植物中角鲨烯检测方法研究

关 欣 ，郭迎迎 ，孟玲芝 ，张雨桐 ，王圣博 ，张 弛 ，刘 坤 ，刘荣光 ，李可人 ，姜佳君

（1.吉林省产品质量监督检验院；2.吉林省安信食品技术服务有限责任公司，吉林长春130000）

1 角鲨烯概述

角鲨烯（squalene），全称 2,6,10,15,19,23-6甲基 -2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，化学式C30H50，是一种全反式三萜烯化合物。角鲨烯成品为微黄色至透明油状液体，略带芳香味。研究表明，角鲨烯是一种可以在有机体代谢过程中产生的多不饱和烃类，在胆固醇代谢过程中发挥作用。角鲨烯具有良好的生物活性，主要体现在具有抗氧化，调节胆固醇代谢及降血脂、降血糖、降低有害物质对机体的损伤等作用。自1906年被日本化学家发现后，被广泛应用到食品、医药和化妆品等领域。

2 角鲨烯的主要来源

角鲨烯的首次发现是在深海鲨鱼的肝脏中。因此，传统生产方式是从鲨鱼肝脏中提取。但是随着人们对野生动物保护意识的增强，研究方向开始转向含有角鲨烯营养物质的其他替代资源。如橄榄、油茶、苋菜、榄仁、罗汉果等植物中角鲨烯含量丰富，菌株、微藻等也含有一定量角鲨烯。

此外，不同植物油中角鲨烯含量也很丰富，尤其橄榄油中角鲨烯含量最高，常见油脂中角鲨烯含量见表1。

表1 常见油脂中角鲨烯的平均含量（mg/100g）

3 植物中角鲨烯的检测方法

植物中角鲨烯含量的检测，主要技术手段有气相色谱，气相色谱法联用质谱技术和高效液相色谱法。植物角鲨烯理化特性具有易氧化、水溶性差等不足；同时，植物角鲨烯的检测在我国一直没有国家标准，极大地限制了其在食品、药品及化妆品等行业的应用。

植物中角鲨烯含量的检测只有地方和行业标准，如DB31/T690-2013《植物油中角鲨烯》，SN/T4785-2017《出口植物油中角鲨烯的测定》以及LS/T6120-2017《粮油检验 植物油中角鲨烯的测定 气相色谱法》。其中，LS/T6120-2017《粮油检验植物油中角鲨烯的测定气相色谱法》由国家粮食局提出，于2017年9月15日正式实施，该标准弥补了粮油行业角鲨烯检测的空白，是检测植物油中角鲨烯含量的方法。LS/T 6120-2017检测原理是基于角鲨烯是一种不皂化物，将样品经氢氧化钾-乙醇溶液皂化、正己烷提取后，采用气相色谱，以角鲨烷为内标测定植物油中角鲨烯的含量。该方法采用碱性条件下皂化后能很好地将样品中结合态角鲨烯释放，同时去除油脂干扰。以角鲨烷为内标，降低了由于进样量的变化，色谱条件的微小变化对定量结果的影响；同时，可部分补偿待测组分在样品前处理时的损失，具有较好的准确度和精密度。

4 植物角鲨烯高效液相检测方法与气相的区别

对植物中角鲨烯的检测不少科研单位会采用高效液相等检测方法进行监测分析。高效液相色谱主要采用反相液相色谱柱，应用紫外检测器。部分文献中也有少量研究以正相色谱配蒸发光检测器检测植物中角鲨烯。

在高效液相反相色谱中流动相以甲醇、乙醇、乙腈与水混合体系为主，但由于角鲨烯的极性较小，在此体系中溶解度较小，而且角鲨烯的紫外吸收强度较弱，所以采用高效液相色谱检测其灵敏度相对较低，受基质的干扰较大，在实践中一般需要采用硅胶柱事先净化处理。针对某些脱臭馏出物中的角鲨烯，高效液相色谱法一般不能区分角鲨烯及其角鲨烯异构体（需要配备载银色谱柱），从而导致其检测结果偏高，尤其是分离纯化得到的高含量角鲨烯检测过程中较为明显，液相色谱检测到的含量大大高于气相色谱。

采用气相色谱测定角鲨烯大部分都是以柱效较高的毛细管色谱柱配合氢火焰离子化检测器，利用毛细管色谱的分离能力或者采用气质联用利用质谱的结构鉴定功能，同时确定含量及结构。气相色谱中毛细管色谱柱在分离多不饱和脂肪酸甲酯过程中，能很好地分离多不饱和脂肪酸甲酯双键中的位置异构，而普通液相色谱则不能很好的区分双键异构及顺反异构。当检测对象是植物油、角鲨烯软胶囊及保健食品中的角鲨烯含量时，高效液相色谱检测结果与气相色谱类似，两者相差不大。在以脱臭馏出物为原料提取植物角鲨烯过程中，要注意角鲨烯异构体的干扰，以气相色谱检测为准，不能用液相色谱含量来度量提取过程中角鲨烯的含量，而且优先选择能够分离角鲨烯及其异构体的色谱柱，有条件的单位可以配置质谱检测器。

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