黑灵芝多糖对运动大鼠抗疲劳和抗氧化作用

莫双瑗，梁 健

（1.广西科技大学 体育学院，广西 柳州 545006；2.广西科技大学 鹿山学院体育教学部，广西 柳州 545006）

黑灵芝（Black Ganoderma lucidum）在真菌界具有重要的地位，其中含有重要的活性因子，具有明显的药理功能，其价值含量高，品种多，包括黑灵芝、白灵芝、紫芝等[1-3]。研究表明，灵芝多糖是从灵芝中提取出的具有极高价值的成分，其具有很强的生理活性，能够降血糖、降血压、调节血脂等功能，尤其是黑灵芝多糖更被广泛应用[4-5]。运动专家提出，经过过度的运动不仅对机体不利，而且还会产生大量的自由基损坏机体，从而能够引起机体相关功能发生障碍，线粒体功能下降，呼吸变慢，使得机体加快疲劳，如果不除掉这些自由基，则导致运动力降低，影响机体健康[6-8]。本文作者意在检测正常大鼠、运动疲劳后大鼠以及力竭休息后大鼠肝组织和线粒体，研究黑灵芝多糖对大鼠抗疲劳，增强机体运动能力和提高机体运动后恢复能力的影响。

1 材料与方法

1.1 动物、材料与试剂

健康Wistar雄性大鼠100只，质量为150～180 g，取自吉林大学动物中心。黑灵芝，安国市健仁药材有限公司产品；SOD、GSH-Px、—SH、MDA、NOS、NO、Ca2+/Mg2+-ATPase、Na+/K+-ATPase试剂盒， 齐一生物科技有限公司产品。

1.2 仪器与设备

RE型蒸发器，上海越众仪器设备有限公司产品；UV7502PCS型分光光度计，深圳市佳博特实验设备有限公司产品；TD型离心机，常州市万丰仪器制造有限公司产品；GM-33A型真空抽滤泵，厦门森态仪器仪表有限公司产品；TL96-2型超声波粉碎机，江苏天翎仪器有限公司产品；HH-4型恒温水浴锅，常州市鸿科仪器厂制造。

1.3 方法

1.3.1 黑灵芝多糖的制备 取一定量的黑灵芝子实体，将其洗净，40℃烘干，粉碎至160目，采用体积分数为95%的乙醇进行脱脂，加入纯净水，100℃下浸提2 h，过滤，浓缩。然后加入乙醇置于4℃的冰箱中沉淀多糖，离心30 min，采用Sevag法除蛋白质，进行浓缩并冻干，备用[9-11]。

1.3.2 动物分组及灌胃 随机抽取Wistar雄性大鼠，将大鼠随机分为5组，每组20只：模型组（A）、力竭组（B）、力竭休息组（C）、黑灵芝多糖力竭组（D）、黑灵芝多糖力竭休息组（E）。黑灵芝多糖组（D组、E组）每天灌胃多糖水溶液 4 mL/d，A、B、C组均灌胃生理盐水4 mL/d，连续灌胃30 d，末次灌胃30 min再检测。

1.3.3 运动模型的建立 随机抽取大鼠，使其做30 d跑台训练，方案根据Bedford模型（见表1），训练之前应先进行准备活动，速度为15 m/min。按照1.3.2方法对大鼠灌胃生理盐水和黑灵芝多糖4 mL/d。30 d后，将A组于安静时处死，做对照组；B、D组大鼠运动至力竭并处死，作为对照；C、E组力竭并恢复12 h后处死[12-14]。

1.3.4 样品的制取 大鼠进行处理前必须禁止饮食，时间为8 h，被处理大鼠应及时检测，取适量肝组织于烧杯中，进行剪碎处理，得肝匀浆，并于4℃、2 000 r/min条件下离心20 min，清除下沉部分，进一步对上清液处理，离心速度为3 000 r/min，时间为20 min，沉淀为肝组织，应用超声波将其破碎，备用[15-16]。

