辽宁地区猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体的检测分析

梁 乔

（1.辽宁省动物疫病预防控制中心，辽宁 沈阳 110164；2.辽宁省动物医学研究院，辽宁 沈阳 110164）

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由尼多病毒目、动脉炎病毒科、动脉炎病毒属的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起猪的一种高度接触性传染病[1]，又称蓝耳病，通常性的预防主要是通过强制性或常规性的免疫接种。PRRSV是已知的能够迅速变异的RNA病毒[2]，变异后能够产生一系列的具有广泛表型和基因型特征的菌株，并且，病毒感染机体后在宿主体内进行耐受性复制从而造成持续性感染状态，具体要靠机体的免疫状态和毒株的毒性强弱来判断，一般急性病毒血症阶段持续几个星期，慢性感染的淋巴组织可以持续几个月[3]。加上能够亲嗜巨嗜细胞、具有较强的基因变异性、抗体依赖性增强作用[4-5]等这些生物学特征的存在，使疫苗接种的广泛保护性免疫反应更是难以实现。通过本试验能够综合评价免疫后抗体水平情况，以期对该病的防控提供基础性依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样本采集随机采集辽宁地区14个市外观健康猪血清2 260份，经过了解采集血清样本的养殖场全部免疫接种过PRRS疫苗。

1.1.2 主要仪器及试剂洗板机购自汇松科技发展有限公司，酶标仪购自美国伯乐有限公司，自动分液器购自Thermo Multidrop；猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒，购自爱德士元亨生物科技。

1.2 方法采集的血液样本静置于室温内，待血液凝固后（大约30 min）放置于离心机中3 000 r/min离心5 min，离心后用移液器吸取上清液放入1.5 mL离心管中，采用间接ELISA抗体检测试剂盒对猪繁殖与呼吸综合征的免疫抗体水平进行检测，具体操作步骤按照说明书进行。

2 结果与分析

2.1 辽宁地区不同地区猪血清中PRRSV的免疫抗体阳性率地区不同，抗体阳性率不同，对辽宁地区不同地区的猪血清样本进行PRRSV的抗体检测，包括丹东、抚顺、本溪等共14个市，结果为表1。结果表明，2016年1～12月间PRRSV抗体平均阳性率能够达到95.13%，其中各个地区的PRRSV抗体平均阳性率均达到85%以上，阳性率最高的本溪市，阳性率为100%，阳性率最低的是营口市，阳性率为85.93%。

2.2 辽宁地区不同季度猪血清中PRRSV的免疫抗体阳性率季度不同，抗体阳性率不同，对辽宁地区不同季度的猪血清样本进行PRRSV的抗体检测，包括一季度（1月1日～3月31日）、二季度（4月1日～6月31日）、三季度（7月1日～9月31日）、四季度（10月1日～12月31日），统计结果为表2。结果表明，2016年辽宁地区四个季度的猪血清中PRRSV的免疫抗体阳性率均达到92%以上，其中第二季度和第四季度阳性率略高，第一季度和第三季度阳性率略低。

2.3 辽宁地区不同生长时期猪血清中PRRSV的免疫抗体阳性率生长时期不同，抗体阳性率不同，对辽宁地区不同生长时期猪血清样本进行PRRSV的抗体检测，其中包括哺乳仔猪（0～21 d）、断奶仔猪（21～35 d）、育肥猪（35 d以上）、经产母猪、后备母猪及种公猪，统计结果为表3。结果表明，断奶仔猪的抗体阳性率最高，为97.45%，哺乳仔猪最低，为89.65%。

表1 辽宁地区不同地区PRRSV的免疫抗体阳性率Table 1The positive rates of PRRSV antibody in different areas in Liaoning

表2 辽宁地区不同季度PRRSV的免疫抗体阳性率Table 2The positive rates of PRRSV antibodyin different quarters of a year in Liaoning

表3 辽宁地区不同生长时期PRRSV的免疫抗体阳性率Table 3The positive rates of PRRSV antibody in different age stages in Liaoning

