茶叶中乙酰甲胺磷农药残留量的测定

◎ 邓金兰

（茂名市食品药品检验所，广东 茂名 525000）

乙酰甲胺磷是有机磷类农药，现在农业种植过程使用较多的农药，有部分农药残留在小麦、茶叶和蔬菜等食品中，影响人们的身体健康。乙酰甲胺磷会抑制体内胆碱酯酶，进入人体后通过血液、淋巴运送至身体各个器官，对人的伤害大，测定食品中有机磷农药残留关系着人们的食品安全。乙酰甲胺磷残留容易吸附和高温容易分解，乙酰甲胺磷残留较难准确测定。GB/T5009.103-2003植物性食品中的乙酰甲胺磷残留的测定方法是采用玻璃柱测定乙酰甲胺磷的残留[1]，但用玻璃柱测定乙酰甲胺磷的峰形不好，响应值低，结果重复性差。本文采用DB-1701毛细管柱代替玻璃柱，用乙腈代替丙酮作提取液，测定茶叶中乙酰甲胺磷残留的结果重现性好，检测限低，回收率高[2-3]。

1 实验部分

1.1 原理

含有机磷的样品在富氢火焰上燃烧，以HPO碎片的形式放射出波长526 nm的特征光。这种特征光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经过微电流放大器放大后被记录下来，样品的峰高与标准品的峰高相比较，计算出相当的样品含量。

1.2 仪器与试剂

气相色谱GC-7890A：安捷伦气相色谱配备火焰光度检测器、电动振荡器、氮吹仪、色谱柱：DB-1701毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 µm）。

试剂：丙酮（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、乙酰甲胺磷标准品纯度＞99%。

1.3 色谱条件

色谱条件：检测器温度250 ℃；进样口温度200 ℃；柱温使用程序升温：初始温度80 ℃保持1 min，程序升温第一阶20 ℃/min升到180 ℃；程序升温第二阶20 ℃/min升到220 ℃；柱流速：1 mL/min；不分流进样；氢气流量75 mL/min；空气流量：100 mL/min；进样量 1 µL。

1.4 标准曲线的配制

乙酰甲胺磷标准溶液配成浓度为0.02、0.04、0.08、0.16、0.2、0.32、0.4µg/mL和0.64 µg/mL的标准使用溶液，绘制标准曲线。

1.5 样品处理

样品添加标物的水平为0.04、0.20、0.50 mg/kg，每个浓度分别加入丙酮和乙腈两种不同的溶剂提取，每个浓度每种溶剂做个3平行样品，测得丙酮提取液回收率与乙腈提取液回收率。

样品经过粉碎机粉碎，过20目筛，称取茶叶试样10 g左右，置于150 mL的具塞三角瓶中，分别加入丙酮和乙腈40 mL，样品置于电动振荡器振摇1 h，过滤，浓缩。滤液过活性炭小柱，活性炭小柱预先用10 mL乙腈-甲苯（体积比3∶1）淋洗活性炭小柱，弃去淋洗液。把样品浓缩液转移至活性炭小柱，用5 mL乙腈-甲苯淋洗液洗涤样品瓶，把洗涤液转移到活性炭小柱，再用20 mL乙腈-甲苯淋洗液淋洗活性炭小柱，收集滤液浓缩。丙酮滤液置于氮吹仪下40 ℃水浴浓缩为1 mL，乙腈滤液置于氮吹仪下50 ℃水浴浓缩为1 mL，按1.2色谱条件进样1.0 µL了用火焰光度检测器检测。

2 结果分析与讨论

2.1 提取方式的影响

丙酮提取液回收率与乙腈提取液回收率见表1和表2。由表1和表2的结果可知，用丙酮作提取液和用乙腈作提取液检测的回收率结果相差不大，都达到标准的要求，因此可以用乙腈代替丙酮作为提取液。丙酮的沸点是56 ℃，容易挥发，在操作过程中容易被吸入人体内。乙腈是稳定的极性物质，沸点是81 ℃，乙腈沸点比丙酮高，在操作过程中不易挥发。用乙腈作提取液所检测的结果，对检验人员的身体毒害小于丙酮。

