。首先动物的饲养管理占主要地位，应将饲养密度控制在合适范围之内，冬季采取适当措施为动物防寒保暖；夏季则应注意防暑降温。其次应保持动物笼舍卫生清洁，定期通风和消毒，切断支原体病的传染源，仍旧是做好动物疾病预防的重点工作。