2.4 辽宁地区不同养殖类型猪血清中PRRSV的免疫抗体阳性率养殖类型不同，抗体阳性率不同，对辽宁地区不同养殖类型猪血清样品进行PRRSV的抗体检测，包括种场、商品代场户、散养户，统计结果为表4。结果表明，三种养殖类型之间抗体阳性率无明显差异，都在95%左右。

表4 辽宁地区不同养殖类型PRRSV的免疫抗体阳性率Table 4The positive rates of PRRSV antibody in different breeding types in Liaoning

2.5 辽宁地区不同品系猪血清中PRRSV的免疫抗体阳性率 品系不同，抗体阳性率不同，通过ELISA检测方法对辽宁地区不同品系猪血清样本进行PRRSV抗体检测，包括长白、大白、杜洛克、二元、三元，统计结果为表5。结果表明，长白猪群血清PRRSV的免疫抗体阳性率最高，为97.60%，三元杂交猪群PRRSV的免疫抗体阳性率最低，为74.32%。

表5 辽宁地区不同品系PRRSV的免疫抗体阳性率Table 5The positive rates of PRRSV antibody in different strains of Liaoning

3 讨论

对辽宁地区共14个市的猪血清样本总计2 260份进行检测，且已知均免疫过PRRSV疫苗，猪群中PRRSV免疫抗体平均阳性率为95.13%（2 150/2 260），由14个市猪群PRRSV免疫抗体阳性率可知，PRRSV抗体阳性率处于85.93%～100%之间，说明不同地区PRRSV的免疫抗体阳性率亦不同，总体来讲各个地区免疫效果较理想，免疫抗体合格率均达到国家标准（≥70%）。由不同季度猪血清PRRSV的免疫抗体阳性率可见，冬季的抗体阳性率最高，为97.93%，2016年春季的抗体阳性率最低，为92.67%，总体来说夏季和冬季的抗体阳性率要高于春季和秋季，说明温度适宜适合PRRSV的流行和传播。

由不同生长时期PRRSV的免疫抗体阳性率可见，各个生长时期的猪血清抗体阳性率均在90%以上，哺乳仔猪相对其他时期的来说抗体阳性率较低，为89.65%，阳性率低的原因之一可能是哺乳仔猪接受疫苗免疫后产生的免疫抗体和抗原发生一定的中和效应，不能激发有效的集中免疫应答，因此对免疫效果产生一定影响。

由不同养殖类型PRRSV的免疫抗体阳性率可见，种场、商品代场户、散养户PRRSV免疫抗体阳性率分别为95.22%、95.56%、94.12%，三种养殖类型之间抗体阳性率无明显差异，说明养殖类型对免疫抗体阳性率的高低几乎无影响。

根据不同品系PRRSV的免疫抗体阳性率可见，长白、大白、杜洛克、二元、三元猪血清中免疫抗体阳性率分别为97.60%、97.07%、91.41%、95.64%、74.32%，三元的PRRSV免疫抗体阳性率明显低于其他品系的猪群，可能是由于多个品种杂交后机体对PRRSV疫苗有一定的抵御作用。

市场上商品化的疫苗分为灭活苗和弱毒苗，由于灭火苗抗体产生较慢、带毒时间较长并且容易促进和加强病毒的感染，因此，弱毒苗的使用更为普遍[6]。虽然现在能够通过接种疫苗这种途径来对病原菌的宿主、环境、相关因素等实行控制，但一些接种疫苗的动物仍然可能受到感染[7]，据认为，局限性的疫苗失效性可能归因于病毒的遗传和抗原多样性。然而，有研究强调在使用PRRSV疫苗接种疫苗后，免疫反应的发展和保护之间存在高度的个体差异[8]，这说明需要更准确地预测疫苗的有效性。据报道，机体处于不同抗体水平时接种弱毒疫苗带毒时间亦不同[9]，因此，定期做好血清学监测，特别是疫苗免疫前根据机体的抗体水平选择适宜的时间进行免疫能更好地阻断免疫细胞内野毒的感染。