HPLC法测定蒙药材胡枝子不同部位中槲皮素的含量

郑 敏 陈广荣 张栓珍 刘 静

(1.内蒙古自治区人民医院,内蒙古 呼和浩特 010020； 2.内蒙古自治区医科大学附属人民医院，内蒙古 呼和浩特 010020； 3.内蒙古自治区中医医院，内蒙古 呼和浩特 010020)

本品系蒙医习用药材(蒙名胡吉斯)为豆科植物胡枝子Lespedeza bicolor Turcz.，别名二色胡枝子、随军茶、横条。全区都有分布，生于丘陵坡地、灌木丛中。胡枝子全株能入药。具有润肺解热、利尿止血，用于感冒发热，眩晕头痛，咳嗦，尿路感染[1]。胡枝子化学成分包括黄酮、生物碱、萜类、有机酸及甾醇类等，以上成分具有抗炎抑菌、降血糖、抗氧化、抗辐射、抗癌、抗肿瘤以及增强免疫能力等药理活性[2]。槲皮素可作为药材质量控制成分。

1 仪器与试剂

1.1 仪器 1100型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司)，TJ-912型色谱分析平台(太极计算机公司), 色谱柱ODS-C18 (4.6mm×200mm，5μm，兰州化物所)。

1.2 试药 槲皮素(0081-9304)对照品由中国药品生物制品检定所提供，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为纯化水；胡枝子采自内蒙古大青山坝口子。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱ODS-C18 (4.6mm×200mm，5μm)，流动相：甲醇-水-磷酸(300∶250∶1)，波长：360nm，进样量：10μL。在此条件下样品中槲皮素与其它组分有较好的分离，见图1。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒质量的槲皮素对照品适量，置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成1mL含0.058 mg 槲皮素溶液，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取本品花、叶、茎、根，粉碎，过100目筛，精密称定0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称定质量，超声处理30min ，放冷，称重，用甲醇补足减失的质量，摇匀， 滤过，取续滤液备用，即得。

2.4 线性关系考察 分别精密量取槲皮素对照品溶液0.5，1，2，4，8μL，按上述色谱条件进行测定。结果，在0.029 ～0.464mg·mL-1浓度范围内以峰面积(A)与对照品质量浓度(C)进行回归，其线性关系良好。回归方程：A=25177834C -295090， r=0.999。

2.5 稳定性考察 取同1份供试品溶液(叶)，分别在0，1，2，4,8h进样测定，以槲皮素峰面积值计算RSD=0.71%。结果表明，供试品溶液在8h内稳定。

2.6 精密度实验及重复性考察 吸取同一批供试品溶液(叶)，在上述色谱条件下重复进样6次，测得槲皮素峰面积RSD=0.68%，结果，精密度考察符合要求。取同批药材(叶)按2.3项下平行制备6份样品溶液，并按2.1项下测定，槲皮素的平均含量=0.27%， RSD=0.78%，重复性考察符合要求。

2.7 加样回收率测定 取同批药材地上部位已知含量的样品6份，每份取约200mg，精密称定，依次分别加入1mL(每mL含槲皮素0.058 mg)对照品溶液，按供试品溶液的制备操作，测定含量，计算回收率。槲皮素平均回收率为98.6%，RSD=1.88%。准确度测定符合要求。

3 样品测定

取胡枝子药材不同部位，按2.3 项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件测定槲皮素含量，花0.20%，叶0.27%，茎0.10% ，根0.01%，槲皮素平均含量为0.145%。

4 结论

本文对胡枝子中槲皮素含量进行测定研究，研究结果表明，槲皮素含量，花0.20%,叶0.27%，茎0.10% ，根0.01%，槲皮素平均含量为0.145%。采用HPLC法测定胡枝子槲皮素含量，方法简便、快速、准确，可作为胡枝子质量控制方法之一。

[1]内蒙古自治区卫生局.内蒙古中草药[M].内蒙古自治区人民出版社，1972，297.

[2] 张帆，齐小花，邹明强，等.胡枝子中化学成分及黄酮类物质提取与分析的研究进展[J].时珍国医国药,2008,19(12):2885.