HE4、PRO-GRP和NSE联合检测在小细胞肺癌早期诊断中的应用价值

陈 波 杨万勇 吴国荣 阮富旺 陈小珑 郑媛媛

小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer，SCLC)是肺癌的一种特殊类型，属于恶性程度极高的神经内分泌肿瘤，约占肺癌的15%～20%；常于中老年时发病，男性多于女性，具有早期转移、快速增长、对初始化疗敏感的特征，尽管初始治疗高度敏感，但是高复发率使得其远期生存仍未得到明显改善，晚期SCLC 5年生存率<15%[1]。预后较差，故早期发现早期诊断、制定合理的治疗方案和评估疗效十分重要。

美国临床生化委员会和欧洲肿瘤标志物组推荐的诊断原发性肺癌标志物为CEA、NSE、PRO-GRP、CYFRA21-1和SCC等。其中用于诊断SCLC常用的肿瘤标志物：NSE和PRO-GRP，NSE敏感性较好但特异性不够[2]；PRO-GRP敏感性及特异性均好于NSE,但存在漏诊及误诊情况[3]。现在又增加了人附睾蛋白4(HE4), 近年来国内的一些学者也开始了针对性的研究，研究发现肺癌患者的血清HE4明显增高,同时也在肺癌肿瘤组织中高表达，并且血清HE4的数值和患者不良的预后正相关。国内的一些研究数据提示血清HE4对小细胞肺癌诊断的阳性率约为70%～80%[4-5]。所以本次课题研究选用诊断SCLC敏感性较高的PRO-GRP和NSE与HE4一起联合进行检测，探讨HE4在早期肺癌的诊断价值，及联合相关肿瘤标志物对提高SCLC早期诊断的敏感性和特异性。

1 资料和方法

1.1 研究对象

收集2014年10月—2017年8月在同济东莞光华医院门诊或住院部被确诊为原发性SCLC患者21例，其中男性12例，女性9例，年龄47～76岁，平均(63.4±7.7)岁。根据国际抗癌协会2009年修订的第7版国际肺癌TNM分期标准分期，符合Ⅰ+Ⅱ期的7例，Ⅲ期的9例，Ⅳ期的5例，执行标准：均经支气管镜检活检、病理组织学、胸水脱落细胞学及细胞穿刺，并结合免疫组化染色及影像学检查确诊为肺癌。所有患者均未接受任何放、化疗治疗，在未进行任何治疗前抽取外周血检测。收集2016年8月—2017年6月在我院门诊检查确诊的40例肺炎或肺部良性病变患者作为良性对照组，其中男26例，女14例，年龄44～77岁，平均(60.2±8.9)岁，该组患者均排除其他部位恶性肿瘤；同期收集于我院体检中心，经常规体格检查，血液检查、胸部影像学检查均正常者50名设为健康对照组，其中男32名，女18名，年龄40～68岁，平均(57.9±9.8)岁。

1.2 方法

1.2.1 标本收集 未经任何治疗且于清晨空腹抽取静脉血5 mL室温静置1 h左右，以离心半径23 cm，3 000 r/min离心10 min后分离血清，置于-70℃保存待检。

1.2.2 仪器与试剂 HE4、PRO-GRP和NSE检测均采用电化学发光免疫法，使用罗氏E601及罗氏公司专用配套试剂盒，按说明书操作，其正常值分别为：HE4 <140 pmol/L；PRO-GRP 0～63.0 pg/mL；NSE 0～16.3 ng/mL。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 各组别HE4、PRO-GRP和NSE检测数值比较

SCLC组患者血清HE4、PRO-GRP和NSE检测数值明显高于良性对照组及健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)；而良性对照组及健康对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

组别HE4/pmol·L-1tPPRO-GRP/ug·mL-1tPNSE/U·L-1tPSCLC组(n=21)168.2±78.1--359.6±195.2--40.2±32.6--良性对照组(n=40)65.8±22.35.510<0.0154.1±24.59.413<0.0111.7±8.15.287<0.01健康对照组(n=50)47.6±42.58.398<0.0143.5±18.211.448<0.019.6±4.76.579<0.01

