许亚改 周文茂 张 斌 王 琨
(1.石家庄市兽用生物制品供应站,河北石家庄 050000;2.石家庄市畜牧兽医技术开发中心,河北石家庄 050000;3.石家庄市动物疫病预防控制中心,河北石家庄 050000)
移液器是兽医实验室最常用的定量移液设备,用于ELISA、PCR等试验。为规范兽医实验室工作人员在移液器使用过程中的操作行为,保障移液的精确性,实现实验结果的准确性,现结合工作经验就移液器的操作规范及注意事项做简单介绍。
移液器使用共分为容量设定、装配吸头、预洗吸头、吸液、放液、卸去吸头等六个步骤。
容量设定分为两个步骤,一是粗调,即通过旋转将容量值迅速调整至接近的预想值;二是细调,当调整接近预想值后,通过调节轮慢慢将容量值调至设定值。如果从大体积调为小体积,逆时针旋转旋钮即可;如果从小体积调为大体积时,需先顺时针旋转至超过设定量程的刻度,再回调至设定体积,这样可保证量取精确度。
正确的安装方法为旋转安装法,把白套筒顶端插入吸头,轻轻用力下压并左右小幅度旋转。
吸液前,应将液体吸取、排放两到三次,让吸头内壁形成一层同质液膜,确保移液的精度和准度。其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
将按钮按至第一停点,使吸头浸入液面下2-3毫米处缓慢松开按钮,停一秒后将吸头提离液面,贴壁停留2-3秒使管尖外侧的液滴滑落(具体浸入深度根据盛放液体的容器大小灵活掌握)。
将吸头贴到容器内底部并保持10°~40°倾斜,平稳按到第一停点,停一秒再按到第二停点排除剩余液体。按住按钮,同时提出移液器,松开按钮,弹出吸头。
操作完毕后,按压移液器侧面手柄将吸头弹下。
尽量选择最大量程最接近所吸取量的加样器,以减少误差,不宜用大量程的移液器移取小体积样品。
清洁移液器可用酒精棉。主要擦拭手柄、弹射器及白套筒外部,既保持干净,又避免了对样品产生污染。
根据国标JJG 646-2017 移液器检定规程,检定周期为1年,也可根据使用频率自行确定校准时间。
装配吸头时避免用力过猛,影响气密性导致吸液不准,长期操作易造成移液器内零件因长期撞击而松散,甚至导致调节刻度的旋钮卡住,影响使用。
2.5.1 避免吸液太快
吸液过快会产生反冲和气泡影响移液的准确性,还会将液体吸入活塞,造成交叉污染,甚至产生溶液腐蚀活塞和密封圈现象,导致漏气。
2.5.2 吸取特殊液体时注意事项
(1)吸取高挥发、高腐蚀液体
吸取高挥发、高腐蚀液体后,应将移液器拆开,用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁,晾干后安装使用。避免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面,对活塞杆产生腐蚀。
(2)吸取黏度高的液体(如蛋黄、血液)
吸取黏度高的液体可将吸头尖端剪断一截使吸液口扩大,先预润后再吸取。也可采用反相移液法:先按到第二档,慢慢松开按钮,放液时松到第一档,再弹出带有部分残留液体的吸头。
使用完毕,将其竖直挂在移液器架上。移液器吸头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
如移液器不使用,要把移液器的量程调至最大刻度值,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。
避免吸液前后用手触摸吸头,造成污染。