腹泻患儿大便细菌培养及轮状病毒检测结果与血清锌、肌酸激酶同工酶的关系

陈素萍，杜宝静，滑丽芳，张 京

(河北省邯郸市妇幼保健院儿科 056001)

小儿腹泻是临床常见病，有报道显示约80%的成人小儿时期有过腹泻病史，在欠发达国家，腹泻是小儿死亡的病因之一，仅次于小儿肺炎[1]。小儿腹泻多见于感染性腹泻，其中轮状病毒感染占比相对较高[2]。锌是维持肠道黏膜功能的重要微量元素，与免疫功能失调关系密切，可能与腹泻有关。肌酸激酶同工酶(CK-MB)是心肌损伤的重要标志物，小儿腹泻容易导致水电解质紊乱等一系列病理改变，加之小儿心肺功能不健全，腹泻容易造成小儿心肌损伤，导致CK-MB水平升高。分析小儿腹泻与锌、CK-MB水平分布特点，对于小儿腹泻的防治、心肌损伤的预防有重要意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年1月至2016年6月本院住院腹泻患儿作为研究对象。入选腹泻患儿437例，按照大便细菌培养、轮状病毒检测结果进行分组，其中大便细菌培养为单纯菌群失调未检出病原菌感染241例，纳入菌群紊乱组，男119例，女122例，年龄2.4～5.0岁，平均(3.1±0.7)岁；其他病毒或病原菌感染性腹泻45例纳入非轮状病毒感染组，男23例，女22例，年龄2.7～5.0岁，平均(3.3±0.6)岁；检出轮状病毒感染151例纳入轮状病毒组，其中男79例，女72例，年龄2～6岁，平均(2.9±0.7)岁。另选取单纯因外伤(如烫伤)入门诊处理的小儿50例纳入对照组，男25例，女25例，年龄2.5～4.0岁，平均(3.2±0.7)岁。腹泻患儿纳入标准：(1)怀疑为感染性腹泻、社区获得性腹泻[1]；(2)病程短于1周，尚未应用微生态制剂、抗病毒药物等可能影响检验结果的药物；(3)初诊；(4)未合并其他可能导致CK-MB水平升高的疾病，如病毒性心肌炎；(5)未合并其他类型的感染；(6)未合并先天性代谢疾病等；(7)年龄2～5岁；(8)家属知情同意并签署知情同意书。腹泻患儿排除标准：(1)拒绝参与本研究者；(2)已接受过相关治疗，可能导致检验结果变化；(3)接受过补锌治疗。对照组研究对象纳入标准：(1)否认先天缺陷疾病、近3个月腹泻、反复呼吸道感染病史及药物补锌；(2)心电图、心脏超声检查正常；(3)家属知情同意并签署知情同意书。4组研究对象的年龄、性别等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2菌群紊乱诊断标准 油镜直接观察涂片5个视野，计算细菌总数，参照《肠道菌群粪便涂片检查图谱》，革兰阴性杆菌为50.2%～77.0%，革兰阳性球菌为2.0%～13.0%[3]。

1.3方法

1.3.1细菌培养与轮状病毒检测 腹泻患儿在门诊详细了解病史、用药史，怀疑为感染性腹泻，达到纳入标准后，采集粪便，当日收集，治疗前获得，严格质量控制，确认无污染，4 ℃保存，分批送检，先进行涂片检查，而后进行实验室检查，预处理，采用磷酸盐缓冲液处理制备成悬液，-80 ℃冰箱保存。轮状病毒检测采用A群轮状病毒胶体金诊断试剂盒(北京万泰生物药业，2109403)，参照试剂说明书操作，免疫层析双抗体夹心法，在试剂条检测区形成一条红线，则可判断为轮状病毒感染，否则为阴性。细菌培养采用常规培养法，进行肉眼、镜检结合细菌鉴定，判断是否出现菌群紊乱。医院同时对标本悬液进行星状病毒/腺病毒等其他可能导致感染性病毒的检测。可疑菌落用质谱仪进行鉴定，分别接种克氏双糖铁琼脂斜面，进行病原菌特异的生化反应鉴定，然后用肠杆菌细菌生化鉴定编码系统(GYZ-11 E系统)及弧菌科细菌生化鉴定编码系统(第2代GYZ-9V 系统)进行生化鉴定，或直接用API 20E肠道菌鉴定系统(法国梅里埃)进行鉴定。琼脂、培养基、细菌生化编码鉴定管为杭州天和微生物试剂有限公司生产。

1.3.2血清锌监测 采集40 μL末梢血或静脉血40 μL，聚乙烯塑料管中送检。采用原子吸收分光光度法检查，包括火焰原子吸收分光光度法、电热原子化分光光度法，两种方法误差精密度在99.99%以上。血清锌参考范围：0～1岁58.00～100.00 μmol/L,>1～2岁62.00～110.00 μmol/L,>2～3岁66.00～120.00 μmol/L,>3～4岁72.00～130.00 μmol/L，4岁以上76.50～170.00 μmol/L[1]。

