BICE患儿脑脊液和血清S100b蛋白及NSE水平研究

，，，( 山东医学高等专科学校，山东 临沂 76000； 临沂市人民医院儿科)

腹泻相关性惊厥(Benign infantile convulsions associated with mild gastroenteritis，BICE)指无明显脱水、电解质紊乱等症状的轻度胃肠炎患儿出现的一种无热的、短暂的，多为全面性发作的惊厥，是一种同时累及消化系统及神经系统的疾病[1]。该病于1982年由日本学者 Morooka[2]首次提出，近年来逐渐受到国内外学者的关注，但由于对该病认识较晚，造成诊断与治疗的混乱，一些 BICE 患儿被诊断为胃肠炎合并癫痫、腹泻合并复杂性热性惊厥等。S100b是一种酸性钙结合蛋白，特异性地存在于神经系统中[3]，能参与机体免疫调节过程，在血清和脑脊液中的浓度变化可以反映中枢神经系统损害的程度[4]。神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase，NSE)是普遍存在于生物体内的一种酸性可溶性蛋白，是糖酵解途径的关键酶，存在于神经组织和神经内分泌组织中，在脑组织细胞的活性最高。当缺血、缺氧、中毒或损伤时，神经细胞和神经内分泌细胞膜的完整性受到破坏，神经细胞崩解，血脑屏障破坏，该酶通过脑脊液-脑屏障和血-脑屏障溢入脑脊液和血液中而致含量明显增高[5-6]。NSE是脑损伤敏感性及特异性标志物，能较为敏感的特异性反映神经元损伤的情况。本研究通过检测BICE患儿发作后脑脊液和血清中S100b蛋白和NSE水平的变，探讨二者对BICE患儿脑损伤的临床意义。

1 资料与方法

1.1研究对象 选取2016年10月到2017年9月在本院首次住院的36例BICE患儿为观察组，其中男16例，女20例；年龄6～38个月，其中0～12月8例，>12～24月22例，>24月6例，平均(18.6±3.2)个月；BICE患儿的诊断标准为：(1)既往健康的6个月～3岁的婴幼儿；(2)轻度胃肠炎伴无热惊厥，可有轻度脱水但无酸中毒及电解质紊乱；(3)惊厥在病程中可单次或多次发作；(4)发作间期脑电图正常；(5)血清电解质、血糖、脑脊液检查正常；(6)预后良好。需随访除外热性惊厥附加症、癫痫、脑炎脑病等疾患。另选同期住院的30例轻度腹泻患儿为对照组，其中男12例，女18例，平均(16.3±2.4)个月。两组患儿在年龄、性别比等方面比较无统计学差异(P>0.05)。

1.2标本采集 观察组患儿采集急性期(入院后24 h内) 脑脊液和血清标本和恢复期(临床治疗后5～7 d )血清标本；对照组入院后采集脑脊液和血清标本。留取脑脊液 1 ml和静脉血2 ml，离心后收集上清液，冻存于-20 ℃冰箱待测。同时送检脑脊液常规、生化。剔除溶血标本。

1.3检测方法 运用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测脑脊液和血清中S-100b蛋白和NSE水平，其中NPT ELISA试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司，操作步骤严格按试剂盒说明书进行。

2 结果

2.1两组血清中S-100b蛋白、NSE水平比较 见表1。由表1可见，观察组急性期、恢复期血清中S-100b蛋白、NSE水平均高于对照组，以观察组急性期最高，恢复期虽有所降低但仍高于急性期。

表1 两组患儿S-100b和NSE水平的比较

注：*观察组为急性期血清，#为恢复期血清。

2.2两组脑脊液中S-100b蛋白和NSE水平比较 观察组急性期脑脊液中S-100b蛋白及NSE水平与对照组比较差异有统计学意义，观察组急性期均高于对照组。见表1。

3 讨论

BICE发病年龄为12个月左右的婴幼儿，男性患儿多发，其病因及发病机制目前尚不明确，主要考虑与婴幼儿脑发育不完善，髓鞘未完全形成、神经递质不平衡、惊厥阈值低有关[7]。惊厥发作可能引起暂时性的脑功能障碍，又可能造成不可逆的脑损伤。近年来，我国学者也开始关注此病，其早期诊断及治疗目前已受到广泛关注。

S-100b蛋白是一种钙结合蛋白，在细胞增殖、分化、存活及迁移等过程中发挥重要作用[5]，主要存在于中枢神经系统的星形细胞、少突神经胶质细胞及周围神经系统的雪旺细胞，脑组织损伤时S-100b蛋白从受损的细胞内溢入脑脊液和血液[6]，故能特异性地代表中枢神经系统损伤。本研究结果显示，BICE患儿脑脊液和血清中中S-100b蛋白含量明显高于对照组，急性期显著高于恢复期，这反映了BICE发生时神经胶质细胞凋亡和死亡增加，血脑屏障受到破坏，神经胶质细胞受刺激而产生的S-100b蛋白增加，使脑脊液和血清中S-100b蛋白浓度增加。S-100b蛋白含量与血脑屏障破坏程度呈正相关，与神经细胞损伤的程度相关，与文献报道相符。本研究同时显示，S-100b蛋白含量低的患儿预后明显好于含量高的患儿，且并发症也少。这表明 S-100b蛋白含量高低的变化可以有效提示病情的轻重及预后发展变化。

NSE是一种分子量约为80 kD的酸性蛋白酶，在糖酵解的过程中可以催化ɑ-磷酸甘油形成磷酸烯醇式丙酮酸[8]。NSE具有神经系统特异性，主要存在于脑组织、脊髓神经元及其神经突起之中，在神经内分泌细胞如腺垂体、松果体、甲状腺有一定的分布。当脑损伤等因素影响了神经元细胞的代谢变化，并导致神经元细胞膜功能与结构受损时，NSE从神经元轴浆中释放至脑脊液中[9]。当血-脑脊液屏障通透性增加，NSE 便进入血液循环，使血清中NSE 水平上升。临床上常用血清 NSE水平量化脑损伤的程度。有文献报道[10]，癫痫动物模型的血清NSE水平较正常组明显升高，国内实验也发现癫痫发作后12 h血清NSE逐渐增高，24 h达最高，提示癫痫发作导致神经元损伤，抽搐频繁发作时神经元损伤更严重。有研究表明[11]，脑炎症性损伤时，血清、脑脊液NSE明显增高。因此，检测血清、脑脊液中 NSE的变化可反映脑组织损伤情况。本研究结果显示，BICE患儿脑脊液和血清中中NSE含量明显高于对照组，急性期显著高于恢复期，这表明脑脊液中NSE的水平与BICE患儿的严重程度具有相关性，即临床表现重的患儿脑损伤亦重，血脑屏障破坏严重 ，脑脊液中的NSE水平升高越明显，预后越差 ，对判断病情及预后评估有具有重要提示意义。因此，NSE可作为神经元及神经内分泌细胞的一个标志酶，检测 NSE可作为临床早期判断惊厥性脑损伤严重程度的可靠依据，恢复期判断脑损伤修复的客观指标。

综上所述，通过对BICE患儿脑脊液及血清S-100b蛋白和NSE水平的研究，不仅能判断BICE发生时患儿颅脑损伤程度的关系，而且能够评估预后，从而指导临床治疗。

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