低离子凝聚胺开展交叉配血试验在输血检验中的应用

赵芳贤

(陕西省商洛市中心血站, 陕西 商洛, 726000)

在临床手术或抢救中，输血治疗能够迅速改善患者供血不足、血液循环障碍等临床症状。随着输血医学的不断发展，输血的安全性已经备受社会关注，不仅关系到患者治疗的有效性，还直接影响患者的生命安全[1]。如果输血期间出现交叉配血错误，会导致急性溶血等严重的输血反应，因此保证交叉配血的准确性、灵敏性十分重要。传统的盐水法交叉配血技术只能检测出免疫球蛋白M(IgM)抗体，难以完全、准确地检测出免疫球蛋白G(IgG)抗体，因此漏检率较高[2]。低离子凝聚胺法作为近年来新发展的交叉配血方法，可以快速、准确地检测出IgM和IgG抗体[3]。低离子凝聚胺技术不仅可以检测出完全IgG抗体，同时对不完全IgG抗体和特殊IgG抗体均具有较高的灵敏性，弥补了盐水法的不足[4]。研究[5-6]显示，盐水法的假阴性率较高，易导致患者出现严重的输血反应。本研究探讨低离子凝聚胺开展交叉配血试验在输血检验中的应用价值，现报告如下。

1　资料与方法

1.1　一般资料

收集本站血型室2017年2月—2018年2月接受输血治疗的患者样本126例，随机数字法分为观察组和对照组各63例。观察组患者中男29例，女34例; 年龄16～48岁，平均年龄(23.14±5.36)岁; 输血原因: 车祸伤24例，肝硬化食管静脉破裂19例，胃癌11例，产后大出血7例，慢性贫血2例。对照组患者中男31例，女32例; 年龄17～50岁，平均年龄(23.14±5.36)岁; 输血原因: 车祸伤23例，肝硬化食管静脉破裂21例，胃癌10例，产后大出血6例，慢性贫血3例。2组患者在性别、年龄、输血原因构成等一般资料上无显著差异(P>0.05)。纳入标准: ① 无严重血液系统疾病; ② 无传染性疾病; ③ 无严重精神性疾病; ④ 已签署之情同意书。排除标准: ① 严重肝、肾、心、肺功能不全者; ② 妊娠期或哺乳期女性患者。

1.2　试剂与仪器

低离子凝聚胺试剂盒购自珠海贝索生物技术有限公司。低离子凝聚胺法试剂组成: R1液为低离子介质, R2液为凝聚胺，R3液为假凝集清除液。盐水法所用试剂为0.9%无菌生理盐水购自南京乐诊生物技术有限公司。仪器包括: TD4ZB血型血清学多用离心机，购自上海斯欧医疗器械有限公司; MM-3D数码正置金相显微镜，购自上海万衡精密仪器有限公司; HS-6001型电热恒温水箱，购自北京长源实验设备厂。

1.3　方法

对照组采用盐水法开展交叉配血试验，具体方法如下: 抽取患者4 mL静脉血，在试管上注明受血者和供血者的姓名，然后采用离心机对血液样本进行离心，分离出血清，离心机转速为3 000 转/min, 离心时间为2 min。将红细胞调配成3%～5%红细胞盐水悬液，供血者血液样本采用相同方式配置为2%红细胞盐水悬液。取一支干净试管，装入受血者血清和供血者红细胞悬液，并标记为主侧管; 再取另一支干净试管装入供血者血清和受血者红细胞悬液，并标记为次侧管。删除(将1滴供血者血清滴入主侧管, 1滴受血者血清滴入次侧管)混匀后离心，离心机转速为1 000 转/min, 离心时间为1 min, 观察结果。若2支试管中红细胞仍处于凝集状态，则为阳性，若凝集状态消失，则为阴性。

观察组采用低离子凝聚胺法开展交叉配血，具体方法如下: 采血方法与对照组相同，在试管上明确标出主、次侧管。在主侧管中加入2滴受血者血清和1滴3%～5%供血者红细胞悬液，在次侧管中加入2滴供血者血清和1滴3%～5%受血者红细胞悬液。在主、次侧管中分别加入0.5 mL低离子介质，充分混匀, 25 ℃静置1 min。再分别加入2滴凝聚胺试剂，混匀后离心，离心机转速为3 500 转/min, 离心时间为15 s。离心结束后去上清，观察试管底部凝集状况。在主、次侧管中加入2滴假凝集清除液，混匀后观察。若2支试管中红细胞处于凝集状态且不消失，则为阳性，若凝集状态60 s后消失，则为阴性。

