关于猪链球菌及猪流感临床分离血清的抗体检测

王维维，周卫松

（山东省乐陵市畜牧兽医局，乐陵 253600 ）

0 引言

笔者选取临床发病的猪血清进行检验实验，以便分析和验证猪链球菌2型和猪流感H1亚型的流行规律，分别选取对应的抗体检验试剂盒来进行抗体的检测，通过空间层面和时间层面来分析获得的检测结果，以便对猪链球菌和猪流感病毒的流行感染规律进行深层次的探究，以便更好的指导猪链球菌和猪流感病毒的防治工作。

1 试剂盒与血清

试剂盒：选取由武汉科前公司所生产的两种对应的抗体检测试剂盒。

血清：共选取了来自河北、浙江、湖南、江西、安徽、广东、湖北、河南等省市自治区临床发病，经分离获得的4659份猪血清，冷冻保存、保存条件为-70℃的冰箱内。

2 待检血清的抗体检测

在4659份总的猪样本血清之中，采取随机选取的方法，选择了2811份血清通过猪流感病毒ELISA抗体试剂盒进行抗体检测；采取随机选取的方法，选择了4132份血清通过猪链球菌2型ELISA抗体试剂盒进行抗体检测；除此之外，采取随机选取的方法，选择了2301份血清同时开展两种类型的抗体检测[1]。以上抗体检测得到的结果均分别从空间层面和时间层面开展了全面而深入的分析工作。

按照说明书的要求严格的进行抗体试剂盒的相关操作，其中，猪流感H1亚型的操作步骤如下：首先，将待检血清予以稀释，稀释剂为血清稀释液，稀释比例为1：40，完成稀释后，将待检血清（100 uL）放进到抗原体背包孔之内，开展1孔空白对照、2孔阳性对照和2孔阴性对照，然后将血清样品进行轻微的摇匀，接着放置在37℃环境下经30 min孵育后，将孔内溶液进行清除，间隔3 min的时间对反应孔进行清洗[2]。完成后，将100 uL羊抗猪酶标二抗滴入到反应孔之内，放置在37℃环境下经30 min孵育后，将孔内溶液进行清除，将A、B底物液置入到所有反应孔之内，并摇晃均匀，然后通过10 min避光室温的环境下显色后，滴入1滴终止液，在15 min后对结果进行观测[3]。判定标准如下：选取酶标仪来对孔OD630值进行测定，若0.25×阳性对照孔平均值≥样品孔测定值，则为阴性，反之则为阳性。

猪链球菌2型的操作步骤与猪流感H1亚型的操作步骤基本相同。判定标准如下：选取酶标仪来对孔OD630值进行测定，若样品孔测定值＜0.35，则为阴性，反之则为阳性。

3 统计与分析

3.1 关于猪链球菌2型抗体检测结果的统计与分析

基于空间层面和时间层面获得的统计分析结果如下表1、表2。

表1 采样地区抗体结果

表2 不同月份抗体结果

基于地域层面的角度可以发现，血清样本地区的阳性占比平均为54.72%，其中阳性占比较高的省份有湖南、江西、安徽、湖北和河南。

基于时间层面的角度可以发现，全年阳性占比平均为54.72%，其中阳性占比最高的月份为11月，占比数值达到70.90%。

3.2 关于猪流感H1亚型抗体检测结果的统计与分析

基于空间层面和时间层面获得的统计分析结果见表3、表4。

表3 采样地区抗体结果

表4 不同月份抗体结果

基于地域层面的角度可以发现，血清样本地区的阳性占比平均为45.11%，其中阳性占比较高的省份有湖南、江西、安徽、湖北。

基于时间层面的角度可以发现，全年阳性占比平均为45.11%，其中阳性占比最高的月份为4月、10月、11月和12月。

4 结束语

针对猪流感病毒的抗体检测结果的分析，应当全年进行疫苗免疫，并在每年4月、10月、11月和12月开展免疫检测工作，对于湖南、江西、安徽、湖北等相关省份来说，必须高度关注猪流感病毒的防疫工作。

针对猪流感病毒的抗体检测结果的分析，应当全年进行疫苗免疫，并在每年9月、10月、11月开展免疫检测工作，对于湖南、江西、安徽、湖北和河南等相关省份来说，必须高度关注猪流感病毒的防疫工作。

[1] 李天芝，于新友，王金良，等．我国猪流感的流行现状及分子生物学诊断方法研究进展[J]．养猪，2017（2）：125-128.

[2] 冯萍，谭明诊，陈志海，等．猪链球菌2型感染的临床特征和治疗效果分析[J]．四川大学学报（医学版），2007（9）：874-878．

[3] 张安定，金梅林，陈焕春．猪链球菌2型研究进展[J]．养殖与饲料，2005（10）：13-18．