表1 大鼠运动方案Table 1 Rats exercise program

1.3.5 指标的测定 力竭时间的测定应从开始运动开始计时，直至力竭不动之后所用的全部时间。判断是否力竭的原则为观察运动时，大鼠速度降低，臀部在笼体后壁，后肢体随皮带自然转动达30 s，利用刺激手段进行作用没有效果，即为力竭。GSH-Px、NOS、—SH、MDA、NO、SOD、Ca2+/Mg2+-ATPase、Na+/K+-ATPase的测定都参照说明书进行。

2 结果与分析

2.1 黑灵芝多糖对大鼠抗氧化能力的影响

SOD和GSH-Px是极其重要的抗氧化酶类，可清除自由基等物质。—SH作为体内重要物质，可维持机体基本能力，并能够有效地防止自由基对机体的损害。MDA浓度的多少可代表机体内物质氧化程度。由表2可以得出，运动力竭后，B组动物肝组织中GSH-Px活力、SOD活力和—SH摩尔质量显著比A组低 （P＜0.05），MDA浓度比A组显著提高（P＜0.05）。 C 组肝组织中 GSH-Px活力、SOD 活力和—SH摩尔质量同样也比A组低 （P＜0.05），MDA浓度比A组高（P＜0.05）。根据D组实验结果，同B比较，各项指标有明显恢复，但比对照组略差，E组抗氧化指标要比B、C组有显著提高，与对照组相当。故由结果可知，黑灵芝多糖能够增强肝组织抗氧化能力，并能加快运动疲劳后的恢复。

表2 各组大鼠肝组织抗氧化能力的比较（x±s，n＝20）Table 2 Antioxidant capacity of hepatic tissue in the rats from each group（x±s，n=20）

2.2 黑灵芝多糖对大鼠NO-NOS、ATPase活性的影响

NO可加强机体内血管的舒张能力，改善机体组织代谢，可加强体内物质的输送能力。由表3可得出，大鼠力竭后，肝组织NOS活力及NO摩尔质量、肝线粒体活力显著下降；休息12 h，肝组织中NOS活力及NO摩尔质量、肝线粒体活力加强，但仍不能恢复原始状态。服用黑灵芝多糖大鼠力竭后，肝组织中NOS活力及NO摩尔质量、线粒体Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力与 A比较要低（P＜0.05），比 B 组高（P＜0.05）；休息 12 h 后，肝组织中NOS活力、NO摩尔质量和线粒体指标达到A组水平，和 B 组相比显著升高（P＜0.01），和 C、D 组相比显著升高（P＜0.05）。根据结果可知，黑灵芝多糖可提高机体运动能力，加强机体物质的输送，促进机体代谢，同时可增强对机体的恢复能力。

2.3 黑灵芝多糖对耐力训练大鼠跑台运动力竭时间的影响

由表4可得出，黑灵芝多糖力竭组D服用黑灵芝多糖大鼠运动后力竭时间明显比力竭组B要高，而且时间上延长23%，具有统计学意义（P＜0.05）见表4。由实验结果可知，大鼠服用多糖后力竭时间显著延长，故黑灵芝多糖可增强运动能力，延缓运动疲劳，能够延长运动时间。

表3 各组大鼠肝组织NO-NOS和肝线粒体ATPase活性的比较（x±s，n＝20）Table 3 NO-NOS in hepatic tissue and ATPase activity in hepaticmitochondria of rats（x±s，n=20）

表4 大鼠力竭时间比较（x±s，n＝20）Table 4 Rats exhaustive time（x±s，n=20）

3 结语

由实验结果可知，大鼠服用黑灵芝多糖后，GSH-Px活力、SOD活力和—SH摩尔质量有显著提高，MDA浓度明显降低，故黑灵芝多糖可增强机体抗氧化能力。肝组织线粒体Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力明显提升；恢复12 h后，肝组织中NOS活力、NO摩尔质量达到原水平，说明服用黑灵芝多糖可增强机体的恢复能力。服用多糖后大鼠力竭时间显著延长，说明黑灵芝多糖具有延缓疲劳，延长运动时间的作用。