不同基因型轻型β-地中海贫血患者血液学特征

裴元元 冉健 丛潇怡 商璇 熊符 杜丽 魏凤香

1广东省深圳市龙岗区妇幼保健院遗传实验室（广东深圳 518172）；2南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室（广州510515）；3广东省妇幼保健院医学遗传中心（广州 510010）

β-地中海贫血是由于β-珠蛋白基因突变，导致β-珠蛋白合成减少或功能完全丧失，多余的α-珠蛋白沉积在红细胞膜上，从而造成红细胞破坏的一种溶血性疾病。临床上主要分为轻型、中间型、重型三个类型［1］。轻型β-地中海贫血患者临床上一般无症状或仅有轻度贫血，实验室检查主要表现为小细胞低色素，红细胞轻度形态改变且脆性试验阳性。本文中，我们统计分析了轻型β-地中海贫血患者的血液学参数，并对比β0/βN和β+/βN型β-地贫患者间的参数差异，拟通过简易分析快速鉴别轻型β-地贫的不同基因型，现报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象2013年10月至2017年5月我院收治的646例籍贯为广东、广西等，基因型为β0/βN或β+/βN且未合并α-三联体或四联体、异常血红蛋白突变、HPFH或δβ-地中海贫血的轻型β-地中海贫血患者，年龄0～47岁，男162例，女484例。

1.2 方法

1.2.1 血液学参数分析取静脉血2 mL，EDTAK2抗凝。东亚SYSMEX血细胞分析仪分析红细胞参数：红细胞计数（RBC）、血红蛋白浓度（Hb）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度变异系数（RDW-CV）。Sebia全自动毛细管电泳仪进行血红蛋白电泳，分析HbA2百分比。

1.2.2 地贫基因检测采用全血基因提取试剂盒提取外周血基因组DNA，基因诊断试剂盒诊断β-地贫的17种点突变（PCR/寡核苷酸探针反向印迹杂交法）。

1.2.3 统计学方法计数资料用构成比表示，计量资料用均数 ±标准差表示，利用SPSS 16.0软件对原始数据进行t检验。

2 结果

2.1 血液学参数统计646例β-地中海贫血患者主要表现为小细胞、低色素且HbA2明显升高。平均RBC为（5.00±0.77）×1012/L、平均Hb为（101.83± 13.4）g/L、MCV 为（64.91 ± 7.83）fL、MCH 为（21.09± 11.07）pg、MCHC为（317.33± 15.27）g/L、平均 RDW-CV为（17.55±2.35）%、平均 HbA2为（5.39±0.72）%。

2.2 地贫基因检测结果β0/βN型β-地贫患者346例，β+/βN型 β-地贫患者 300例，基因型分布见表1。

表1 646例β-地中海贫血患者的基因型分布Tab.1 Genotypic distribution of 646 patients with beta thalassemia

2.3 β0/βN与β+/βN型β-地贫患者参数对比分析β0/βN型β-地贫患者的MCV与MCH明显低于β+/βN型β-地贫患者。组间比较 RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV、HbA2等血液学参数，结果显示，除Hb及MCHC外，其余参数的组间差异均有统计学意义（表2）。

表2 β0/βN与β+/βN型β-地贫患者血液学参数对比分析Tab.2 Comparative analysis of hematological parameters in beta thalassemia β0/βNand β+/βN ±s

表2 β0/βN与β+/βN型β-地贫患者血液学参数对比分析Tab.2 Comparative analysis of hematological parameters in beta thalassemia β0/βNand β+/βN ±s

注：*P＜0.05

β0/βN β+/βN P值HbA2（%）5.51±0.67 5.26±0.74 0.002*RBC（× 1012/L）5.07±0.72 4.92±0.83 0.012*Hb（g/L）1.01±12.94 1.03±13.86 0.071 MCV（fl）63.28±6.82 66.64±8.95 0.000*MCH（pg）20.16±3.28 22.17±15.81 0.022*MCHC（g/L）316.50±15.25 316.54±26.47 0.982 RDW-CV（%）17.82±2.19 17.21±2.49 0.003*