注：-表示无对比数据；t、P值均是SCLC组与其他两组比较的值

2.2 SCLC患者HE4、PRO-GRP和NSE检测数值与肺癌临床分期的关系

I+Ⅱ期SCLC患者血清HE4水平高于肺部良性病变患者(t=2.781，P<0.05)；而I+Ⅱ期患者PRO-GRP、NSE水平与肺部良性病变患者的检测数值无统计学意义(P>0.05)；Ⅲ～Ⅳ期SCLC患者血清HE4、PRO-GRP和NSE水平均明显高于I+Ⅱ期SCLC患者(P<0.05)。见表2。

检测项目TNMⅠ+Ⅱ期(n=7)Ⅲ期(n=9)Ⅳ期(n=5)HE4/pmol·L-1123.8±55.19182.4±92.60166.8±78.61PRO-GRP/pg·mL-192.49±41.22410.6±157.1517.8±202.8NSE/ng·mL-122.10±37.3765.2±65.4462.8±114.8

2.3 血清HE4、PRO-GRP和NSE单独诊断及三项联合检测协同诊断的特异性、敏感性及诊断准确率的比较

三项单项检测SCLC患者，PRO-GRP与HE4敏感性较高，三项联合检测敏感性提高到80.95%。见表3。

2.4 HE4、PRO-GRP和NSE单项及三项联合检测对SCLC的诊断价值评价

以病理结果为金标准，以健康对照组和小细胞肺癌组为对照，绘制血清HE4、PRO-GRP和NSE单项及三项联合检测诊断SCLC的ROC曲线。曲线下面积分别为0.950、0.942、0.783和0.976。ROC曲线显示对小细胞肺癌的诊断，三项联合检测优于单项检测，而HE4优于PRO-GRP及NSE。见图1。

表3 三项肿瘤标志物单项及联合检测的特异性、敏感性及准确度比较 (%)

图1 HE4、PRO-GRP、NSE及联合检测对SCLC诊断的R0C曲线

3 讨论

PRO-GRP是已被推广的肺癌肿瘤标志物，同时现在已作为涉及诊断SCLC肿瘤标志物的首选[6]，而NSE作为SCLC的辅助诊断的价值也被广泛认可[7]。本次研究PRO-GRP对SCLC的敏感度为66.67%，特异性为70.00%，具有较高临床应用价值，与报道相符[8]。本次研究中NSE的阳性率为57.14 %，特异性为65.56%，较PRO-GRP敏感性及特异性均有不足。

HE4是近年来新发现的一种肿瘤标志物，但其并非一种特异性的肿瘤相关蛋白[9]，在子宫内膜癌、肺癌、乳腺癌等肿瘤组织中均有较高的阳性率[10-12]。HE4作为一种新的肿瘤标志物，国内外均有研究表明其在肺癌中高表达[5，13]。肖然等[6]对SCLC患者血清中HE4含量进行测定，80%的SCLC患者血清HE4水平升高。本次研究显示Ⅲ～Ⅳ期SCLC患者血清HE4浓度明显高于健康体检者及肺良性病变患者，I～Ⅱ期SCLC患者血清HE4浓度也与健康体检者及肺良性病变患者有差异，总体敏感性66.67%，特异性88.89%，准确度84.69%，提示其对SCLC有较高的辅助诊断价值，同时也存在临床分期水平的差异，晚期患者(Ⅲ～Ⅳ期)HE4水平明显高于早期患者(I～Ⅱ期)，对肺癌患者的分期有诊断意义；早期患者(I～Ⅱ期)HE4水平较健康体检者和肺良性病变患者有升高，而PRO-GRP和NSE水平与健康体检者与肺炎患者无明显差异，说明HE4较PRO-GRP和NSE更具有早期诊断的价值。

