冀 威
(朝阳市动物疫病预防控制中心,辽宁 朝阳 122000)
鸡大肠杆菌病表现出不同地区、季节、品种和日龄均能发生的特点。雏鸡与初产蛋鸡发病率高,肉鸡相对蛋鸡发病率高,病程持续时间较长,但无明显死亡高峰出现[1]。本病一年四季都会发生,以12月至次年1月发病率高。感染途径多经口、空气和垂直传播。鸡大肠杆菌病多呈现继发感染,常与禽流感、新城疫传染性法氏囊病和传支等禽病合并感染,又以呼吸道反面疾病与本病混合感染情况常见。另外,环境因素决定疾病的发生发展情况,粗放式饲养、养殖密度过大、营养不良、应激反应等因素,常成为本病发生的诱因[2]。
作为养鸡行业常见、多发的鸡大肠杆菌病,经常与病毒、球虫等死亡率高的疾病合并感染,造成发病率和病死率大幅度提高,使得危害扩大化,造成巨大经济损失,不合理的用药使得耐药菌株产生,影响养鸡业发展。
鸡大肠杆菌病多发,对产蛋和增质量影响巨大,甚至造成病鸡死亡现象,尤其是耐药后,治疗效果欠佳。中药虽然有效避免出现耐药性问题,但是见效缓慢。鸡大肠杆菌血清型众多,疫苗防控存在弊端,本试验充分发挥创新思维,采取中西结合的方法取得较好效果,为辽宁省朝阳市防控鸡大肠杆菌病提供可靠的依据。
4.1.1 药物。药敏片和11种抗菌药物购自中国兽医药品监察所。配制中药组方白头苦参汤、三黄汤、白头翁散的中草药购自朝阳市某药房。
4.1.2 试验动物。试验动物选自2015年辽宁省朝阳市某存栏5万只21日龄雏鸡鸡场。病鸡选取具有典型症状的,包括急性败血型、气囊炎型、腹膜炎型、雏鸡脐炎型以及脑膜炎型、输卵管炎型[3]。临床诊断后进行实验室确诊,首先进行s病原菌分离和纯培养,再进行革兰氏染色镜检,将病原菌在普通琼脂培养基和麦康凯培养基上培养观察。观察菌落特征,进行单个特征菌落革兰氏染色镜检,然后通过生化实验确定。最后分离鉴定纯化后的大肠杆菌,再在肉汤培养24 h,将培养物注射进试验动物体内,成功复制病历,则判定为有致病性的大肠杆菌[4]。实验室确诊病例中选出480只发病鸡,进行下一步临床治疗性试验。
4.2.1 药敏试验方法。用纸片法进行药敏试验,在恒温箱中37℃恒温培养24 h,利用游标卡尺测量抑菌环直径大小。用接种环挑取少许纯培养菌落,接种于琼脂表面,用镊子将药敏片贴到接种好菌株的琼脂平板上,将纸片轻轻按压使其紧密接触,并确保均匀分布,以不小于24 mm为最佳。于35℃恒温箱中平板倒置培养24 h。利用游标卡尺测量纸片直径、抑菌环大小。
4.2.2 分组及给药。朝阳市某鸡场存栏5万只21日龄感染鸡大肠杆菌病雏鸡,随机挑出480只病鸡作为临床治疗试验用鸡,再将这些鸡随机分为16组,进行分组治疗。通过药敏试验选出卡那霉素、环丙沙星和硫酸粘菌素,中药组则用白头翁散、三黄汤、白头苦参汤,和中西医结合治疗组对病鸡进行隔离治疗。西药饮水,中药拌料。同等条件下给予相同饲料(不含抗菌药物)和饮水。中药组方如下。
表1 大肠杆菌对11种抗菌药物的敏感结果
白头翁散:白头翁100 g、黄柏100 g、黄芪100 g、苦参100 g、秦皮100 g、枳壳50 g和木香50 g。
三黄汤:黄连100 g、黄柏100 g、大黄50 g。
白头苦参汤:白头翁100 g、苦参100 g、金银花50 g、忍冬藤50 g、车前草30 g、泽泻30 g、槟榔20 g和川黄连20 g。
第1组用药,西药卡那霉素饮水4 mg/kg,用药3 d。第2组用药,西药环丙沙星饮水4 mg/kg,用药3 d。第3组用药,西药硫酸粘菌素饮水4mg/kg,用药3d。第4组用药,白头翁散,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量,用药3 d。第5组用药,三黄汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量,用药3 d。第6组用药,白头苦参汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量,用药3 d。