Sysmex XN-9000血细胞分析仪网织血小板检测及临床应用

孔令银

菏泽市立医院检验科，山东菏泽 274000

网织血小板（reticulated platelet,RP）是从骨髓释放出来的一种比较新的血小板，该细胞中含有残留的核糖核酸，且细胞的体积比较大，具有活性比其他的细胞更强，因此外周血的RP可以比较精确的反应骨髓血小板的动力学，为血液疾病的诊断提供参考[1]。传统对于RP的检查采取流式细胞仪，但是该种检测方法具有操作复杂、检查时间长等缺点，从而限制了临床的应用。Sysmex XN-9000血细胞分析仪是2012年在日本推出的一款全新的自动血细胞分析仪器，它以半导体激光流式细胞术以及核酸荧光染色和鞘流电阻抗检测等方法进行完美的融合，拥有特色的PLT-F通道、WPC通道以及RET通道，自动化检测程度较高。因此，该次将使用Sysmex XN-9000血细胞分析仪分析血液疾病患者以及健康人群中的RP情况，并对相关结果进行分析总结，为后续的临床诊断提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选择该院收治的96例血液疾病患者，按照患者的疾病情况分为A、B、C3组。A组患者为ITP疾病，为33例，男性患者17例，女性患者16例，年龄8～55岁，平均（32.2±17.0）岁，B 组为 AL 患者 25 例，男性患者 13例，女性患者 12例，年龄5～65岁，平均（33.2±10.2）岁，C组患者为AA，有38例，男性患者19例，女性患者 19 例，年龄 6～62 岁，平均（36.0±12.5）岁。 另选择同期进行健康体检的健康人群50名为对照组，男性29 名，女性 21 名，年龄 4～65 岁，平均（35.2±11.0）岁，其血小板正常，肝功能以及心电图等检查均正常，排除心血管疾病、糖尿病以及内分泌疾病患者。经统计分析以上4组人群中的年龄分布、性别构成比等均差异无统计学意义（P＞0.05），可以进行组间的互相比较。且该次的研究患者和家属均知情并签订知情协议，该次方案通过伦理委员会的审核。

1.2 研究方法

1.2.1 试剂与仪器 Sysmex XN-9000血细胞分析为原装进口，来自于日本东亚公司，96例血液疾病患者以及50名健康人群均来自该院，所有标本均为真空采血，使用EDTA-K2抗凝，采集血液后室温放置，然后在4 h内完成网织血小板的检测。

1.2.2 检测方法 直接对相关受试人员的外周血进行检测，使用特殊的荧光染料比如polymehtine以及Oxazine，与网织红细胞或者网织血小板中的DNA结合。根据细胞的大小将红细胞和血小板进行分开，并根据DNA的具体含量将细胞分为成熟以及未成熟，将成熟的血小板以及网织血小板给予不同的染色，通过分析获得RP比例[2]。

1.3 统计方法

相关的数据纳入SPSS 22.0统计学软件中进行分析比较，（x±s）表示计量资料，并采取 t检验分析，率（%）表示等级资料，然后采取H检验分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AA、ITP、AL组与对照组RP等指标比较

经过分析检测，3组患者的RP水平值均明显高于对照组，差异有统计学意义，A组及B组的水平值高于对照组，但C组的水平值明显低于对照组；血小板计数（PLT）、平均血小板体积（MPV）也存在一定程度差异，见表1。

表1 3组患者与对照组RP比较(x±s)

2.2 3组患者的诊断准确性比较

血小板的相关抗体PAIgG、PAIgA以及PAIgM荧光百分率为（10.4±5.0）、（9.4±4.4）、（7.2±3.1），对于疾病的诊断准确性中，A组＞B组＞C组，差异有统计学意义，见表2。

表2 3组患者的诊断准确性比较

3 讨论

RP是从骨髓中释放出来的新的血小板，与成熟的血小板比较，他具有更大的体积因此更加容易观察到，此外其活跃性更高，蛋白质的合成能力也更强，细胞质中含有较多的RNA，可以被核酸荧光染料染色，介于骨髓成熟的巨核细胞和成熟的血小板之间，是一种刚从骨髓释放出来的未成熟的细胞[3]。RP计数可以比较准确的反应骨髓血小板的生成情况，但单纯的血小板仅能反应外周血小板数量，不能反应骨髓血小板生程情况，因此在对于骨髓血小板的预测中，RP具有更高的价值。