表1 丙酮提取液回收率结果表

表2 乙腈提取液回收率结果表

2.2 毛细管色谱柱和衬管的影响

用玻璃柱检测乙酰甲胺磷目标物的响应值低，峰形不好，甚至响应不到，因为乙酰甲胺磷容易分解和降解，测定的重复性差。如果用带玻璃棉的衬管检测样品响应的乙酰甲胺磷没有响应值，因为乙酰甲胺磷被玻璃棉大量的吸附。玻璃棉的作用是使样品充分气化，阻拦部分较大没被气化的物质进入色谱柱。但乙酰甲胺磷是容易分解和降解的物质，被玻璃棉大量的吸附后对结果的影响很大，测定乙酰甲胺磷不适合用带有玻璃棉的衬管。

采用DB-1701毛细管柱代替玻璃柱，用不带玻璃棉的不分流衬管，检测乙酰甲胺磷的响应值高，峰形好，测定的结果重现性好。图1是用带玻璃棉的不分流衬管测定的谱图，图2是用带玻璃棉的不分流裤管测定的谱图。不分流玻璃衬管使用前先必须进行硅烷化处理，玻璃衬管的硅烷化处理步骤是把二甲基二氯硅烷试剂用正己烷稀释为5%～10%，然后将玻璃衬管浸泡在硅烷化试剂12 h，然后用甲醇淋洗，干燥即可。

图1 带玻璃棉的不分流衬管谱图

图2 不带玻璃棉的不分流衬管谱图

2.3 浓缩的影响

用50 ℃水浴氮吹浓缩代替旋转蒸发浓缩，旋转蒸发时溶剂沸腾会造成样品的损失，回收率相对低。改用氮吹仪浓缩更准确、可减少样品处理时的损失。氮气是惰性气体，能隔绝氧气，防止氧化的作用下达到浓缩的目的，一次可同时处理十几个样品，缩短了样品的处理时间，提高了回收率。

2.4 标准曲线的线性关系

将配制好浓度为 0.02、0.04、0.08、0.16、0.2、0.32、0.4µg/mL和0.64 µg/mL的标准系列作曲线用气相色谱测定，以保留时间定性，以峰面积定量。结果表明，在0.02～0.64 µg/mL范围内乙酰甲胺磷显良好线性关系，乙酰甲胺磷的线性关系R2=0.9989，函数f(x)=1.60509e+006x+0，重复测定浓度0.32 µg/mL标准溶液7次，RSD值为1.2%，仪器重现性较好。

2.5 活性炭小柱净化

茶叶用丙酮和乙腈等有机试剂提取的滤液含有大量叶绿素，滤液用活性炭小柱净化，活性炭小柱能有效吸附叶绿素等杂质，净化的效果比GB/T5009.103-2003标准中加0.2 g活性炭粉净化好，过活性炭小柱处理的滤液减少了对仪器进样口和检测器的污染。

3 结论

实验茶叶样品用乙腈代替丙酮为提取液，50 ℃水浴氮吹浓缩代替旋转蒸发浓缩，用活性炭小柱净化，采用DB-1701毛细管柱代替玻璃柱，用不带玻璃棉的不分流衬管，测定乙酰甲胺磷。该方法所测的乙酰甲胺磷结果准确度高、精密度高、回收率高、检测限低、检测过程方便和快捷，解决乙酰甲胺磷检测响应值小和加收率低的问题，能满足植物类样品测定乙酰甲胺磷残留的要求。

[1]中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.103-2003 植物性食品中的甲胺磷和乙酰甲胺磷农药残留量的测定[S].北京：中国标准出版社，2004.

[2]杨龙江，刘拉平，李 岚.蔬菜中有机磷农药残留研究及对策[J].环境污染，2003，25（6）：370-372.

[3]康文靖.气相色谱仪在蔬菜中有机磷农药残留检测中的应用[J].湖南农业科学，2010（1）：76-78.