1.3.3CK-MB CK-MB检测试剂盒由美康生物科技有限公司生产，全自动生化分析仪为日立7170A。CK-MB正常参考值范围：0～37 U/L。

1.4观察指标 各组血清锌、CK-MB水平，以及各组血清锌、CK-MB异常率。

2 结 果

2.14组研究对象血清锌与CK-MB水平比较 见表1。菌群紊乱组、非轮状病毒感染组、轮状病毒组血清锌均低于对照组，血清CK-MB水平均高于对照组；菌群紊乱组血清CK-MB、血清锌水平低于轮状病毒组；非轮状病毒感染组血清CK-MB水平高于菌群紊乱组，差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 4组研究对象血清锌与CK-MB水平比较

注：与对照组比较，*P<0.05；与菌群紊乱组比较，△P<0.05

2.24组研究对象血清锌与CK-MB异常结果比较 见表2。菌群紊乱组、非轮状病毒感染组、轮状病毒组血清锌异常率均高于对照组，菌群紊乱组血清CK-MB、血清锌异常率低于轮状病毒组，菌群紊乱组血清锌异常率低于非轮状病毒感染组和轮状病毒组，差异均有统计学意义(P<0.05)。非轮状病毒感染组和轮状病毒组血清锌与CK-MB异常率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

表2 4组研究对象血清锌与CK-MB异常结果比较[n(%)]

注：与对照组比较，*P<0.05；与菌群紊乱组比较，△P<0.05

3 讨 论

本研究结果表明，对照组血清锌水平高于非轮状病毒感染组、菌群紊乱组和轮状病毒组，3组血清锌异常率均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，提示腹泻可能与血清锌异常特别是偏低有关。菌群紊乱组血清锌水平与异常率均低于轮状病毒组，提示轮状病毒感染可能与缺锌关系更密切。锌水平偏低与腹泻关系密切，主要原因可能为：(1)锌与小儿生长发育、免疫功能关系密切。大量报道显示，缺锌与反复咳嗽等感染性疾病关系密切。锌在儿童生长发育过程中发挥重要作用，婴儿在母体中的成长与锌是密不可分的，缺锌与生长发育迟缓有关，缺锌可能导致免疫功能减退，出现肠道感染风险上升[3]。(2)锌还是多种酶的辅基，与维生素D受体形成关系密切。间接影响患儿的免疫功能，锌缺乏还与厌食症有关，从而导致进食减少，更容易引起胃肠道功能障碍、肠道黏膜屏障功能减退[4]。(3)肠道对锌的吸收与代谢是人类维持锌代谢平衡的重要途径，肠黏膜功能与锌水平关系密切。大量研究显示，补锌成为治疗小儿腹泻的重要疗法[5]。动物研究显示，加锌膳食纤维能改善烫伤休克大鼠肠道血流动力学，促进黏膜屏障功能恢复[6]。缺锌容易出现肠道菌群紊乱，动物食物中添加锌能够减少肠道厌氧菌数量，补锌能够提高肠道黏膜屏障抗病能力；反之，缺锌会增加肠道黏膜病变风险[7]。总而言之，缺锌可直接或间接增加感染性腹泻的风险，感染性腹泻反过来又会影响锌的代谢和吸收，加重缺锌。

本研究结果表明，对照组CK-MB水平低于非轮状病毒感染组、菌群紊乱组和轮状病毒组，菌群紊乱组血清CK-MB水平和其异常率低于轮状病毒组，非轮状病毒感染组高于菌群紊乱组血清CK-MB水平与异常率，差异均有统计学意义(P<0.05)。腹泻特别是感染性腹泻会导致患儿CK-MB水平升高，提示患儿的心脏负荷加重[7]。可能原因是：感染性腹泻的治疗难度相对更大，同时腹泻往往更严重，更容易出现水电解质紊乱，同时，感染性腹泻还可能引起病毒血症而致代谢异常，在感染急性期，血液浓缩、循环障碍、酸中毒等都会导致心脏负荷加重[8-9]。

需注意的是，本研究中血清锌与CK-MB异常率比较，非轮状病毒感染组与轮状病毒组差异无统计学意义(P>0.05)，这可能与感染性腹泻引起心肌损伤的机制存在一致性有关[10-11]。

今后需重视小儿特别是对于那些反复腹泻的患儿进行缺锌症筛查，重视补锌。对于腹泻急性期小儿需重视口服药物快速补锌。对腹泻小儿需加强CK-MB水平监测，做好感染性腹泻心肌损害的防治[12-14]。血清锌偏低可能是导致感染性腹泻发生的重要原因，感染性腹泻可能会导致CK-MB水平明显上升。

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