3.1 RP对于ITP诊断应用

ITP为免疫系统反应引起的血小板破坏增加出血性的一种血液疾病，主要的特征为血小板减少以及骨髓巨核细胞增加。该疾病在育龄的阶段女性发病高于男性，但其他阶段两者的差异不显著[4]。该次对于33例ITF患者进行检测RF，并与健康人群的计数进行比较，结果显示ITF患者的计数明显的高于正常的对照组，韩琳琳[5]流式细胞仪分析ITF患者中的RP情况，显示ITP患者中的RP为（24.01±6.24）%，明显高于正常人群的（7.20±1.87）%，提示了 TTF换种中血小板破坏增加，使得骨髓生产血小板的速度加快，外周新生的血小板增加，使得了RF的计数提高。

3.2 RP对于AL诊断应用

AL为造血干细胞恶性克隆性疾病，患者体内存在的正常克隆造血以及白细胞克隆造血两组互相竞争的细胞群。在疾病发生时，机体内骨髓总的异常原始细胞以及白血病细胞就会大量的繁殖，从而抑制了其他细胞的正常造血，使得患者的机体免疫力下降容易出现感染、出血以及贫血等严重的并发症，如果不能得到及时的治疗会危及患者的生命。在该次的检查中我们发现，AL患者中的RP计数高于正常的对照组，冯萍等[6]采用流式细胞仪检查AL患者的RP情况，结果显示在初诊期患者的RP为 （5.4±4.25）%， 缓解期为 （16.54±2.64）%，在不同的时期其水平值差异明显，而健康人群为（8.27±2.5）%，明显低于患者的水平值，结果与该次报道基本一致。提示该疾病的血小板生产速度比较快。

3.3 RP对于AA诊断应用

AA是一组由于多种原因所导致的骨髓造血功能障碍性疾病，主要的临床特征为骨髓造血干细胞增生的降低、外周全血细胞减少等，临床表现为出血、贫血以及感染，研究显示AA的发生与化学药物、遗传以及放射等相关。年龄在15～25岁为该疾病的高发时间段，男性一般多于女性。在该次的分析中发现，AA患者的RP计数低于正常人群，主要是因为造血细胞受到抑制，使得血小板的生成减少，最终使得骨髓血小板生产出现障碍。蔡力力等[7]采用XE-5000检测AA患者中的RP 情况，结果为（1.87±1.63）%，正常为（5.83±3.10）%，结果与该次报道基本相近。

3.4 Sysmex XN-9000血细胞分析仪

Sysmex XN-9000血细胞分析仪是从日本发展而来的一种细胞分析仪，因为具有高效、快捷以及高准确度等优点，因此在临床的应用中一直受到关注。但随着实验室检查的不断增加以及对于自动化要求的增加使得，一个实验室通常会拥有多台血细胞分析仪，而不同的品牌和不同的型号会使得结果存在一定的差异，因此在实验室使用该仪器时建议要对仪器进行校正,对于该仪器一般测试的值与理论值比较时a值的范围（1.0±0.05）范围内，相关系数＞0.975[8-10]。 Sysmex XN-9000 血细胞分析仪具有较高的精密度和准确度，并且线性范围较广，相关性好，携带的污染率低，与其他的品牌仪器具有良好的可比性，分析的结果与厂家规定的性能基本一致，因此保证了相关的检测结果的准确性[11-12]。此外该仪器的操作也比较简单，适合于大批量的检测，可以辅助临床相关血液疾病等检测，临床应用范围广。

4 小结

在该次的资料分析中，采取XN-9000血细胞分析仪分析血液疾病中网织血小板的情况，结果发现在特发性血小板减少性紫癜以及再生障碍性贫血患者中，期体内的网织血小板计数明显高于正常人群，而急性白血病的患者网织血小板计数明显低于正常对照组，说明了网织血小板在不同的人群中其水平含量具有较大的差异，因此测定血液疾病患者的外周血网织血小板的水平值可以初步判断患者的疾病类型，为后续的临床诊断提供参考。3种疾病的准确性比较中，通过检测网织血小板相关的抗体如PAIgG、PAIgA以及PAIgM荧光百分率可以得出，检测特发性血小板减少性紫癜的准确率高于再生障碍性贫血以及急性白血病。说明取XN-9000血细胞分析仪在诊断不同疾病时具有不一样的敏感性，临床可以根据患者的具体情况选择检测的方法。3组患者的血小板计数均明显的低于正常人群，说明以上3种血液疾病的患者外周血小板均较低，而均有ITP组患者的MPV稍微高于正常人群，提示以上3种血液疾病采取XN-9000血细胞分析仪平均血小板体积时获得的结果无特征性，对于疾病的判断不利，因此在后续的临床应用中应该避免使用XN-9000血细胞分析仪检测血液疾病患者的MPV。

综上所述，Sysmex XN-9000血细胞分析仪可以比较准确的分析网织血小板的数量，从而反应骨髓巨核系统生成血小板的情况，对于血液疾病的诊断具有较高的应用价值。

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