由于单项TM的检测其敏感性及特异性均不能完全满足临床对SCLC的早期诊断要求，故临床多采用多项联合检测的方法以弥补单项检测敏感性及特异性的不足。故本次研究选取了对诊断SCLC较为敏感的三种肿瘤标志物联合检测患者，其敏感性达80.95%，与各单项比较差异有统计学意义。从绘制的各检测项目ROC曲线分析，HE4对SCLC诊断的敏感性较PRO-GRP和NSE要更高，HE4参与的联合检测的敏感性也高于任一单独检测，说明三项指标联合后能有效提高诊断率，但特异性及准确率不及HE4、PRO-GRP单项诊断。本次研究数据提示HE4在SCLC I～Ⅱ期的诊断敏感性也具有统计学意义(P<0.05)，同时HE4在NSCLC早期也有显著诊断价值[14]，因此HE4在肺癌早期诊断上具有较高的临床应用价值，尤其是对高危人群的筛查方面有较好的应用前景。同时为了弥补特异性、准确率不高的缺陷，当筛查出阳性后，我们必须做到密切结合患者的临床病史、临床症状、影像及病理检查和其他辅助检查资料，来保证其诊断的准确性。

参考文献

[1] 杨 兴，孙桂荣，丛培珊，等.胃泌素释放肽前体对小细胞肺癌的诊断价值 [J]. 中华检验医学杂志，2012，35(8)：736-741.

[2] 聂婷婷，王迎难，张家祺，等. 血清胃泌素释放肽前体对小细胞肺癌的诊断价值 [J].临床内科杂志，2014，33(1)：25-27.

[3] 蒙荣钦，李昌林，虞小林，等. 血清Pro—GRP对小细胞肺癌的诊断价值的Meta分析 [J].现代肿瘤医学，2013，21(7)：1514-1517.

[4] 于 飞,王 倩,钟殿胜,等. 血清人附睾蛋白4检测对肺癌的诊断意义[J].天津医院，2014，24(2)：116-118.

[5] 肖 然，胡昊昀，王 瑞，等.血清肿瘤标志物HE4检测在肺癌诊断中的应用价值探讨 [J]. 医学检验，2014，29(9)：893-896.

[6] CHANTAPET P，RIANTAWAN P，LEBNAK P，et al．Utility of serum cytokeratin 19 fragment(PRO-GRP) and carcinoembryonic antigen(CEA) as tumor markers for non-small cell lung cancer[J]．J Med Assoc Thai，2000，83(4)：383-391．

[7] 张启贵,林建伯.NSE、CYFRA21-1和FIB联合检测对非小细胞肺癌患者临床意义[J].中国现代医生,2017,55(35):29-31.

[8] 徐红萍,薛 冰,徐 笛. 肿瘤标志物CEA、NSE、PRO-GRP联合检测在肺癌诊断中的应用 [J].实用医学杂志,2010，26(16)：2943-2944.

[9] 谢淑华，柯方妮. CA125、CA153与HE4联合检测在妇科恶性肿瘤诊断中的临床价值 [J].现代医院，2015，15(1)：69-70.

[10] 蔡 斌．人附睾蛋白4在妇科肿瘤诊断及监测中的应用[J]．实用妇产科杂志，2012，28(1)：25-27．

[11] 刘秋红,卢 艳,王 博,等.血清HE4与CA125联合检测在早期卵巢癌诊断中的应用价值探讨[J].国际医药卫生导报,2016,22(14):2167-2169.

[12] 陆 森,黄文添,龙 燕,等.HE4联合CA125在早期诊断卵巢肿瘤中的临床意义[J].国际医药卫生导报,2017,23(8):1194-1197.

[13] WAHORI K，SUZUKI H，KISHI Y，et al．Serum HE4 as a diagnostic and prognostic marker for lung cancer[J]．Tumour Biol，2012，33(4)：1141-1149．

[14] 陈 波，吴国荣，杨万勇，等.HE4、CYFRA21-1和TPS联合检测对非小细胞肺癌的早期诊断价值 [J].实用医学杂志，2016，32(22)：3721-3724.