1.4　统计学方法

采用SPSS 19.0进行数据的统计分析，计量资料均采用均值±标准差表示，并通过t检验对数据进行分析; 计数资料以百分数(%)表示，并通过卡方检验对计数资料和构成比进行统计分析，检验指标设置为α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　果

2.1　2组患者检测时间、阳性检出率及红细胞 凝集情况比较

观察组所需要的检测时间为(2.14±1.36) min, 显著短于对照组的(7.33±1.15) min (P<0.05); 观察组阳性检出率为15.87%(10/63), 且肉眼可见细胞凝集，而对照组阳性检出率为4.76%(3/63), 只在显微镜下可见2～4个红细胞凝集, 2组比较有显著差异(P<0.05)。

2.2　2种检测方法灵敏度、稳定性、准确性对比

观察组灵敏度、稳定性、准确性分别为93.65%、90.48%、90.48%, 对照组灵敏度、稳定性、准确性分别为79.37%、76.19%、74.60%, 2组比较有显著差异(P<0.05)。见表1。

表1　2种检测方法灵敏度、特异性、准确性对比[n(%)]

与对照组比较, *P<0.05。

3　讨　论

交叉配血试验是临床中判断能否进行输血的重要依据，其检测的准确与及时关系到患者的生命安全。交叉配血的主要原理是将供血者的血清和红细胞与受血者的血清和红细胞混合，观察有无凝集反应[7]。配血过程中包括主侧配血和次侧配血。前者是将受血者血清和供血者红细胞相混合，观察受血者血清中是否含有针对供血者红细胞的抗体，后者是将供血者血清和受血者红细胞相混合，观察供血者血清中是否含有针对受血者红细胞的抗体，若2次试验均发现无凝集现象，则配血成功[8]。目前临床中开展交叉配血的方法很多，主要包括盐水法、抗球蛋白法、凝聚胺法等。盐水法检测方式虽然简便，但只能对ABO血型进行粗略检测，检测的抗体较为局限，以IgM为主，对IgG抗体无法有效检测[9]。骆建华等[10]研究显示，盐水法开展交叉配血具有耗时长、漏检率高等缺点，无法及时满足临床需要。低离子凝聚胺法作为一种新兴的交叉配血方法，其原理在于凝聚胺离子溶解后会产生大量正电荷，能够有效中和红细胞表面唾液酸带有的负电荷，有利于凝集。同时低离子溶液可降低红细胞Zeta电位，增加抗原抗体间的引力，促进特异性凝集[11]。张红等[12]研究发现，低离子凝聚胺法在交叉配血中，检测灵敏度和准确性较高，能及时、准确地为临床提供可靠配血依据，减少溶血反应。

本研究结果显示，低离子凝聚胺法所需要的检测平均时间仅为(2.14±1.36) min, 明显低于盐水法。同时对阳性率统计发现，低离子凝聚胺法阳性检出率高达15.87%, 且肉眼可见细胞凝集，而盐水法检出率为4.76%, 只在显微镜下可见2～4个红细胞凝集。从结果中可以看出低离子凝聚胺法相比盐水法，灵敏度较高，凝聚现象明显，具有快速、高效、稳定等优点。临床中在保证输血安全性的同时，减少配血时间并提高输血效率可以有效降低患者死亡率。在低离子凝聚胺技术中所用到的假凝集清除液可将非特性凝集消除，减少假阳性配血的发生。文献[13]报道称，该方法不仅能快速的检测出红细胞表面的相应抗体，同时也可避免非特异性凝集的发生，有效降低假阳性率。通过统计2种检测方法灵敏度、稳定性、准确性也可以看出，低离子凝聚胺法灵敏度、稳定性、准确性分别为93.65%、90.48%、90.48%, 均明显高于盐水法。结果进一步说明了低离子凝聚胺法灵敏度、稳定性和准确性均较高。有研究显示，低离子凝聚胺法容易受氯化钾、维生素C等外界药物影响，从而产生假阴性、假阳性结果，因此检测过程中应采取有效措施避免其发生。

总之，低离子凝聚胺法开展交叉配血试验临床价值十分明显，可快速检测出IgG和IgM抗体，促进红细胞与不规则抗体发生反应，阳性检出率高，耗时较短，具有简便、高效、准确性高等优势。在临床配血中可有效降低溶血反应的发生，提高患者输血的安全性，同时也可减少受血者的医疗费用，在临床实践中具有良好的应用前景。