3 讨论

地中海贫血是由于珠蛋白基因缺失或突变导致珠蛋白链合成减少或缺如而引起的遗传性溶血性疾病，临床上根据合成障碍的肽链不同，主要分为α-地贫和β-地贫两大类。该病轻者可无临床表现，重者以进行性溶血性贫血为主要特征，中重型地贫属于致死或致残性疾病，目前尚无有效的治疗方法。大规模筛查突变基因携带者，阻止中重型地贫患儿出生是最必要的有效措施［2-3］。

β-地中海贫血在广西、广东的发生率高达6.43%和2.54%［1］。β-地中海贫血主要是由于β-珠蛋白基因点突变所引起，也有少部分由于β-珠蛋白基因的缺失所致。β-珠蛋白基因突变主要通过转录突变、RNA加工突变、RNA翻译突变、显性突变等影响β-珠蛋白基因的功能，β-珠蛋白链合成减少即为β+-地中海贫血，β-珠蛋白链完全不能合成即为β0-地中海贫血，β-地中海贫血杂合子（β0/βN、β+/βN）通常表现为轻型β-地中海贫血。

目前，MCV、MCH、HbA2广泛应用于地贫筛查［4-5］，尤其HbA2筛查β-地贫的灵敏度和特异度均很高［2，6-8］。本文研究了646例轻型β-地贫患者的红细胞参数，主要表现为明显的MCV、MCH降低和HbA2升高，Hb、RDW-CV可见轻微异常，RBC及MCHC未见明显异常。646例患者中，β0/βN基因型占53.5%（346/646），β+/βN基因型占46.5%（300/646），以 β654/βN（33%）、β41-42/βN（32.5%）、β17/βN（14.4%）、β-28/βN（10%）为主，与深圳地区人群最常见突变类型基本一致［9］。对比分析β0/βN与β+/βN的红细胞参数，我们发现，除Hb、MCHC外，组间RBC、MCV、MCH、RDW-CV、HbA2差异均有统计学意义。与β+/βN患者相比，β0/βN患者的MCV、MCH明显降低，MCV在63 fL左右，MCH在20 pg左右；RDW-CV、HbA2明显升高。提示实际临床工作中可通过综合分析红细胞参数，尤其MCV、MCH降低幅度及HbA2升高幅度初步区分β0/βN与β+/βN型β-地贫，做好鉴别诊断。另外，本研究还发现2例 β0/βN及2例 β0/βN共4 例轻型β-地贫患者的血液学参数尤其MCV、MCH、HbA2未见任何异常，即仅通过血液学筛查极易造成漏诊，有赖于DNA分子诊断。

综上所述，鉴于不同基因型的轻型β-地中海贫血拥有各自独特的血液学特征，因此，实际工作中应对各血液学参数联合筛查对比分析，降低漏检率，尽可能减少中重型β-地中海贫血患儿的出生，提高人口素质。

［1］徐湘民.地中海贫血预防控制操作指南［M］.北京：人民军医出版社，2011：20-25.

［2］裴元元，冉健，李高驰，等.单个或联合血液学指标检测在地中海贫血筛查中的应用价值研究［J］.中国优生与遗传杂志，2015，23（7）：24-25.

［3］裴元元，李高驰，冉健，等.深圳地区两种类型的珠蛋白生成障碍性贫血的基因型及表型研究［J］.检验医学与临床，2015，12（14）：1981-1983.

［4］周文英.血常规红细胞参数对β-地中海贫血诊断、筛查价值研究［J］.数理医药学杂志，2016，29（2）：217-219.

［5］陈星，初德强，梁开艳，等.全自动毛细管电泳技术在筛查地中海贫血中的临床诊断价值［J］.中国实验诊断学，2014，18（4）：635-637.

［6］郑琳，黄海龙，范向群，等.血细胞和血红蛋白分析在地中海贫血中的应用价值［J］.中国妇幼保健，2016，31（3）：547-549.

［7］何天文，余丽华，郭浩，等.ROC曲线分析血红蛋白A2筛查地中海贫血的价值［J］.中国实验血液学杂志，2016，20（6）：1828-1832.

［8］许宏兴，张兰新，陆小营.红细胞参数在鉴别成人轻型β-地中海贫血和缺铁性贫血中的价值［J］.中外医学研究，2017，8（15）：67-68.

［9］袁晖，吴维青，吴晓霞，等.深圳地区育龄人群地中海贫血基因型分布调查［J］.中山大学学报（医学科学版），2012，33（4）:553-557.