第7组用药,白头翁散,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时,西药卡那霉素饮水4 mg/kg,用药3 d。第8组用药,三黄汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时西药卡那霉素饮水4 mg/kg,用药3 d。第9组用药:白头苦参汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时,西药卡那霉素饮水4 mg/kg,用药3 d。第10组用药,白头翁散,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时,西药环丙沙星饮水4 mg/kg,用药3 d。第11组用药,三黄汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时,西药环丙沙星饮水4 mg/kg,用药3 d。第12组用药:白头苦参汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5g药量。同时,西药环丙沙星饮水4mg/kg,用药3 d。第13组用药,白头翁散,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时,西药硫酸粘菌素饮水4 mg/kg,用药3 d。第14组用药,三黄汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时,西药硫酸粘菌素饮水4 mg/kg,用药3 d。第15组用药,白头苦参汤,药物粉碎,用作拌料,每只鸡0.5 g药量。同时,西药硫酸粘菌素饮水4mg/kg,用药3d。第16组用药,对照组,不给药。
4.2.3 观察指标及判定。试验前和给药后3 d对每组鸡只进行称质量,记录数据,计算增重率。观察鸡只的临床症状,计算治愈率、增重率。
治愈率=(治愈数/发病数)×100[5]
增重率=(给药后体重-给药前体重)/给药前体重×100[6]
①大肠杆菌分离株对抗菌药物的敏感性测定结果见表1。
②用药3d后,各组鸡只的治愈情况和增重情况见表2。
表2 16组鸡大肠杆菌病中西药联合用药效果
西药组卡那霉素、环丙沙星和硫酸粘菌素治愈率为55%~60%,中草药组白头翁散、三黄汤和白头苦参汤治愈率为30%~40%,单纯西药和单纯中药组治愈率均不是很理想。
卡那霉素配伍白头翁散对鸡大肠杆菌病的治愈率为80%,配伍三黄汤的治愈率为85%,配伍白头苦参汤治愈率为95%。可见中药白头苦参汤配伍西药卡那霉素治疗效果明显。
环丙沙星配伍白头翁散治愈率为70%,配伍三黄汤治愈率为65%,配伍白头苦参汤治愈率为70%。可见这几种中西药结合治疗效果区别不大。
硫酸粘菌素配伍白头翁散治愈率为80%,配伍三黄汤治愈率为75%,配伍白头苦参汤治愈率为90%。可见白头苦参汤配伍硫酸粘菌素结合治疗效果比较明显。
通过表2、图1可以看出,中西药联合治疗效果理想,治愈率为65%~95%,尤其以白头苦参汤配伍卡那霉素治疗效果最佳,治愈率达到95%,白头苦参汤配伍硫酸粘菌素治疗效果也较好,治愈率达到90%。因此,朝阳市有条件的鸡场在防治鸡大肠杆菌病时可采用中西药联合用药模式。
图1 16组鸡大肠杆菌病中西药联合用药效果
本试验采用单纯西药治疗、单纯中药治疗以及中西药联合用药方法,在用法用量均相同情况下,治疗结果显示西药治愈率为50%~60%,中药治愈率为30%~40%,未达到理想效果。显而易见,中西药结合给药治疗效果均好于对照组和单一用药组效果,治愈率为65%~95%;白头苦参汤配伍卡那霉素效果显著,治愈率达到95%,白头苦参汤配伍硫酸粘菌素治疗效果也比较理想,治愈率达到90%。建议朝阳地区有条件鸡场选用白头苦参汤配伍卡那霉素或白头苦参汤配伍硫酸粘菌素联合用药治疗本场鸡大肠杆菌病。