云南省红河州马梨形虫病血清学检测

孙秀涛，吴 杰，李 朝，何克灿，王 薇，邹丰才，万宝云

（1. 红河州动物疫病预防控制中心，云南蒙自 661199；2. 云南农业大学动物医学院，云南昆明 650201；3. 易门县农业局，云南易门 651100）

马梨形虫病（Equine piroplasmosis，EP）是通过蜱传播的一种血液原虫病，由驽巴贝斯虫（Babesia caballi）和马泰勒虫（Theileria equi）寄生于马属动物红细胞内所引起[1]。动物感染后，会出现体温升高、抑郁、出血和呼吸困难等症状[2-3]，一旦治疗不及时，则会发生死亡，给养马业带来严重影响。

据报道[4-8]，青海、甘肃、黑龙江、吉林、新疆等地区均有马梨形虫病流行。马、骡、驴作为云南省农村或山区主要的运输工具，目前存栏约72.7万匹，多为散养。云南省红河州地处中越边境，存在该病病原的中间宿主——蜱[9]。由于当地气候比较湿热，特别有利于蜱等节肢动物繁殖。当地居民目前尚未意识到蜱虫的危害，几乎没有采取灭蜱措施，进而增加了马属动物感染的概率。目前尚未见红河州马梨形虫病流行的报道。为了解红河州马梨形虫病流行情况，开展了本次血清学调查。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清 2017年1—2月，在云南省红河州泸西县、弥勒市、个旧市、开远市4个地区27个乡（镇），采用抽样调查方法，分别采集农户散养的马属动物血样108、166、132、56份，共462份样品，−80 ℃冻存待检。

1.1.2 试剂盒 马巴贝斯虫抗体（BabesiosisAb）酶联免疫分析试剂盒：上海酶联生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 ELISA双抗原夹心法检测抗体 根据马巴贝斯虫抗体酶联免疫分析试剂盒使用说明书操作。将空白孔调零，在试验有效性成立的情况下（阳性对照平均值≥1.0，阴性对照平均值≤2.0），测定酶标仪450 nm波长处吸光度（OD值），并与临界值（CUT OFF=阴性对照空平均值+0.15）相比较，从而判定标本中马梨形虫病抗体存在与否。即OD＞ CUT OFF，为巴贝斯虫抗体阳性，反之则为阴性。1.2.2 数据分析 采用SPSS 22.0软件，通过单因素方差分析方法，探究地区、年龄对骡、马、驴梨形虫病抗体阳性率的影响。以P＜0.05时为显著差异，具 有统计学意义。

2 结果

2.1 不同地区马属动物血清抗体检测

462份马血清样本中，共检出4份阳性，平均样本阳性率为0.87%（4/462）。其中：个旧市检出1份阳性，阳性率为2.27%（1/166）；弥勒市检出3份阳性，阳性率为0.60%（3/132）。其余地方未检测出阳性。各地区间抗体阳性率没有明显差异（P＞0.05）。具体结果见表1。

2.2 不同年龄马属动物血清抗体检测

表1 不同地区马梨形虫病抗体检测结果

被检马属动物血清中，1～7岁136份，7～13岁222份，13～27岁104份。仅从7～13岁马属动物中检测出4份阳性，其余年龄段未检出，各年龄段间差异不显著（P＞0.05）。具体结果见表2。

表2 不同年龄段马属动物马梨形虫病抗体检测结果

2.3 不同种类马属动物血清抗体检测

被检马属动物血清中，骡384份、马76份、驴2份，仅在骡血清中检出阳性样本4份，阳性率为1.04%，马及驴未检测出阳性，各种类间差异不显著（P＞0.05）。

表3 不同动物种类马梨形虫病抗体检测结果

3 讨论

本次血清学调查发现，云南省红河州马梨形虫病血清学个体阳性率为0.87%（4/462），低于新疆富蕴县（17.58%）[10]及北疆四县（56.4%）和南疆部分地区（1.1%）[11]的检测结果。这可能与季节，当地马匹的饲养环境、地域环境，以及疾病预防措施有关。因本次样品采集时间在1—2月份，气温较低，传播媒介蜱虫的活动频率及范围较小，进而减少了马梨形虫病的传播。有研究发现，3—6月为马梨形虫病高发期，其中4—5月为高峰期[6]。本次调查显示，地区间阳性率没有明显差异。这不同于Davitkov 等[12]在巴尔干中部地区马匹中的调查结果。该报道显示，不同地理区域间的阳性率差异显著。这可能与区域内是否有中间宿主蜱的存在有关。

对不同年龄马属动物进行检测发现，只有7～13岁年龄段的马属动物存在感染，阳性率为1.80%（4/222）。这与黑龙江省宁安县[6]、吉林省延边地区[7]的检测结果相似，两地6～10岁壮龄马的感染率最高（23.88%）。这可能与采集的样品数量有关。本次调查的7～13岁年龄段样品量接近另外两者总量的2倍，因而检出的阳性数量偏多，即可能因样本采集数量悬殊而造成了差异。但年龄差别对感染率影响并不明显，这与Davitkov 等[12]的报道基本一致。此外，本次调查的骡、马、驴3种动物采样数量不均匀，且数量较少，这也可能是导致3种动物阳性率不同的原因之一。

云南省湿热温和的气候十分适合蜱虫的生长。虽然此次调查检出的阳性率不高，但同时也表明该地存在马梨形虫病病原，因此需要做好防蜱和灭蜱工作。没有疫情的地区，要对外来马匹进行严格检疫，防止带虫马匹进入；政府也要加强宣传教育，要求农户在蜱活动季节，尽量避免在滋生蜱的草地放牧，对圈舍定期驱虫，及时清理圈舍卫生。而对于养殖场来说，在该病流行季节，要做好定期检测和驱虫工作。

另外，红河州地处中越边境，边境线较长，用马属动物进行货物托运交易较为常见，加之越南边境地区动物防疫薄弱，这势必增加了马梨形虫病传入我国的风险[13]。因此加强我国境内动物疫病的检疫和防控尤为重要。此次调查对于了解红河州马梨形虫病流行情况具有参考意义，也为该地区马属动物梨形虫病的防控提供了数据支持。

4 结论

本次调查于2017年冬季，利用双抗原夹心法，对云南省红河州4个地区27个乡（镇）的马属动物进行了马梨形虫病血清抗体检测，发现抗体阳性率并不高（0.87%），低于我国新疆地区的检测结果。因该病具有明显的季节性，该结果偏低可能与冬季蜱虫活性低有关。但结果也表明，该地存在马梨形虫病病原，需要引起当地重视，尤其在蚊虫活跃季节，要做好防蜱和灭蜱工作。